Диссертация (1140276), страница 10
Текст из файла (страница 10)
Следует учитывать в отношении эскалацииоксидативного стресса при ИКГМ низкое содержание в тканях мозгаантиоксидантов (прежде всего, витамина А), низкую активность ферментовантиоксидантной защиты и высокое содержание двухвалентного железа. Наряду суказанными, на поздних этапах ИКГМ имеют значение в увеличении площадиинфаркта процессы локального воспаления, аутоиммунной реакции, расстройствамикроциркуляциииз-задизрегуляциитонусасосудов,эндотелиальнойдисфункции и как следствие нарушение трофической и регенераторной функциинервной ткани.Таким образом, морфологические исследования в области ишемии корыголовного мозга у крыс зафиксировали признаки ишемического повреждениянервной ткани. Полученные данные согласуются с результатами других55исследований по изучению динамики морфологических изменений в тканиголовного мозга после ишемического инсульта [28, 31, 282].При оценке экспрессии VEGF в группе животных с экспериментальнойИКГМ в очаге ишемии отмечено увеличение данного показателя с 3 сутокэксперимента (на 59% по медиане по сравнению с группой ложнооперированныхживотных), которое сохраняется на 7 сутки (увеличение на 105%), 14 сутки(увеличение на 200%), 30 сутки эксперимента (увеличение на 295%) (таблица 3).Таблица 3Экспрессия VEGF в очаге повреждения при экспериментальной ИКГМ(Me [Q1-Q3], количество клеток / у.е.
площади)Группыживотных1. Ложнооперированные2. ИКГМРазличия(критерийМанна–Уитни)3 сутки7 сутки14 сутки8,509,5010,00[7,00; 9,00] [8,00; 10,00] [8,75; 11,25]13,5019,5030,00[12,75; 15,0] [18,0; 20,25] [28,75; 31,00]P1-2<0,001P1-2<0,001P1-2<0,00130 сутки10.00[10,00; 12,00]39,50[38,00; 41,25]P1-2<0,001Отмечены значимые (p<0,01) различия между экспрессией VEGF приИКГМ на 7 сутки по сравнению с 3 сутками, на 14 сутки по сравнению с 3 и 7сутками, на 30 сутки по сравнению с 3, 7, 14 сутками наблюдения.
Обнаруженныеизменения экспрессии VEGF являются отражением фокальной ишемии головногомозга и нарушения целостности ГЭБ [102]. Принято считать, что повышениеэкспрессии VEGF в ишемизированной ткани является одним из основныхкомпенсаторных механизмов на повреждающее воздействие в ткани головногомозга [176].Известно, что в условиях гипоксии снижается активность супрессорногофактора фон Гиппеля-Линдау (VHL, von Hippel-Lindau factor) – компонентаубиквитин протеинлигазы – и тем самым повышается экспрессия индуцируемого56гипоксией фактора транскрипции (HIF-1 alpha).
Таргентными генами HIF-1 alphaвыступают в том числе гены VEGF, РЕСАМ-1, эритропоэтина, гемоксигеназы-1 идр., их продукты играют ключевую роль в процессах нейрорепарации,ангиогенеза, нейротрофики после инсульта [183, 184]. Отметим, что VEGF и ЭПОявляются продуктами одного пути активации генов HIF-1 alpha, что можетуказывать на их функциональную синергичность при ишемических пораженияхголовного мозга.Повышение экспрессии VEGF является пусковым фактором для активациинеоангиогенеза в очаге ишемии коры головного мозга. При проведениикорреляционногоанализамеждуколичествоммелкихсосудоввочагеишемического повреждения и экспрессией VEGF нами установлена прямаяслабая связь на 3 сутки ИКГМ (коэффициент корреляции Спирмена R=0,31;p<0,05), на 7 сутки ИКГМ (коэффициент корреляции Спирмена R=0,36; p<0,05),средней силы связь на 14 сутки ИКГМ (коэффициент корреляции СпирменаR=0,58; p<0,05), на 30 сутки ИКГМ (коэффициент корреляции Спирмена R=0,50;p<0,05).На следующем этапе работы оценивали неврологические показатели,микроциркуляцию в очаге повреждения и гематологические показатели приэкспериментальной ИКГМ.3.1.2 Неврологический и этологический статус крыс приэкспериментальной ишемии коры головного мозгаДля оценки неврологического статуса при экспериментальной ИКГМиспользовали шкалу Garcia J.
H. [150]. Применение этого теста позволяетоценивать следующие параметры, характеризующие поведенческую активностьживотных, двигательную, чувствительную, стато-координаторную функцию:1) спонтанная активность в клетке за 5 мин;2) симметричность вытягивания передних конечностей;3) симметричность движений;574) способность забираться по стенке проволочной клетки;5) реакция на прикосновение к каждой стороне туловища;6) ответ на прикосновение к вибриссам.Минимальное количество баллов по сумме признаков (3 балла) характеризуетсякак выраженный неврологический дефицит, максимальное количество баллов (18баллов) свидетельствует об отсутствии неврологического дефицита.В группе животных с ИКГМ развиваются поведенческие нарушения иочаговый неврологический дефицит в виде двигательных, чувствительных истато-координаторных расстройств, которые неполностью регрессируют к 30суткам эксперимента (таблица 4). Отметим, что в группе животных с ИКГМнаблюдалсяправостороннийгемипарез,атаксия,сопровождавшиесягиподинамией, заторможенностью по сравнению с группой ложнооперированныхживотных.
На 3 сутки ИКГМ интегральный показатель неврологического статуса,оцениваемый по шкале Garcia J. H., по медиане статистически значимо снижаетсяв 3 раза по сравнению с группой ложнооперированных животных, на 7 сутки – в 2раза, на 14 сутки – на 33,4%, на 30 сутки – на 16,7 %.Таблица 4Неврологический статус при экспериментальной ИКГМ,оцениваемый по шкале Garcia J. H. (Me [Q1-Q3])Группы животных1. Ложнооперированные3 сутки7 сутки14 сутки30 сутки18181818[17,00-18,00] [18,00-18,00] [18,00-18,00] [18,00-18,00]2.
ИКГМ6[5,00-7,25]9[8,00-10,5]12[11,0-13,0]15[14,0-16,25]Различия(критерий Манна–Уитни)P1-2<0,001P1-2<0,001P1-2<0,001P1-2<0,001Как видно, полного восстановления неврологического статуса к 30 суткамэксперимента в группе животных с ИКГМ не наблюдается, сохраняются58статистически значимые различия с группой ложнооперированных животных.Однако обнаружены значимые изменения неврологического дефицита уживотных в динамике ИКГМ: на 14 сутки по сравнению с 3 сутками (р<0,01), на30 сутки по сравнению с 3 сутками (р<0,01) и 7 сутками (р<0,01), что позволяетконстатировать частичное восстановление неврологического статуса начиная с 14суток эксперимента.Дляанализаповеденческойактивностиэкспериментальных животных применялся тест «открытое поле». Использованиетеста«открытоеполе»являетсяобщепринятымвнейроэтологическихисследованиях при экспериментальном инсульте [198].
Тест проводится с цельюизучения поведения животных в новых для них условиях. При этом оцениваетсяориентировочно-исследовательское поведение по горизонтальной и вертикальнойактивности, числу выглядываний через отверстие; уровень эмоциональноповеденческой активности животного – по числу фекальных болюсов, количествуактов груминга [10, 81, 240].При проведении теста «открытое поле» на 3, 7, 14, 30 сутки отмечаетсястатистическизначимоеснижениеориентировочно-исследовательскойактивности животных с экспериментальной ИКГМ по сравнению с группойложнооперированных животных (таблица 5). Так, на 3 сутки горизонтальнаяактивность животных с ИКГМ уменьшается на 64% по сравнению группойложнооперированных животных; вертикальная активность уменьшается на 50%;исследовательская активность уменьшается на 73,3% по сравнению с группойложнооперированных животных.
На 7 сутки горизонтальная активностьживотныхсИКГМуменьшаетсяна31,44%посравнениюгруппойложнооперированных животных; вертикальная активность уменьшается на 57,1%;исследовательская активность уменьшается на 42,9% по сравнению с группойложнооперированных животных. На 14 сутки горизонтальная активность,вертикальная активность и исследовательская активность животных с ИКГМуменьшаются на 57,9% по сравнению группой ложнооперированных животных.На 30 сутки горизонтальная активность животных с ИКГМ уменьшается на 47,5%по сравнению группой ложнооперированных животных; вертикальная активность59уменьшается на 41,2%; исследовательская активность уменьшается на 50% посравнению с группой ложнооперированных животных. Совокупное снижениегоризонтальной, вертикальной и исследовательской активности говорит обугнетенииориентировочно-исследовательскогоповедениянавсехсрокахизмененияуровнянаблюдения после ИКГМ [42].Неотмеченостатистическиэмоционально-поведенческойзначимойактивностиразницыживотных,презентируемогопопоказателям количества фекальных болюсов и количества актов груминга, вгруппесэкспериментальнойИКГМпосравнениюсгруппойложнооперированных животных на всех сроках наблюдения.
С одной стороны,груминг можно отнести к форме обычного поведения грызунов, с другойстороны, снижение актов груминга можно оценить как один из поведенческихмаркеров при действии стрессовых факторов [34]. Однако по изменению толькоколичества актов груминга сложно оценить эмоционально-поведенческуюактивность животных.Таким образом, ориентировочно-исследовательское поведение животных вгруппе с экспериментальной ИКГМ угнетается на всех сроках наблюдения посравнению с группой ложнооперированных животных.Патогенез обнаруженных изменений связан со снижением кровотока в кореголовного мозга в области кровоснабжения средней мозговой артерии, что вконечном итоге приводит к развитию инфаркта головного мозга.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
