Диссертация (1140128), страница 5
Текст из файла (страница 5)
Выявлено,что уровни ИЛ-18, ИЛ-18-связывающего белка и свободного ИЛ-18 убольных с активной формой заболевания почти в 2 раза превышалипоказатели белков у больных с ремиссией ГПА. Во время ремиссиизаболевания уровни данных маркеров были сопоставимы с данными,полученными при исследовании крови здоровых добровольцев. Повышениеуровня ИЛ-18 и ИЛ-18-связывающего белка у больных с обострением ГПАпозволяет предположить, что данные маркеры играют определенную роль впатогенезе ГПА. Авторы отмечают, что несмотря на повышение ИЛ-18связывающего белка при обострении ГПА, свободный ИЛ-18 остается28повышенным при обострении, что предполагает его как потенциальнуюмишень терапевтического воздействия.[43]Так как Т клетки занимают значительную часть гранулемы у больных сГПА, Ludviksson и соавторы исследовали методом ИФА цитокиновыйпрофиль Т клеток у больных ГПА.
Как у больных с обострением ГПА, так иу больных с ремиссией ГПА выявлено повышение продукции ИЛ-12моноцитами. Кроме того, отмечено, что in vitro продукция ИФН-γ снижаетсяв зависимости от количества добавляемого ИЛ-10. Авторы предполагают, чтоповышение продукции ИФН-γ и ФНО-α у больных ГПА вызвано, вероятно,нарушением секреции ИЛ-12, а ИЛ-10 может быть мишенью длятерапевтического воздействия. [18]1.4.3 Влияние цитокинов на различные клетки: лимфоциты,моноциты, нейтрофилы у больных ГПА.Цитокины обладают плейотропностью биологического действия. Одини тот же цитокин может действовать на многие типы клеток, вызываяразличные эффекты в зависимости от вида клеток-мишеней.[32] В связи сэтим проводилось изучение влияния цитокинов не только на развитиеобострения заболевания, но и на различные клетки: лимфоциты, моноциты,нейтрофилы.ИЛ-2 представляет собой маркер активации лимфоцитов у больных ссистемнымизаболеваниями.Отмечено,чтоуровеньплазменногорастворимого рецептора ИЛ-2 повышается у больных с активной формойГПА.[45]HattarисоавторыпроводилиизучениевлиянияАНЦАкантипротеиназе 3 на выработку цитокинов моноцитами.
Авторы выявили,что протеиназа 3 экспрессируется на поверхности изолированных моноцитов.Стимуляция антителами к протеиназе 3 привела к значительному выбросуцитокинов, в первую очередь ФНО-α и ИЛ-1β. Отмечено уменьшение29выработки ИЛ-6, ИЛ-8 и тромбоксана А2 моноцитами. Авторы делают выводо том, что АНЦА к протеиназе 3 являются потенциальными индукторамивыработки цитокинов моноцитами. А ФНО-α, ИЛ-1β и тромбоксан А2функционируют в качестве посредников в формировании секреторногоответа.
[30]В 2014 году Park и соавторы установили, что у больных с ГПАпроисходит активация моноцитов. У пациентов проводилось исследованиеуровня ФНО-αу больных ГПА через 4 и 24 часа после стимуляциимоноцитов высокими концентрациями липополисахаридов. Отмечено, чтостимулированные моноциты больных ГПА продуцируют достоверно меньшеФНО-α по сравнению с моноцитами здоровых добровольцев.Авторыприходят к выводу, что моноциты/макрофаги больных ГПА активируются поальтернативному пути.
[46]Нейтрофил-индуцированноепоражениелегких у больных ГПАизучалось в работе Hattar и соавт.. Было показано, что при воздействии ФНОαнаизолированныечеловеческиеполиморфонуклеарныелейкоцитыотмечается индукция поверхностной экспрессии протеиназы 3. Ко-перфузияФНО-α, стимулированных нейтрофилов и моноклональных антител кпротеиназе 3 индуцирует увеличение массы изолированных легких крыс. Помнению авторов, с-АНЦА индуцированный отек развился на фонеповышения коэффициента капиллярной фильтрации - маркера повышеннойпроницаемости эндотелия легочных сосудов.
[47]Учитывая, что нейтрофил играет одну из ведущих ролей в патогенезезаболевания, методом ИФА проводилось исследование клеточных культур убольных ГПА и здоровых добровольцах на наличие хемокинов, которыемогли бы активировать или привлекать к участию нейтрофилы. Выявлено,что эндотелиальные клетки больных ГПА экспрессировали высокий уровеньнейтрофил-активирующих хемокинов, в частности ИЛ-8.
[48]30Изменение уровня ИЛ-8 у больных ГПА было описано в 2009 году.Uehara и соавторы опубликовали результаты исследований, посвященныхизучению влияния АНЦА к протеиназе 3 на активацию мононуклеарныхклетокубольныхГПА.Методомпроточнойцитометриипродемонстрировано, что при стимуляции мононуклеаров антителами кпротеиназе 3 повышается экспрессия Toll-like рецепторов и NOD1 и NOD2рецепторов.
При этом повышается уровень ИЛ-8 в плазме больных ГПА.Также стимулирующий эффект отмечен на продукцию ИЛ-6 и ФНО-α. [49]В 2011 году Richter и соавторы провели исследования хемотаксисанейтрофилов у больных с ГПА. Авторы утверждают, что в связи с наличиему данных больных АНЦА, нейтрофил играет одну из ключевых ролей впатогенезе заболевания. В бронхоальвеолярном лаваже больных ГПА,методом ИФА, определяли количество ИЛ-8, ИЛ-1β [41]. Повышенноесодержаниенейтрофиловвбронхоальвеолярномлаважебольныхсобострением ГПА ранее уже описывалась.[50,51] Цитокины играют важнуюрегуляторную роль в миграции нейтрофилов в очаги воспаления.[52]Повышенная концентрация цитокинов приводила к нейтрофилии, котораяассоциируется с острым поражением легких и легочным фиброзом,вызванныхПредыдущиеповышениемхемотаксисаисследованияотмечаютвальвеоларнойповышениеобласти.[53,54]уровняхемокинов,вызывающих нейтрофилию [55,56] в сыворотке больных ГПА и повышениеCXC хемокинового лиганда (CXCL8) в клубочках почек больных собострением ГПА.[57]Richter и соавт.
показали, что у больных с обострением и ремиссиейГПА по сравнению со здоровыми добровольцами повышено содержание нетолько нейтрофилов, но и общего количества клеток в бронхоальвеолярномлаваже. При исследовании содержания цитокинов в БАЛ больных ГПАобнаружено достоверное повышение содержания ИЛ-8 как при обострении,31так и при ремиссии заболевания. Достоверной разницы в содержании ИЛ-1βв БАЛ больных ГПА выявлено не было.[41]Наличие нейтрофилии имеет важное значение при ГПА из-за сильнойассоциации наличия заболевания и АНЦА.
[58] . Исследование лейкоцитов убольных васкулитом выявило, что у больных ГПА обнаруживаетсяповышение миграции нейтрофилов в легкие.[59] Поступление нейтрофилов вткань представляет собой многоэтапный процесс, который частичнокоординирует цитокины. Количество нейтрофилов в БАЛ больных ГПАкоррелируетс повышением продукции ИЛ-8 и ИЛ-1β, поэтому можнопредположить, что данные цитокины влияют на поступление нейтрофилов вткани. Данное предположение подтверждается и тем, что при назначенииспецифических антител к ИЛ-8 и ИЛ-1β, происходит подавление хемотаксисавБАЛ.Выраженностьподавленияхемотаксисадаетвозможностьпредположить, что ИЛ-8 и ИЛ-1β являются главными цитокинами,определяющими хемотаксис нейтрофилов в БАЛ.[41] Роль ИЛ-8 в качествехемоаттрактанта нейтрофилов хорошо изучена, в то время как значение ИЛ1β остается неоднозначным, хотяизвестно, что ИЛ-1β может вызватьслипание нейтрофилов[52,60] и индуцирует продукцию хемоаттрактантовдля нейтрофилов, включая продукцию ИЛ-8.
[61]ИЛ-8 способен повысить адгезивность нейтрофилов и вызватьповышение экспресии молекулы адгезии-1, способствуя формированиюкраевого стояния лейкоцитов.[56] ИЛ-8 имеет и другие механизмывоздействия на клетки у больных ГПА: АНЦА стимулируют выработку ИЛ-8и моноцитами, и нейтрофилами.
[57, 62] ИЛ-8 и другие цитокины, включаяФНО-α также стимулируют транслокацию протеиназы 3 на поверхностьклетки, тем самым повышая вероятность связывания с АНЦА.[63,64]1.4.4 Лечение ГПА и изменение уровня цитокиновТактика лечения ГПА определяется тяжестью заболевания.[15] Притяжелой (генерализованной) форме заболевания необходимо раннее начало32лечениясприменениемагрессивнойсхемылечения,включающейциклофосфамид и глюкокортикостероиды [65] Больные с локальной формойГПА, напротив, хорошо отвечают на менее агрессивную схему лечения сприменением метотрексата и глюкокортикостероидов [15].Оценка влияния проводимой терапии ГПА проводилась в работеLamprecht и соавторов.
Исследовали уровни ИЛ-12, ФНО-α и ИЛ-8 методамипроточной флоуметрии у больных ГПА. Экспрессия ИЛ-12 и ФНО-α былазначительно повышена у нелеченных больных ГПА по сравнению создоровыми добровольцами. Уровень ИЛ-8 не повышалсяin vitro. Посленазначения стандартной дозы ЦФА и ГКС через 2 и 12 недель былоконстатированоснижениеэкспрессииИЛ-12иФНО-αвплотьдонормализации их уровня.
Авторы приходят к выводу, что активныйметаболит циклофосфамида снижает количество мРНК ИЛ-12 in vitro.Моноцитарные цитокины, особенно ИЛ-12, могут играть важную роль вформировании раннего иммунорегуляторного ответа в пользу Th1. ЦФА всочетаниисГКСпроявляютсвоиэффектыпутемнормализациицитокинового ответа Th1 типа, а ЦФА может поддерживать данную модельразвития цитокинового ответа. [66]В нескольких неконтролируемых исследованиях сообщалось, чтоприменениеингибиторовФНО-αприводиткиндукцииремиссииГПА.[67,68,69,70]. Но при последующем проведении двойного-слепогоплацебо-контролируемого исследования с использованием этанерцепта(конкурентный ингибитор связывания ФНО-α) у больных ГПА былиполучены данные, отличающиеся от предыдущих.
В исследовании сиспользованием этанерцепта принимало участие 180 больных ГПА, которыебыли разделены на 2 группы – группу получающую этанерцепт и группуполучающую плацебо в добавлении к стандартной терапии. Стандартнаятерапия включала назначение преднизолона и циклофосфамида (для тяжелойформы заболевания) и метотрексат (при локальном ГПА). Этанерцептвводили подкожно по 25 мг 2 раза в неделю.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
