Диссертация (1140128), страница 2
Текст из файла (страница 2)
[17,18,19].Вотечественной практике проводилась работа по изучению изменений уровнейцитокинов у больных с AHЦА-ассоциированными васкулитами. Авторомвыполнен анализ по изменению цитокинов у группы больных с тремянозологическимиформамисистемныхваскулитов(гранулематозсполиангиитом (Вегенера), микроскопический полиангиит, эозинофильный6гранулематоз с полиангиитом). Среди обследованных больных, пациенты сгранулематозомсполиангиитом(Вегенера)составлялинебольшуюстатистическую группу (17 человек).
Изучение изменения цитокинов толькоу больных гранулематозом с полиангиитом (Вегенера) не проводилось.[20].Вотечественнойпрактикенетработ,посященныхопределениюдополнительных маркеров обострения и наличия генерализованных формГПА, а также изучению взаимосвязи органных поражений и измененияуровней цитокинов.Цель исследованияИзучить возможности клинико-иммунологической оценки активностии прогноза локального и генерализованного вариантов гранулематоза сполиангиитом (Вегенера).Задачи исследования1.Исследовать экспрессию генов и продукцию провоспалительных,противовоспалительных, регуляторных цитокинов у больных с локальной игенерализованной формами ГПА, а также у больных с обострением иремиссией ГПА.2.Изучить клинико-иммунологическую взаимосвязь измененияцитокинов в мононуклеарах периферической крови и сыворотке c наличиемпризнаков васкулита и гранулематозного воспаления, поражением различныхорганов и тканей у больных ГПА.3.Оценить возможность использования цитокинов в качестведополнительных маркеров обострения или наличия генерализоанной формыГПА.4.Определить факторы риска обострения ГПА в течение одногогода на основе изучения цитокинового профиля.7Научная новизнаВпервые в России проводилось исследование цитокинового профиля убольных с различными формами ГПА.
В российской выборке показаноотличие экспрессии генов цитокинов в МПК по сравнению со здоровымидобровольцами. Экспрессия генов цитокинов в МПК у больных с локальнойформой ГПА достоверно не отличалась от экспрессии генов цитокинов вМПК больных с генерализованной формой ГПА. Показано значениеэкспрессии гена ИЛ-18 у больных с обострением ГПА. Исследованиесывороточного уровня ИЛ-18 продемонстрировало, что уровень данногоцитокина достоверно повышается у больных генерализованной формой ГПА.Исследование сывороточного ИЛ-8 показало, что данный цитокин принимаетучастие в обострении ГПА.
Установлена чувствительность и специфичностьопределения сывороточного ИЛ-18 как дополнительного показателя наличиягенерализованной формы ГПА, а также экспрессии гена ИЛ-18 и ИЛ-8 какдополнительных маркеров активности ГПА. Определение сывороточногоИЛ-18 продемонстрировало наличие необходимой чувствительности испецифичности данного маркера в качестве дополнительного показателяналичия генерализованной формы ГПА.
Изучение экспрессии гена ИЛ-18также выявило достаточную чувствительность и специфичность данногопоказателя в качестве дополнительного маркера обострения ГПА. Впервые вРоссии у больных ГПА проводилось проспективное исследования с цельюоценки факторов риска развития обострения ГПА в течение одного года.Показано, что обнаружение ИЛ-1β в сыворотке крови в диапазоне от 5,1 до19,7 пг/мл является фактором риска повышения индекса BVAS на 2 и болеебаллов у больных ГПА в течение одного года.Впервые проводилось исследование взаимосвязи поражения органов итканейприГПАкорреляционнаяссвязьизменениеммеждууровняналичиемцитокинов.критериевОпределенагранулематозноговоспаления и цитокинов, участвующих в Th1 и Th2 типах иммунного ответа;8критериев васкулита и продукцией ИФН-α, ФНО-α, ИЛ-1β и экспрессиеймРНК ИЛ-6.Теоретическая и практическая значимостьПолученные данные позволят приблизиться к пониманию механизмовразвития иммуновоспалительного процесса у больных гранулематозом сполиангиитом (Вегенера), а также влияния цитокинов на формированиеорганныхпораженийактивностииприналичияданномзаболевании.генерализованнойИзучениеформымаркеровгранулематоасполиангиитом (Вегенера) на основе исследования цитокинового профиляпозволяет определить мишени терапевтического воздействия, что являетсяперспективным при разработке и внедрении в лечение генно-инженерныхбиологических препаратов у данной группы больныхПоказано, что мРНК ИЛ-18 в МПК достоверно чаще определяется убольных с обострением ГПА по сравнению со здоровыми лицами.
Врезультате нашего исследования показано, что определение мРНК ИЛ-18 вМПК у больных ГПА является и может быть использовано какдополнительный маркер активности заболевания. Выявлено, что ИЛ-18достоверно чаще повышается у больных генерализованным ГПА, аопределениесывороточногодополнительныймаркерИЛ-18развитияможетбытьиспользованогенерализованныхформкакГПА.Проведенное исследование продемонстрировало, что сывороточный ИЛ-8играет роль при обострении ГПА, однако использование его в качествемаркера обострения ГПА неоправдано в связи с низкой чувствительностью испецифичностью данногопоказателя.Установлено,что обнаружениесывороточного ИЛ-1β в диапазоне от 5,1 до 19,7 пг/мл является факторомриска развития обострения ГПА в течение 1 года.9Основные положения, выносимые на защиту.1.
Экспрессия мРНК цитокинов в МПК больных с локальной формой ГПА неотличается от таковой у больных с генерализованной формой ГПА ихарактеризуется увеличением экспрессии ИФН-α, ИЛ-8 и снижениемэкспрессии ФНО-α и ИЛ-12 по сравнению со здоровыми добровольцами.2. Цитокиновый профиль в МПК больных с обострением и ремиссией ГПАидентичен цитокиновому профилю больных с локальной и генерализованнойформами заболевания, однако при обострении ГПА по сравнению создоровыми добровольцами отмечается достоверное повышение экспрессиимРНК ИЛ-18, который является маркером активности заболевания.3. Поражение почек у больных ГПА имеет достоверную обратнуюкорреляцию с экспрессией мРНК ИФН-α, поражение легких - прямуюкорреляционную связь с экспрессией мРНК ИФН-γ, ИЛ-6, ФНО-α в МПК ипродукцией ИЛ-18.
Содержание ИЛ-18 более 258,5 пг/мл в сыворотке кровибольных ГПА является маркером генерализованной формы заболевания.4. У больных ГПА достоверным фактором риска нарастания активности втечение 1 года является сывороточный уровень ИЛ-1β в диапазоне от 5,1 до19,7 пг/мл, а обострение заболевания ассоциировано с повышениемсывороточного уровня ИЛ-8.5.
Достоверные прямые корреляционные зависимости обнаружены междуналичием признаков васкулита и продукцией ИФН-α, ФНО-α; поражениеморгана зрения и экспрессией мРНК ИЛ-4, ИЛ-12 и продукцией ИЛ-18;обратныекорреляционныесвязи-междуналичиемпризнаковгранулематозного воспаления, поражением носа, придаточных пазух иэкспрессией мРНК ИЛ-4; поражением органа слуха и экспрессией мРНК ИЛ12, продукцией ИЛ-18.10Степень достоверности и апробация результатовВ ходе выполнения данной работы применялось сертифицированноелабораторное оборудование и современные методы обследования пациентов,в результате чего получен значительный объем экспериментальных данных.Анализ полученных данных проводился в соответствии с адекватнымиобщепринятыми методами и критериями статистической обработки. Методыисследования выбраны в соответствии с поставленными целями и задачами.Положения, выносимые на защиту, выводы и рекомендации основаны нарезультатах исследования, достоверность которых подтверждена актомпроверки первичной документации.
Апробация работы проведена 15 февраля2018годаназаседаниисотрудниковкафедрывнутренних,профессиональных болезней и пульмонологии медико-профилактическогофакультета ФГАОУ ВО «Первый МГМУ им. И.М. Сеченова» МинздраваРоссии (Сеченовский Университет).Личный вклад автораВклад автора заключается в непосредственном участии на всех этапахисследования: от постановки задач, их теоретической и практическойреализации до обсуждения результатов в научных публикациях и ихвнедрения в практику.Внедрение результатов в практикуРезультаты используются в работе ревматологического отделенийклиники нефрологии, внутренних и профессиональных болезней им. Е.М.Тареева Университетской клинической больницы №3 ФГБОУ ВО «ПервыйМГМУ им.
И.М. Сеченова» Минздрава России (Сеченовский Университет).,в учебном процессе на кафедре внутренних, профессиональных болезней ипульмонологии Первого МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России(Сеченовский Университет).11Соответствие паспорту научной специальностиНаучные положения и результаты исследования соответствуют формулеспециальности 14.01.04 – "внутренние болезни" и пунктам: №2 - Изучениеклинических и патофизиологических проявлений патологии внутреннихоргановсиспользованиемклиническихлабораторных,лучевых,иммунологических, генетических, патоморфологических, биохимических идругих методов исследований, №3 - Совершенствование лабораторных,инструментальныхбольных,идругихметодовсовершенствованиеобследованиядиагностическойитерапевтическихдифференциальнойдиагностики болезней внутренних органов, №5 - Совершенствование иоптимизация лечебных мероприятий и профилактики возникновения илиобострениязаболеванийвнутреннихорганов,атакжеформулеспециальности 14.03.09- "клиническая иммунология, аллергология" иобсластиисследованияиммунозависимыхаллергическойспециальности:заболеванийиаутоиммуннойизучениепатогенеза(иммунодефицитныхсостояний,патологии),разработкаиусовершенствование методов диагностики и профилактики аллергических ииммунопатологических процессов.Методология и методы исследованияТеоретической базой проведенной диссертационной работы являлисьработы зарубежных авторов, в которых показаны противоречивые данные омеханизмах развития иммуновоспалительного процесса и методов оценкиактивности и распространенности ГПА (Вегенера).
В отечественнойпрактике проводилась работа по изучению изменений уровней цитокинов убольных с AHЦА-ассоциированными васкулитами. Однако, изучениецитокинового профиля только при ГПА не проводилась. Также не показаныцитокины-маркерыактивности,наличиягенерализованнойформызаболевания. Отсутствовали данные о цитокинах-предикторах обосрения, атакже взаимосвязь обнаружения тех или иных цитокинов при поражении12определенных органов и систем. Перечисленные обстоятельства сталиосновной для последующего изучения данной проблемы Методологическойбазой является применение методов диагностики: ОТ-ПЦР (обратнойтранскрипциииполимеразнойцепнойреакции)дляопределениятранскрипции генов цитокинов в МПК и ИФА (иммуноферментного анализа)для определение содержания цитокинов в сыворотке крови больных ГПА.Оценка активности и распространенности заболевания проводилась наосновании данных клинической картины заболевания, шкал BVAS и VDI,лабораторно-диагностических методов (общий и биохимический анализкрови,оценкаС-реактивногобелка,СОЭ,исследованияАНЦА,рентгенография, компьютерная томография, УЗИ-диагностика).ПубликацииПо теме диссертации опубликовано 11 печатных работ, в том числе 5 вжурналах, рекомендованных ВАК Минобрнауки России, 6 - в зарубежныхизданиях.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
