Диссертация (1140110), страница 10
Текст из файла (страница 10)
У пациентов с ХГП тяжёлой степени часто обнаруживались пародонтопатогенные микроорганизмы и дрожжеподобные грибы, в том числе S.intermedius(84,2%), P.Gingivalis (52,6%), A.Israelii (68,4%), P.Intermedia (31,5%), Fusobacterium spp(63,1%).Анализ полученных данных показал, что у пациентов с ХГП различной степени тяжести встречается персистенция пародонтопатогенов (P.Gingivalis – 45,2%,Fusobacterium spp – 56,6%, A.Israelii – 58,4% случаев) и в 38,8% – грамположительныхбактерий (табл. 10).При микробиологическом исследовании содержимого зубодесневой борозды упациентов с переломами челюстей со здоровым пародонтом (2B) и у пациентов группы контроля преобладали грамположительные кокки – S.salivarius обнаруживался в100% случаев, меньше выделялось S.sangius – в группе контроля в 86,6% случаев, вподгруппе 2B с ПЧ – в 70,9% случаев. У пациентов группы контроля выделялись пародонтопатогенные бактерии P.Intermedia (6,6%) и S.intermedius (6,6%).
У 2 больныхподгруппы 2B выделялся S.intermedius (6,4%).У пациентов подгруппы с гингивитом (2A), относительно пациентов подгруппысо здоровым пародонтом (2B), наблюдалось увеличение пародонтопатогенов. У пациентов этой подгруппы наблюдалось снижение грамположительных кокков: S.salivarius(52,1%), S.mitis (39,1%), S.sangius (47,8%) S.mutans (30,4%).Анализ данных показал, что у пациентов с ПЧ в 11,6% случаев обнаруживаютсяпародонтопатогены и в 51% – грамположительные бактерии (см. табл.
10).48Таблица 10 – Микробное содержимое пародонтального кармана и зубодесневойборозды у пациентов групп 1, 2 и группы контроля в %Группа 1(с ХГП)n=53Видымикроорганизмов1Aлегкаястепеньn=161Bсредняястепеньn=181Cтяжелаястепеньn=19Группа 2Группа 3(с переломами(контрольная)челюстей)n=30n=542A2Bгингивит здоровыйn=23пародонтn=31n%n%n%n%Резидентная флора. Грамм+ кокки (факультативные анаэробы)n%n%S.salivariusS.mitisS.sangiusS.mutansПародонтопатогеныP.gingivalisS.intermedius978456,243,75025857744,427,738,838,8756936,826,331,547,412911752,139,147,830,4311222910038,770,9293062651002086,66,661237,5 875 1444,477,7101652,684,2341317,3–2–6,4–2–6,6A.israelii637,5 1266,61368,428,6––––Fusobacterium spp743,7 11611263,1313––––P.intermedia212,527,7631,5––––26,653.2.
Сравнительный анализ показателей врождённого иммунитета (экспрессиигеновTLR2 и hBD-2; цитокинов TNF-α и TGF-в) у больных пародонтитомразличной степени тяжести и пациентов группы контроляТак как частым осложнением при лечение переломов шинирующими конструкциями является развитие пародонтита, перед нами была поставлена задача изучитьпоказатели врождённого иммунитета при хроническом генерализованном пародонтите. Для оценки врождённого иммунитета на уровне слизистой оболочки десны быливыбраны следующие показатели:1) экспрессия гена распознающего рецептора TLR2, который взаимодействует сшироким спектром пародонтопатогенов [104];2) экспрессия гена противомикробного пептида hBD-2;493) определение содержания провоспалительного цитокина TNF-α и противовоспалительного цитокина TGF-β в зубодесневой жидкости.
Эти цитокины, помимообеспечения защитной функции, участвуют в процессах разрушения тканей пародонта [160].В исследование включали больных с лёгкой, средней и тяжёлой степенью тяжести течения этого заболевания.При изучении показателей экспрессии гена рецептора TLR2, можно видеть, чтоуровень экспрессии гена TLR2 в подгруппе пациентов с ХГП лёгкой степени составил(141,5±86,1)×105, в подгруппе ХГП средней степени – (800,4±318)×105, в подгруппеХГП тяжёлой степени – (2586,6±1113,8)×105. Выявленные изменения уровня экспрессии гена TLR2 достоверно отличаются от группы контроля (рис.
9, табл.11).По оси абсцисс – исследуемая группа;по оси ординат – относительные единицы (показатель экспрессии исследуемогогена относительно 1 млн. копий гена актина);*** – различия достоверны при p<0,001, по сравнению с группой контроля (норма).Рис.
9 – Уровень экспрессии гена TLR2 в слизистой оболочке пародонтальногокармана у больных ХГП различной степени тяжести и в зубодесневой борозде уздоровых лиц.50Полученный результат убедительно свидетельствует о несомненной вовлеченности данного типа Toll-подобных рецепторов в патогенез пародонтита.Изучение экспрессии гена противомикробного пептида hBD-2 показало, что прилёгкой степени ХГП уровень экспрессии гена hBD-2 составляет (3,7±2,9)×105, что статистически достоверно более, чем в 100 раз ниже, по сравнению с группой контроля(371,5±109,7)×105 (p<0,001). При средней степени ХГП этот разрыв сокращается, иэкспрессия hBD-2 оказывается ниже, всего в 2,4 раза, составляя (155,8±109,9)×105, приэтом различие с группой контроля продолжает оставаться статистически достоверным(p<0,01).
В подгруппе пациентов с тяжёлой формой ХГП уровень экспрессии генаhBD-2 достоверно не отличается от группы контроля, и составляет (374,8±118)×105.(табл. 11, рис. 10).Недостаточная продукция противомикробных пептидов может быть фактором,поддерживающим хроническое персистирование инфекции на слизистой оболочке полости рта. Кроме того, снижение продукции эпителиальными клетками экспрессиигена противомикробного пептида, в частности экспрессии гена hBD-2, может бытьобусловлено фактором генетической предрасположенности некоторых лиц. Согласноданным литературы, некоторые микроорганизмы способны индуцировать защитныемеханизмы, позволяющие им уклоняться от эволюционно консервативных механизмов системы врождённого иммунитета, например, путём снижения продукции экспрессии гена противомикробного пептида hBD-2 [155].Уровень экспрессии гена hBD-2 при пародонтите лёгкой и средней тяжести значительно ниже уровня его экспрессии у здоровых лиц, а при тяжёлой форме заболевания достигает уровня нормы.
Это в определённой степени подтверждает предположение о наличии функционального дисбаланса в экспрессии гена TLR2 и индуцируемойэкспрессии гена hBD-2 у больных пародонтитом. Таким образом, повышенная стимуляция Toll-подобных рецепторов бактериальными компонентами микрофлоры полости рта не приводит к адекватному увеличению экспрессии противомикробных пептидов, что создаёт условия для персистирования инфекции в зубодесневую борозду ипародонтальный карман и, как следствие, может становиться причиной компенсаторного увеличения экспрессии TLR2.
В определённом смысле результаты, полученныев подгруппах пациентов с различной степенью тяжести пародонтита, можно рассматривать как отражение динамики патогенеза заболевания, в ходе которой наблюдается51постепенный рост экспрессии гена рецептора TLR2 при одновременном отставаниипродукции экспрессии гена противомикробного пептида hBD-2.По оси абсцисс – исследуемая группа;по оси ординат – относительные единицы (показатель экспрессии исследуемогогена относительно 1 млн. копий гена актина);** – различия достоверны при p<0,01;*** – различия достоверны при p<0,001, по сравнению с группой контроля (норма).Рис.
10 – Уровень экспрессии гена hBD-2 в слизистой оболочке пародонтальногокармана у больных ХГП различной степени тяжести и в зубодесневой бороздеу здоровых лицДальнейшее исследование включало в себя определение и анализ уровня концентрации про- и противовоспалительных цитокинов – фактора некроза опухоли TNF-αи трансформирующего фактора роста TGF-β в зубодесневой жидкости, полученной изпародонтального кармана пациентов с ХГП.
Синтез и секреция этих цитокинов могутбыть индуцированы стимуляцией Toll-подобных рецепторов, в частности TLR2, компонентами клеточной стенки бактериальных микроорганизмов, таких как P.gingivalis,A.Actinomycetemcomitans, Treponema denticola, Tannerella forsythia [74].52Оценка данных с учётом степени тяжести воспалительного процесса показываетнаиболее значимое повышение уровня TNF-α до 17,7±5,2 пг/мл у больных со среднейтяжестью ХГП (p<0,01), по сравнению с группой контроля. В подгруппе с тяжёлойстепенью ХГП также наблюдается статистически достоверное повышение продукцииTNF-α до 12,9±2,0 пг/мл (p<0,05).
В подгруппе больных с лёгкой степенью ХГП уровень TNF-α повышен до 12,2±3,5 пг/мл по сравнению с нормой (8,7±1,8), однако статистическая достоверность этого повышения отсутствует (p=0,17) (рис. 11, табл. 11).Поэтому в данном случае можно говорить лишь о тенденции.По оси абсцисс – исследуемая группа;по оси ординат – концентрация цитокина (пг/мл).* – различия достоверны при p<0,05,** – различия достоверны при p<0,01 по сравнению с группой контроля (норма).Рис. 11 – Концентрация TNF-α в зубодесневой жидкости больных ХГП различнойстепени тяжести53При оценке содержания противовоспалительного цитокина TGF-β в зубодесневой жидкости у больных пародонтитом, в зависимости от тяжести заболевания, былоустановлено, что достоверное (p<0,01) повышение уровня TGF-β выявляется в подгруппах со средней и тяжёлой формах заболевания (рис.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
