Диссертация (1140088), страница 6
Текст из файла (страница 6)
Приведём некоторые из них. При исследованииэкспрессии генов с помощью микроэррея, позволяющего анализировать 1126копий,отражающихфункциональнуюактивностькератиноцитов,установлено, что в первичной культуре кератиноцитов человека IL-22 вызывализменения в экспрессии генов, кодирующих АМП, генов, кодирующих белки,связанные с дифференцировкой кератиноцитов, и генов, кодирующих белки,связанные подвижностью и миграцией клеток [67].
Первое изменениепроявлялосьвповышенииэкспрессиимРНКпсориазинаS100А7,кальгранулина А S100A8, кальгранулина В S100A9, β-дефензинов 2 и 3 типов.Повышение уровня АМП в поражённой коже является характернымпризнаком псориатического воспаления. Другим изменением, возникающим вкератиноцитах под влиянием IL-22 и характерным для псориаза, являетсяподавлениеэкспрессиитерминальныхдифференцировочныхгеновкератиноцитов FLG, KRT1, KRT10, CALML5 и др., ответственных за синтезпрофиллагрина, кератина 1 и 10, калликреина 7 и др.
Эти белки ответственныза апоптоз кератиноцитов, их переход из гранулярного слоя в роговой иобразование сети из макрофибрилл. Третьим изменением, возникающим вкератиноцитах под влиянием IL-22, является повышение экспрессии мРНКхемокинов IL-8, CXCL1, CXCL7 и CXCL20; металлопротеиназ ММР1 иММР3; ростовых факторов кератиноцитов IL-20 и HB-EGF. Все этимедиаторы и ростовые факторы вызывают миграцию в кожу клеток иммуннойсистемы и поддерживают воспалительный процесс.На трёхмерной модели человеческого эпидермиса выделенного из крайнейплоти новорожденного, – НЕМ (human epidermis mode), , показано [68], что IL22, но не IFN-γ или IL-17, вызывает пролиферацию клеток шиповатого слоя,акантоз, потерю гранулярного слоя и белка кератогиалина.
Все эти изменениявозникают только в результате прямого действия на кератиноциты IL-22, таккак только на этих клетках есть рецептор для этого цитокина. На НЕМ-модели30показано, что IL-22, но не IFN-γ или IL-17, ингибируtт терминальнуюдифференцировку кератиноцитов, приводящую к образованию рогового слоя.У IL-22-трансгенных мышей, характеризующихся конститутивным иповышеннымсинтезомIL-22,развиваютсявсепризнакипсориаза:увеличенное количество кератиноцитов, утолщение шиповатого, потерягранулярного и утолщение рогового слоёв. [68].Намышиноймоделипсориаза,индуцированноговведениемиммунодефицитным мышам SCID суспензии CD4+CD4RBhiCD25- T-клеток отнормальных мышей, показано, что анти-IL-22-, но не анти-IFN-γ или анти-IL17 антитела, полностью препятствуют развитию псориатических поражений вкоже [34].В отличии от ряда провоспалительных цитокинов, участвующих впсориатическом воспаление, только IL-22 mRNA и белок обнаруживаются нетолько в коже, но в крови больных.
Причём, чем выше уровень IL-22 впсориатической бляшке, тем сильнее экспрессия в этих участках кожи АМП иметаллопротеиназ. Имеется чёткая корреляция между уровнем IL-22 в кровии тяжестью заболевания [5,68].Данные о ведущей роли IL-22 в патогенезе псориаза ставят вопрос о ролиTNF-α.
Такая постановка вопроса связана с данными о выраженном лечебномэффекте при псориазе антагонистов TNF-α инфликсимаба, этанерцепта и др.Одной из причин этого эффекта является участие TNF-α практически во всехэтапах воспалительного процесса. Кроме того, TNF-α повышает почти всеэффекты IL-22 на кератиноциты.
Так, например, TNF-α усиливает экспрессиюрецепторов для IL-22 на кератиноцитах. Следствием этого является резкоеувеличение шиповатого слоя эпидермиса при совместном действии TNF-α иIL-22 на эпидермис. Один TNF-α влияния на эпидермис практически неоказывает [17,68].Роль IL-20 в развитии псориаза. По эффекту на кератиноциты ближе всегок IL-22 находится IL-20. Этот цитокин также относится к семье IL-10.Синтезируют IL-20 эпителиальные клетки, дендритные клетки и моноциты.31На кератиноцитах имеется два вида гетеродимерных рецептора для IL-20: IL20R1/IL-20R2 и IL-22R1/IL20R2.
Связывание IL-20 c этими рецепторами такжеведёт к активации STAT3, хотя в меньшей степени, чем связывание с IL-22.[47].ПрисверхэкспрессииIL-20утрансгенныхмышейнаблюдаютсяпсориатические поражения, аналогичные изменениям в коже IL-22трансгенных мышей и в коже больных псориазом [5]. Псориатические бляшкитаких мышей содержат повышенный уровень IL-20. На НЕМ-моделипоказано, что IL-20 вызывает акантоз, но в меньшей степени, чем IL-22, и вменьшей степени была выражена потеря гранулярного слоя [68]. Важнымдоказательством роли IL-20 в псориатическом воспалении явились опыты попересадкеиммунодефицитныммышамSCIDксенотрансплантатовпоражённой и непоражённой кожи больного человека.
В первом случаевведение рекомбинантного IL-20 вызывало активацию воспалительногопроцесса, заключающуюся в усилении пролиферации кератиноцитов иутолщении эпидермиса. Во втором случае введение рекомбинантного IL-20 невызывало явлений псориатического воспаления. Но при совместном введениирекомбинантного IL-20 и неактивированных аутологичных мононуклеаровпериферической крови на непоражённых ксенотрансплантатах развивалосьтипичное псориатическое воспаление.
Важно отметить, что совместноевведение рекомбинантного IL-20 и аутологичных мононуклеаров не вызывалопсориатического воспаления трансплантатов кожи здоровых доноров, чтоговорит о наличии каких-то первичных дефектах в кератиноцитах больныхпсориазом. Введение мышам с псориатическими ксенотрансплантатами кожианти-IL-20антителвызывалоразрешениевоспалительногопроцесса:происходило достоверное уменьшение толщины эпидермиса [57].Роль цитокинов семейства IL-1 в развитии псориаза. В развитиипсориатического воспаления участвуют цитокины семейства IL-1 [10,25,40]:IL-1β, IL-18 и IL-36.
IL-1β индуцирует и усиливает синтез основныхпровоспалительных цитокинов - TNFα, IL-6, IL-1β и IL-23 [18]; способствует32дифференцировке, пролиферации Th17-клеток и синтезу ими цитокинов этогопрофиля [1]. Индуцированное IL-23 развитие Th17-клеток происходит тольков присутствии IL-1β [18]. Конститутивный синтез IL-1β вызывает у мышейобразование популяции Th17-клеток, синтез цитокинов Th17-профиля иразвитие в коже изменений, похожих на псориаз [54].
Описаны больные смутациями в гене антагониста рецептора IL-1 – IL-1Ra, у которых в кожеразвиваются поражения, идентичные псориатическимАктивное участие в развитии псориаза принимает и другой член семействаIL-1, а именно IL-36, который преимущественно экспрессируется вэпителиальных клетках и в коже. IL-36 существует в трёх формах: IL-36α, IL36β, IL-36γ. Этот цитокин взаимодействует с теми же рецепторами иактивирует те же сигнальные пути, что и IL-1β. В псориатической бляшкеуровень IL-36 существенно повышен и коррелирует с уровнем основныхцитокинов, вовлечённых в псориатическое воспаление: IL-17A, IL-22, IL-23,TNF-α и IFN-γ. В первичной культуре кератиноцитов здоровой кожи человекаIL-36 самостоятельно индуцирует синтез ТNF-α, IL-6, L-8, IL-36, [10,61], АМПи металлопротеиназ [27], причём IL-36β является мощным индуктором всехтрёх форм IL-36.
Этот индуцирующий эффект IL-36 существенно возрастаетпри добавлении IL-17A или ТNF-α, а эффекты, индуцированные IL-17A,существенно повышены в присутствии IL-36.Заключение. В настоящее время очевидно, что в развитии этогозаболевания участвуют три основных компонента, а именно, кератиноциты,клетки иммунной системы и цитокины, продуцируемые кератиноцитами иклетками иммунной системы. Перед исследователями, изучающими псориаз,встаёт практически философский вопрос: что первично, а что вторично.Другими словами, вопрос заключается в том, что инициирует воспалительныйпроцесс:кератиноцитыиликлеткииммуннойсистемы.Имеютсяубедительные данные в пользу и кератиноцитов, и клеток иммунной системы.Кератиноциты непораженной кожи больного псориазом обладают рядоманомалий.
В частности, спонтанно при культивировании in vitro они начинают33продуцировать IFN-γ [36]. Этот цитокин оказывает антипролиферативныйэффект на все клетки, включая кератиноциты,. Но этот эффект впсориатическом очаге не проявляется, не смотря на присутствие в этом очагебольших количеств IFN-γ. Это связано с тем, что IFN-γ в кератиноцитахпсориатической кожи не вызывает активации транскрипционных факторовSTAT1 и IRF1, отвечающих за проведение активационного сигнала [24].Кданным,такжесвидетельствующимопервичностидефектакератиноцитов, относятся результаты опытов, в которых делеция киназы IκB2, участвующей в активации провоспалительного транскрипционного фактораNF-κB в кератиноцитах, вела к развитию Т-независимого псориазоподобноговоспаления кожи [49].
О роли первичности дефекта в кератиноцитах такжеговорят результаты опытов на мышах с двойным нокаутом по компонентамJunB и c-Jun 1 провоспалительного транскрипционного фактора АР-1 инокаутом по рекомбиназе Rag2, участвующей в перестройке T-клеточногорецептора. Было показано, что делеция по компонентам фактора АР-1 вела кформированию псориазоподобного воспаления кожи и артриту. Делеция жепо Rag2 не оказывала существенного влияния на развитие воспаления в коже[74].Мыполагаем,чторазвитиепсориазаявляетсярезультатомкооперативного взаимодействия кератиноцитов и клеток врождённого иадаптивного иммунитета.ВысокаялечебнаяэффективностьциклоспоринаА,эфализумаба,элефацепта и др.
свидетельствует о первичной роли Т-клеток. Об этом такжесвидетельствует высокий уровень инфильтрации кожи клетками иммуннойсистемы. Из клеток иммунной системы инициаторами псориатическоговоспаления могут быть CD8-клетки. Напомним, что генетическим маркёромпсориазаявляетсяпептидсвязывающиймолекулаCw6MHCучастокэтоймолекулыIкласса.Оказалось,обладаетчтоповышеннойаффинностью к пептиду, полученному из кератина 17. Уровень этого пептидасущественно повышен в псориатической коже.
В эксперименте показано, чтоCD8+ клетки от HLA-Cw6-положительных больных псориазом отвечают34повышенной продукцией IFN-γ на этот пептид. Далее важно отметить, чтокератин 17 имеет гомологию со стрептококковым М-белком [26]. Так какиногда псориаз развивается после стрептококковой инфекции, то можнопредположить, что CD8+Т-клетки, активированные стрептококковым АГ,перекрёстно реагируют на аутоантигены кожи.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
