Диссертация (1140073), страница 10
Текст из файла (страница 10)
4).10,009,008,00*7,00Контроль6,00****5,00Гомотипический стрессорГетеротипический стрессор***4,003,002,001,000,00IIIРисунок 4. Удельная площадь CD90+ иммунореактивных клеток вселезенке контрольных и экспериментальных животных (¯x±S¯x)По горизонтальной оси: I – инфантильный возраст; II – перипубертатный возраст;исследованный показатель (%). Различия по сравнению с контролем значимы:* при Р < 0,05; ** при Р < 0,01; *** при Р < 0,001.
Вертикальные отрезки – значениястандартной ошибки.Доля CD90+иммунореактивных клеток в селезенке контрольных крысинфантильного возраста составила 6.08± 0.54%, перипубертатного возраста 8.16± 0.69%. Под воздействием гомотипического стресса численность CD90+лимфоцитов достоверно уменьшилась и составила у животных инфантильногопериода 4.14± 0.47% (p < 0,01). У крыс перипубертатного возраста удельнаяплощадь CD90+ лимфоцитов на фоне гомотипического стресса измениласьменее отчетливо и составила 6.23± 0.66% (p < 0,05). При гетеротипическомстрессечисленность CD90+ лимфоцитов по сравнению с контролемдостоверно уменьшилась и составила 3.62± 0.35 % у животных инфантильного(p < 0,001) и - 5.12± 0.51% перипубертатного возраста (p < 0,01).
Обращает57вниманиеболее выраженноеснижение доли CD90+иммунореактивныхклеток у крыс обеих возрастных группстрессоров,приэтомпри действии гетеротипическихнаибольшиеразличиямеждудвумяэкспериментальными группами отмечены у животных инфантильноговозраста (p < 0,01).Изучение клеточной популяции CD20+ лимфоцитов при обоих видахстресса также продемонстрировало взаимосвязь динамики исследуемыхпоказателейсхарактеромстрессорноговоздействияивозрастомэкспериментальных животных (рис.
5).30,0025,00Контроль*20,00*******15,00Гомотипический стрессорГетеротипический стрессор10,005,000,00IIIРисунок 5. Удельная площадь CD20+ иммунореактивных клеток вселезенке контрольных и экспериментальных животных (¯x±S¯x)По горизонтальной оси: I – инфантильный возраст; II – перипубертатный возраст;исследованный показатель (%).
Различия по сравнению с контролем значимы:* при Р < 0,05; ** при Р < 0,01; *** при Р < 0,001. Вертикальные отрезки – значениястандартной ошибки.58Удельная площадьCD20+иммунореактивных клеток в селезенкеконтрольных крыс инфантильного и перипубертатного возраста составила20.47± 1.75% и 22.98± 2.07% соответственно. Воздействие гомотипическогостресса привело кдостоверному по сравнению с контрольной группойснижению удельной площади CD20+иммунореактивных клеток до 14.12±1.53 % у крыс подсосного возраста (p < 0,01) и менее отчетливому, ностатистической достоверномуснижению доли этих лимфоцитов у крысперипубертатного возраста – до 17.06± 1.72 % (p < 0,05).При действии гетеротипического стресса клеточная популяция CD20+лимфоцитов достоверно уменьшилась в подгруппе крыс инфантильноговозраста до 11.89±1.23% (p < 0,001), у крыс перипубертатного возраста до14.21± 1.41% (p < 0,01).Обращает внимание, что так же, как при изучениипопуляцииCD90+лимфоцитов выявлено значительно более выраженное снижение долиCD20+иммунореактивных клеток в селезенке экспериментальных крыс придействии гетеротипических стрессоров, при этом диапазон этих различийтоже имел возрастные закономерности.Таким образом, количество CD90+ и CD20+ лимфоцитов снижалосьинтенсивнее у животных инфантильного периода, с более выраженнымснижением показателей при гетеротипическом стрессе в обеих возрастныхгруппах.Изучено влияние хронического стресса на возрастную динамику двухпопуляций стромальных клеток: OX-62 и белок S100-иммунопозитивных(рис.
6).599,008,007,00**6,00КонтрольГомотипический стрессор5,00Гетеротипический стрессор4,003,002,001,000,00IIIРисунок 6. Удельная площадь ОХ62+ иммунореактивных клеток вселезенке контрольных и экспериментальных животных (¯x±S¯x)По горизонтальной оси: I – инфантильный возраст; II – перипубертатный возраст;исследованный показатель (%). Различия по сравнению с контролем значимы:* при Р < 0,05.
Вертикальные отрезки – значения стандартной ошибки.Удельная площадьOX62+иммунореактивных клеток в селезенкеконтрольных крыс инфантильного и перипубертатного возраста составила5.20± 0.48% и 7.84± 0.66% соответственно. Изменение числа OX-62+ клетокв селезенкекрыс инфантильного возраста при гомотипическом стрессеимело лишь характер тенденции, не достигшей статистической достоверности(p>0,05). В то же время у крыс перипубертатного возраста воздействиегомотипического стрессора привело к достоверному снижению доли OX-62+клеток в селезенке, которая составила 6.02± 0.63% (p < 0,01).
Похожиерезультаты получены и при воздействии гетеротипичесого стрессора.Уменьшение удельной площадиOX62+иммунореактивных клеток вселезенке крыс инфантильного возраста имело характер тенденции (p>0,05),а у крыс перипубертатного возраста под воздействием гетеротипического60стрессора изменение числа OX-62+ клеток было статистически значимым исоставило 5.56± 0.57% (p < 0,01). Таким образом, у животных инфантильноговозрастного периода количествоOX-62+ клеток при стрессе менялосьнезначительно, в то время как у крыс перипубертатного возрастаонодостоверно снижалось при действии обоих видов стрессоров с минимальнымиразличиями между двумя стресс-группами.Противоположная динамика имела место при изучении влиянияхронического стресса на популяцию s100+иммунореактивных клеток вселезенке экспериментальных крыс (рис. 7).12,0010,008,00Контроль***6,00Гомотипический стрессорГетеротипический стрессор**4,002,000,00IIIРисунок 7. Удельная площадь s100+ иммунореактивных клеток вселезенке контрольных и экспериментальных животных (¯x±S¯x)По горизонтальной оси: I – инфантильный возраст; II – перипубертатный возраст;исследованный показатель (%).
Различия по сравнению с контролем значимы:* при Р < 0,05; ** при Р < 0,01. Вертикальные отрезки – значения стандартной ошибки.Удельная площадь s100+иммунореактивных клеток в селезенкеконтрольных крыс инфантильного и перипубертатного возраста составила7.84± 0.76 % и 9.69± 0.93% соответственно.
У животных инфантильного61периода число s100+иммунореактивных клеток при гомотипическом стресседостоверно снизилось до 5.78± 0.64% (p < 0,01), а у крыс перипубертатноговозрастаэтиизменениябылистатистическинезначимыми,доляs100+иммунореактивных клеток составила 7.82± 0.81% (p>0.05). Придействии гетеротипического стрессора произошло достоверное уменьшениедоли s100+иммунореактивных клеток у животных обеих возрастных групп,показатели количества s100+иммунореактивных клеток составили4.67±0.49% и 6.48± 0.68% соответственно (p < 0,01).Длявыяснениямеханизмовстресс-ассоциированнойдинамикипопуляций лимфоидных и дендритных клеток проведен анализ содержанияPCNA- и каспаза-3-иммунореактивных клеток (рис.8, 9).25,0020,00***Контроль15,00Гомотипический стрессорГетеротипический стрессор10,005,000,00IIIРисунок 8.
Удельная площадь каспаза-3+ иммунореактивных клеток вселезенке контрольных и экспериментальных животных (¯x±S¯x)По горизонтальной оси: I – инфантильный возраст; II – перипубертатный возраст;исследованный показатель (%). Различия по сравнению с контролем значимы:* при Р < 0,05; ** при Р < 0,01. Вертикальные отрезки – значения стандартной ошибки.62Удельная площадь каспаза-3+иммунореактивных клеток в селезенкеконтрольных крыс инфантильного и перипубертатного10.57± 0.95%и 12.02± 1.14%возраста составиласоответственно. При действиигомотипическогих стрессоров тенденция к увеличению количества каспаза3+иммунореактивных клеток в селезенке экспериментальных крыс иинфантильного и перипубертатного возраста не достигла статистическойзначимости (p>0.05).При действии гетеротипического стрессора произошло достоверноеувеличение числа каспаза-3+иммунореактивных клеток до 15.06±1.68% (p <0,01) у крыс инфантильноговозраста.
У животных перипубертатноговозраста при гетеротипическом стрессе различия по сравнению с контрольнойгруппой были еще более выраженными - удельная площадь каспаза3+иммунореактивных клеток составила 17.89± 1.83% (p < 0,001).Удельная площадь PCNA+ иммунореактивных клеток в селезенкеконтрольных крыс инфантильного и перипубертатного возраста составила15.06±1.48% и 18.14± 1.63% соответственно. При действии гомотипическогихстрессоров изменение числа PCNA+ иммунореактивных клеток у крыс обеихвозрастных групп было статистически недостоверным (p>0.05).Воздействие гетеротипического стрессорапривело к достоверномууменьшению доли PCNA+ иммунореактивных клеток у крыс инфантильноговозраста до 11.47± 0.95% (p < 0,01). У животных перипубертатного возрастапри действиигетеротипического стрессора различия по сравнению сконтрольной группой были еще более выраженными - удельная площадьPCNA +иммунореактивных клеток уменьшилась до 12.62± 1.14% (p < 0,001).6325,0020,00Контроль15,00***Гомотипический стрессорГетеротипический стрессор10,005,000,00IIIРисунок 9.
Удельная площадь PCNA+ иммунореактивных клеток вселезенке контрольных и экспериментальных животных (¯x±S¯x)По горизонтальной оси: I – инфантильный возраст; II – перипубертатный возраст;исследованный показатель (%). Различия по сравнению с контролем значимы:* при Р < 0,05; ** при Р < 0,01. Вертикальные отрезки – значения стандартной ошибки.Таким образом, удельная площадь клеток, несущих маркер апоптоза,достоверноизменяетсявобеихвозрастныхгруппахлишьпригетеротипическом стрессе, причем с большим уровнем значимости уперипубертатных животных.Суммируя результаты морфометрического исследования иимиджанализа селезенки крыс разных возрастных групп при воздействии гомо- игетеротипического стресса, можно констатировать, что хронический стресскак гомо-, так и гетеротипический вызывает микроскопические изменения вселезенке, проявляющиеся уменьшением объема Т- и В-зон белой пульпы,маргинальной зоны вокруг них, снижением плотности расположения клетоккак в Т-зонах, так и в В-зонах.















