Диссертация (1102418), страница 6
Текст из файла (страница 6)
Кроме них, D. moniliforme иD. nobile полисахариды также продемонстрировали иммуномодулирующуюактивность в тестах in vitro [127–129].30Механизм действия этих веществ изучается, но, по-видимому, один изосновных моментов состоит в неспецифической индукции иммуннойсистемы [61].Киммуномодуляторамотносятсялекарственныепрепаратыхимического или биологического происхождения, которые обладаютиммунотропным действием. Иммунотропные вещества, способные подавлятьили усиливать активность тех или иных групп клеток иммунной системы,широкоиспользуютсявнаучныхисследованияхкакинструментыисследования для раскрытия механизмов участия отдельных популяцийиммунокомпетентных клеток в иммунном ответе и реакции организма напатогенные антигены.
Характерным свойством иммуномодуляторов, вотличие от других иммунотропных препаратов, является их способностьнормализовать и модулировать патологически изменённые показателииммунитета при изменении этих показателей из-за наличия патогена или всилу внутренних причин.Косновномупротивоопухолевогомеханизмудействияиммуностимулирующегорастительныхполисахаридовиотносятстимуляцию макрофагов и модуляцию системы комплемента [130, 131].Однако в последнее время отмечают важность влияния полисахаридныхмолекул на рецепторы нейтрофилов, лейкоцитов, NK, дендритных и тучныхклеток.Модуляция врожденного иммунитета оказывает существенное влияниена способность организма хозяина быстро и эффективно реагировать наразнообразные патогены [132].Иммуностимулирующаяактивностьполисахаридовможетбытьсвязана с прямым или косвенным взаимодействием с компонентамииммунной системы, вызывая разнообразные клеточные и молекулярныесобытия, что было показано in vitro и in vivo.
Белки комплемента, моноциты,макрофаги,дендритныеклетки,нейтрофилыилимфоцитыбылизарегистрированы в качестве мишеней, отвечающих на воздействие31полисахаридов. Прямой стимулирующий эффект на эти иммунные клеткиактивирует специфические рецепторы распознавания, которые могут, вконечном счете определить результирующий ответ. Это рецепторы наклеточной мембране фагоцитирующих клеток – макрофагов и дендритныхклеток – рецептор мусорщик (SR), Dectin-1, маннозный рецептор, CR3 иTLR-6. После связывания полисахаридов с этими рецепторами, могут бытьзапущены различные сигнальные пути, что приводит к фиксируемымответам.Самыми первыми клетками, способными ответить на вторжениепатогенных микроорганизмов, являются фагоциты (нейтрофилы, моноциты имакрофаги), которые являются ключевыми участниками врожденногоиммунного ответа [133, 134]. Для доказательства, иммуностимулирующейактивности, в основном, использовали макрофагальные мышиные линииRAW 264.7, или мышиные спленоциты.
Производство химически активногокислорода или азота, продукция цитокинов и пролиферация клеток являютсяобщими в оценке иммуностимулирующей активности полисахаридов,которые могут быть оценены калориметрическими анализами. Полисахаридымогут также индуцировать экспрессию маркеров активации на поверхностииммунных клеток или внутриклеточно, которые могут быть легко измерены спомощью флуоресцентно-меченых моноклональных антител и проточнойцитометрии.Макрофаги являются филогенетически древними и консервативнымиклетками всех многоклеточных организмов.
Они могут функционировать какантигенпрезентирующие клетки и взаимодействовать с Т-лимфоцитами, темсамым модулируя адаптивный иммунный ответ к различному роду антигенов[135]. Кроме того, макрофаги участвуют в ремоделировании ткани во времяэмбриогенеза,фагоцитозе,хемотаксисе,репарацииран,элиминацииапоптотических телец и клеток и в кроветворных процессах [136, 137].Растительные полисахариды проявляют различные фармакологическиеэффекты посредством их способности модулировать иммунную функцию32макрофагов,чтосхематическипоказанонарисунке2,идругихиммунокомпетентных клеток.Рисунок2.Активациямакрофагальныхответоврастительнымиполисахаридами [35].Было также показано, что большинство растительных полисахаридовувеличиваютцитотоксическуюактивностьмакрофаговпротивтрансформированных клеток и патогенных микроорганизмов, активируютфагоцитарнуюактивность,увеличиваютпродукциюактивныхформкислорода (АФК) и окиси азота (NO), усиливают производство и секрециюцитокинов и хемокинов, таких как фактор некроза опухоли(TNF-α),интерлейкинов: IL-1Н, IL-6, IL-8, IL-12 и интерферонов: IFN-γ и IFN-H2.33Например,арабиногалактановыеscopolorumоказываютполисахаридызначимоеизшишекиммуномодулирующееJuniperusдействиенамакрофаги человека и мышей, что было продемонстрировано в индукциимакрофагами экспрессии iNOS (индуцибельная синтаза оксида азота), ипродукции NO, выброс АФК, активация секреции и стимуляция продукциикаквоспалительных(IL-1,IL-6,IL-12иTNF-α),такипротивовоспалительных (IL-10) цитокинов [138].Различные полисахариды, полученные даже из одних и тех же видоврастений, но, к примеру, разными способами, могут активировать макрофагис помощью особых внутриклеточных сигнальных путей.
Например,пектиновые полисахариды из Silene vulgaris (смолевка обыкновенная)повышают активность макрофагальной миелопероксидазы с помощьювнеклеточных двухвалентных ионов кальция – Ca2+, в то время как активацияэтого ответа с помощью каллусного арабиногалактана из того же образца независит от внеклеточных ионов Ca2+ [139].Модуляция макрофагальных ответов растительными полисахаридами,втомчислесодержащимикомплементсвязывающуюспособствуетихКомплементсвязывающиеуглеводактивность,арабиногалактан,которая,иммуномодулирующимсвойстванеявляютсякакмогутиметьпредполагается,свойствамобщими[140].длявсехарабиногалактановых полисахаридов [138].Некоторые растительные полисахариды не активируют макрофаги.Люк и соавторы [141] обнаружили, что полисахариды, полученные изTripterygium wilfordii, выступали в качестве ингибиторов и подавлялипроизводство TNF-α и экспрессию молекул адгезии (CD11c, CD18, CD14 иCD54), что было показано на человеческой линии клеток моноцитов ТНР-1.Хотя полисахариднобелковый комплекс из корней Dipsacus asperoides такжеподавлял фагоцитарную активность макрофагов, ингибиторная активностьбыла обнаружена в белковом Viscum album компоненте комплекса [142].Однако при этом полисахариды, извлеченные из Viscum album, не проявляли34ни активирующей, ни ингибирующей активности при оценке активациифагоцитоза после воздействия на гранулоциты и макрофаги [143].Также,растительныеполисахаридыактивируютклетки-предшественники гемопоэза моноцитарно-макрофагального ростка.
Сонг сколлегами [144] обнаружили, что введение in vivo полисахариднобелковогокомплекса из Chelidonium majus увеличивает количество гранулоцитарныхмакрофагов и колониеобразующих клеток у обработанных животных.Подкожное введение CARN 750, β-(1→4)-связанного ацетилированногоманнана из Aloe barbadensis, также приводит к стимуляции значительнойгемопоэтической активности и индуцирует увеличение абсолютного числамоноцитов [145]. Сотрудники лаборатории Ляо [146] выделили α-(1→6)-Dглюкан из соевых бобов с молекулярной массой 480 кДа и показали, что этотполисахаридкосвенноиндуцируетдифференцировкучеловеческихлейкозных U937 клеток, активируя продукцию цитокинов мононуклеарныхклеток.
Полисахарид из Cordyceps sinensis оказывал аналогичный эффект надифференцировку U937 клеток [147].Полисахариды, выделенные из растений, во многих случаях проявляютиммуномодулирующие свойства, стимулируют фагоцитоз, увеличиваютчисло иммуноглобулинов в крови и активируют гуморальный иммунитет.Так, например, полисахарид алоэ древовидного повышает регенеративныеспособности поджелудочной железы при внутривенном введении животным,вызывает активацию гранулоцитов, макрофагов и лейкоцитов, посредствомповышенной выработки цитокинов, активный рост и увеличение числасоединительнотканныхклетокипродуцируемыхимиэлементовсоединительной ткани [35, 148].
Углевод из Ganoderma lucidium – β-глюкан,стимулирует пролиферацию лейкозных моноцитов в дендритные клетки, засчет активации IL-4 и THP-1 [149]. Были обнаружены иммуноадъювантныесвойства глюкана «АДВА». Биологическая активность проверялась в опытахна синтез антител к эритроцитам барана, полисахаридному антигену35менингококка,белковомуэкзотоксинувозбудителястолбнякаигемагглютининам вируса гриппа [150].Углеводы из Asteracea и Tiliacea индуцируют появление гуморальныхиммуностимулирующих веществ в надосадочной жидкости клеток тимуса иселезенки [151].
Введение растительных гетерополисахаридов в организмкрыс с иммерсионным охлаждением усиливает функции макрофагов инейтрофилов. Полисахарид из ромашки аптечной действует на животных,подвергнутых процессу охлаждения, схожим образом [152, 153].Введение растительных полисахаридов животным с асептическимвоспалением и ожоговыми ранами стимулирует иммунитет путем активациимакрофагов и нейтрофилов, фагоцитоза, синтеза медиаторов, активирующихТ- и В-лимфоциты, плазматические клетки селезенки, повышающихклеточность селезенки, тимуса, костного мозга и количество лимфатическихфолликулов в структуре селезенки [154, 155].Попадаяворганизм,полисахаридывоздействуютнасистемумакрофагов и моноцитов, усиливая их иммунологические функции, ускоряютпролиферацию лимфоцитов в селезёнке, тимусе и лимфоузлах.
Следствиемэтого воздействия является: увеличение синтеза сигнальных молекул,активизирующихлимфоциты,лейкоцитыисистемукомплемента,стимуляция фагоцитоза, увеличение численности моноцитов и макрофагов[55, 156, 157]. Вместе с тем различными группами ученых была показанапротивоопухолевая активность углеводов, как цитотоксичная, так и апоптозопосредованная [158, 159].
Углевод ламинарин вызывает задержку ростасаркомы-37 у крыс. Также, антионкологическая активность наблюдалась уполисахаридов золотарника, щавеля, клевера и молодых побегов бамбука[160], а также полисахаридов растений семейства Rosacea и Asteracea.Таким образом, очевидно, что иммуномодулирующая активностьполисахаридов растительного происхождения заключается не только вактивации макрофагов, но и в модуляции пролиферации и дифференцировкиразличных типов клеток.36Активация макрофагов полисахаридами растительного происхожденияпроисходитглавнымобразомзасчетузнаванияспецифическимирецепторами полисахаридных полимеров. Эти рецепторы, известные как«паттерн распознающие молекулы», могут узнавать чужеродные лиганды вовремя начальной фазы иммунного ответа [161].
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
