Отзыв официального оппонента 3 (1102413)
Текст из файла
Отзыв официального оппонента на диссертационную работу Генералова Евгения Александровича «Биофизические характеристики и взаимодействие с рецепторами Оес11п-1 и Т1 К-6 природных полисахаридов из Нейапйы гиЬегояил А. », представленную на соискание ученой степени кандидата физико-математических наук по специальностям 03.01.02 — «биофизика», 03.01.08 — «биоинженерия» Актуальность работы.
Диссертационная работа Е,А. Генералова посвящена актуальной проблеме биофизики и биоинженерии последних лет— поиску новых лекарственных препаратов на основе полисахаридов растительного происхождения и выяснению молекулярных механизмов их действия. В настоящее время известно довольно много полисахаридов, обладающих различными наборами биологических активностей, включающих противораковую, противовирусную, радиопротекторную и др.. однако часто из-за трудностей в получении высокоочищенных препаратов и установления их состава и структуры молекулярные механизмы их действия остаются невыясненными.
В связи с этим крайне актуальна разработка методик выделения и очистки фракций поли сахаридов, обладающих требуемым спектром биологических активностей и не вызывающих вредные побочные эффекты. Поскольку полисахариды, и гликаны в частности, не кодируются геномом, их структура, биосинтез, метаболизм и физико- химические характеристики определяются метаболизмом, статусом и передачей сигналов в клетке. Это не позволяет использовать методы молекулярной биологии на основе анализа последовательностей нуклеиновых кислот, используемые для установления структур белков. Поскольку обычно такие полисахариды обладают очень большой молекулярной массой, методы рентгеноструктурного анализа здесь также непригодны. Поэтому актуальны методы компьютерного моделирования молекулярных механизмов действия полисахаридов на основе косвенных структурных данных, полученных разными биофизическими методами.
Такой подход, использованный автором диссертационной работы, позволяет приблизительно установить эти механизмы и выяснить, при каких условиях будет проявляться то или иное действие полисахарида, что допускает последующую экспериментальную проверку. Построение полных моделей регуляции сигнальных путей клетки приводит к большим системам дифференциальных уравнений, решение и анализ которых затруднителен, поэтому актуальна разработка редуцированных моделей, включающих в себя лишь некоторые ключевые вершины и ветви полного графа реакций, Именно такой поход использован автором диссертации. В связи со сказанным актуальность диссертационной работы Е.А. Генералова не вызывает сомнений.
Научная новизна диссертационной работы. В работе впервые получена из Не11апг1гцз шЬегояы 1.. высокоочищенная фракция полисахарида, названная автором НТ?.Р, определены ее молекулярная масса, состав и целый ряд физико-химических характеристик, таких как УФ-, ИК- и ЯМР-спектры. Показано, что полисахарид обладает широким спектром биологических активностей„включающих антиметастатическую и противоопухолевую, противовирусную, радиопротекторную, колониестимулирующую и иммуномодулирующую и при этом не токсичен и не является аллергеном. Установлен состав и примерная структура полисахарида. Впервые показано, что биологическая активность полисахарида обусловлена взаимодействием с двумя рецепторами, Весг1п-1 и Т1.К-6, сразу, при этом был использован новый для гликохимии метод инактивации генов целевых рецепторов методом РНК-интерференции.
Впервые предложена схема сигнальных путей в трансформированной клетке, позволяющая качественно описать механизм действия полисахарида на ее состояние. Предложена редукция этой схемы, сохраняющая важнейшие сигнальные пути. Впервые разработана автоволновая модель бифуркационного поведения трансформированных клеток при воздействии полисахарида. Практическая ценность работы.
В ходе работы был выделен и охарактеризован полисах арид из Не!гапг1гги гиЬегоюих Л., обладающий уникальным набором биологических активностей, что делает его перспективным для использования в качестве основы для разработки новых лекарственных препаратов, При этом существенно, что это соединение не оказывает вредных побочных эффектов. Разработка предложенной математической модели молекулярных механизмов действия полисахарида позволит установить звенья сигнальных цепей трансформированных клеток, ответственные за переход клеток от пролиферации к апоптозу, что, в свою очередь, откроет возможности для поиска новых лекарственных препаратов для лечения пациентов с онкологическими и вирусными заболеваниями, а также подвергшихся радиационному облучению.
Кроме того, материалы диссертационной работы могут быть использованы в качестве иллюстративного материала в учебных курсах по синергетике, нелинейной динамике, биофизике. Результаты работы были доложены на двух научных конференциях и отражены в 10 публикациях в научной печати. Основное содержание диссертационной работы. Диссертационная работа состоит из введения, четырех разделов, выводов, списка сокращений и списка литературы. Объем диссертации составляет 192 страницы текста, включая 26 рисунков и 28 таблиц.
Список использованной литературы содержит 308 наименований. Во введении обоснована актуальность темы исследования, проведен анализ степени разработанности научной проблемы, сформулированы цель и 2 задачи исследования, приведены основные положения, выносимые автором на защиту. Кроме того, указаны научная новизна работы, ее теоретическая и практическая значимость, личный вклад автора в проведение исследований, кратко описаны методология и методы исследования. В обзоре литературы проведен подробный анализ литературы по теме диссертации, из которого автор делает выводы об объекте, предмете, целях и задачах исследования, обосновывает актуальность работы, ее новизну и значимость. Раздел состоит из нескольких частей, посвященных анализу, номенклатуре, биологическим и физико-химическим свойствам углеводов и их рецепторов, а также взаимосвязи между структурными и физико- химическими характеристиками и биологической активностью полисахаридов.
Обзор литературы содержит в себе достаточно полные данные об истории вопроса, текущем положении дел, гипотезах, перспективах и направлениях исследований. Обзор написан хорошим научным языком, изложение материала вполне последовательно, ясно и четко. В разделе «Материалы и методы» содержится описание использованных в работе экспериментальных методов. Ряд методов весьма сложен в исполнении и требовал от автора высокой квалификации. В разделе «Результаты», состоящем из нескольких частей, автор приводит полученные экспериментальные данные и предлагает их частичную интерпретацию. Этот раздел включает в себя данные о физико-химических и молекулярных характеристиках НТ1.Р. В частности, приводятся данные о составе ~95',4 углеводов и 0,5'.4 белка) и моносахаридном составе (б!с — 30',4, ба! А — 23',4, б1сА — 15~4, (за1 — 13~4, Иза — б',4, Ага — 4', о, Мап — 3',4, Ху1 — 2 ~о), а также о спектральных характеристиках пол исахарида.
Ферментная обработка позволила установить тип гликозидной связи и ее определяющую роль в реализации биологической активности полисахарида. Приведены данные о биологических активностях полисахарида. В частности, обнаружен радиозащитный эффект в двух моделях, который, по мнению автора, основывается на стимуляции колониеобразования и цитокиновой активности. Стоит отметить, что давно известны радиопротекторные свойства цитокинов, но их сильные побочные действия при прямом использовании ограничивают их применение.
Были установлены противоопухолевые свойства полисахарида. В модели карциномы легких Льюиса торможение процесса метастазирования достигало 75',4, торможение роста опухоли в модели карциносаркомы Уокера составило около 37'Ь, кроме того показано также торможение роста опухолевых клеточных культур Нер-2 и 1.-929 на 82',4. Приведены данные об иммуномодулирующих свойствах НТ1 Р: стимуляция выработки ТМГ-а, 1ГХ, 11.-6 и модуляции выработки 11.-1, а также стимуляции активности натуральных киллеров.
Характеристики
Тип файла PDF
PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.
Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
