Диссертация (1097617), страница 36
Текст из файла (страница 36)
6.50. 24 часа после лазерного воздействия: уплотненная базофильная зона вблизицентра лазерного пятна (*), отек подлежащей сосудистой оболочки (↑), разрежениепигментного эпителия, вакуолизация беспигментного слоя (↑↑). Полутонкий срез. Окраскаметиленовым синим и кислым фуксином. Увеличение 125. Бар 200 мкм [Baum et al., 2014].По периферии очага склера выглядела более разреженной за счет натяжения,микроразрывов коллагеновых пучков и расширения межволоконных пространств (Рис. 6.51).Рис. 6.51.
24 часа после лазерного воздействия: разрежение склеры по периферии очага засчет натяжения, микроразрывов (↑) коллагеновых волокон и расширения межволоконныхпространств. Эписклеральные сосуды остаются проходимыми (звездочки), коньюнктивапрактически не изменена (белесое пространство над звездочками). Полутонкий срез.Окраска метиленовым синим и кислым фуксином. Увеличение 160. Бар 100 мкм[Baum et al., 2014].При этом эписклеральные сосуды оставались проходимыми как по оси лазерногооблучения, так и на периферии лазерного воздействия (Рис. 6.51).209Через 45 дней после лазерного воздействия склера на периферии лазерного пятна(зона за пределами коагуляции) была однородной, с малым количеством сосудов (Рис.6.52).Рис.
6.52. 45-е сутки после лазерного воздействия: склера на периферии лазерного пятнаоднородна, с малым количеством сосудов. Полутонкий срез. Окраска метиленовым синим икислым фуксином. Увеличение 125. Бар 200 мкм [Baum et al., 2014].В центре лазерного пятна ткань была однородна, почти бесклеточная и аваскулярная.В прилежащей непосредственно к очагу сосудистой оболочке также имелись признакитермического воздействия лазерного излучения, но на меньшей площади и в меньшейстепени по сравнению со склерой. Они заключались в утолщении сосудистой оболочки ипоявлении в ней аморфных базофильных глобулярных образований (Рис.
6.53). Попериметру склеро-хориоидального плотного контакта отмечали насколько расширенносупрахориоидальное пространство. Прилежащая к плоской части цилиарного теладвухслойная часть сетчатки выглядела отечной, вакуолизированной в беспигментном своемслое, с неравномерным по толщине и распределению гранул меланина наружнымпигментным листком (Рис. 6.53).210Рис. 6.53. 45-е сутки после лазерного воздействия: склера непосредственно по оси лазерноговоздействия - утолщение сосудистой оболочки и появление в ней аморфных базофильныхглобулярных образований.
Полутонкий срез. Окраска метиленовым синим и кислымфуксином. Увеличение 125. Бар 200 мкм [Baum et al., 2014].Гистологическое исследование показало образование пор, которые сохраняются через45 дней. Однако при этом размер сохранившихся пор несколько уменьшается, то естькрупные поры и несплошности склеры имеют тенденцию «залечиваться» со временем, что ненаблюдается для мелких пор и межволоконных пространств. Результаты структурныхисследований для склеры глаза человека показали, что лазерное воздействие сопровождаетсяобразованием дополнительных пор и увеличением размера уже существующих пор попериферии зоны лазерного облучения, в области, где термические напряжения максимальны.Следующим объектом морфологического исследования было цилиарное телоэнуклиированного человеческого глаза [Baum et al., 2014] используемое для лазерных илииных манипуляций при глаукоме.Сразу после воздействия лазерным излучением в прилежащем к склере цилиарномтеле отмечали зону термического воздействия по форме перевернутого купола, занимающуюпримерно 2/3 его толщи (Рис.
6.54). Супрахориоидальное пространство в проекции очагабыло заметно расширено. Окружающая зону очага ткань цилиарного тела отечная, менееокрашенная, структурированая, содержала неравномерно дилатированые (разорванные)сосуды (Рис. 6.54). Цилиарные отростки в проекции очага сужены вследствие тромбозасодержащихся в них сосудов. Для сравнения, аналогичное интактное место представлено наРис. 6.55.211Рис.6.54. 24 часа после лазерного воздействия: зона термического воздействия (*) какпродолжение склерального очага. Расширение супрахориоидального пространства (↑). Отексоседних участков, дилатированные сосуды (внутри круга).
Тромбоз сосудов цилиарныхотростков (↑↑). Полутонкий срез. Окраска метиленовым синим и кислым фуксином. Ув. 125.Бар 100мкм [Baum et al., 2014].Рис. 6.55. Интактное цилярное тело. Полутонкий срез. Окраска метиленовым синим икислым фуксином. Ув. 125. Бар 100мкм [Baum et al., 2014].При большем увеличении основные морфологические изменения отмечали на уровнеэпителия ресничных отростков (Рис. 6.56), которые носили очаговый, обратимый характер ичетко соответствовали местам лазерных аппликаций.
Они заключались в частичной отслойкеэпителия, дисперсии гранул пигмента, локальной деструкции клеток беспигментногоэпителия, отслоения с микроразрывами внутренней пограничной мембраны, частичномвыходе клеточного детрита в заднюю камеру глаз. Мембрана Бруха была неравномернойтолщины, однако сохраняла свою целостность. Магистральные приносящие сосуды в строме212части отростков были тромбированы, их ветви - дилатированы и лишены форменныхэлементов крови.Рис.6.56. 24 часа после лазерного воздействия - состояние цилиарного отростка.
Отслойкаи деструкция цилиарного эпителия (↑), запустение сосудов (*). Полутонкий срез.Полихромное окрашивание. Ув.400. Бар 50 мкм [Baum et al., 2014].Через 45 дней исследование показало частичное восстановление картины: частичноевосстановление цилиарного эпителия и сосудов (Рис. 6.57) и целостность Мембраны Брухана фоне расширения супрахориоидального пространства (Рис. 6.58).Рис. 6.57.
45-е сутки после лазерного воздействия - состояние цилиарных отростков.Наблюдается намного меньшая по сравнению с Рис.15, отслойка и деструкция цилиарногоэпителия (↑), сосуды восстановились (*). Полутонкий срез. Полихромное окрашивание.Ув.400. Бар 50 мкм [Baum et al., 2014].213Рис. 6.58. 45-е сутки после лазерного воздействия - наблюдается некотораянеравномерность толщины Мембрана Бруха (↑), однако сохраняется ее целостность,наблюдается расширение супрахориоидального пространства (*).
Полутонкий срез.Полихромное окрашивание. Ув.400. Бар 50 мкм [Baum et al., 2014].Все эти изменения свидетельствовали о местном нарушении барьерных свойствэпителия, увеличении его проницаемости по отношению к ВГЖ. Однако, учитывая что всеони носят локальный, ограниченный и во многом обратимый характер, вклад этих измененийв цилиарном теле в снижение ВГД скорее всего будет недостаточным. Главные измененияпосле неразрушающего лазерного излучения на склеру в области плоской части цилиарноготела, способные оказать эффективное и долговременное гипотензивное действие наглаукомный глаз заключается в (1) расширении супрахориоидального пространства, (2)появлении последовательных щелевидных пространств в окружающей очаг воздействиясклере и, самое важное, - (3) формировании в ней пористых структур.
Именно эти измененияна, наш взгляд, создают условия для усиления транссклерального дренирования жидкости изсупрахориоидального пространства, увеличивая тем самым долю увеосклерального путиоттока ВГЖ.Оптоакустическая биомикроскопия склеры после лазерного воздействияВ данном разделе представлены данные, полученные с помощью оптоакустическойбиомикроскопии.Оптоакустическая биомикроскопия склеры минисвиней Светлогорской популяции дои после лазерного облучения (Рис. 6.59) сравнивается здесь с одновременно сделаннойультразвуковой картиной, представленной на том же Рис. 6.59 нижней строчкой.
Слевапредставлен интактный образец, а справа - облученный, при этом облученное место наоптической картине помечено кружком, а ультразвуковые сечения взяты вдоль линии,214проходящей через ось лазерного облучения. На облученном образце хорошо видноувеличение толщины препарата в направлении облучения, это можно связать с образованиемдополнительной пористой структуры и расслоением коллагеновых волокон, приводящих кувеличению гидропроницаемости. Ультразвуковая картина облученного образца имеет вид,хорошо совпадающий с гистологическими данными.Рис.
6.59. Оптоакустическая биомикроскопия склеры после лазерного облучения. Слеваинтактный, справа облученный образец (облученное место помечено кругом); Внизуультразвуковые сечения - по синей линии вглубь ткани [Estrada et al., 2014].Для оптоакустической биомикроскопии склеры после лазерного облучения (Рис. 6.60)были сделаны оптические снимки в двух перпендикулярных направлениях, содержащих осьсимметрии лазерного облучения. На этих «срезах» хорошо видно увеличение толщиныобразца и возникновение дополнительной пористой структуры [Estrada et al., 2014].215Рис. 6.60.
Оптоакустическая биомикроскопия склеры после лазерного облучения. Сверху исправа представлены оптоакустические разрезы вдоль сечения, проходящего через центрлазерного излучения [Estrada et al., 2014].Результаты оптоакустической биомикроскопии подтвердили увеличение объемазанимаемого образцом на периферии лазерного пятна в месте максимальных напряжений.АСМ-исследование рельефа поверхностиТермомеханическое лазерное воздействие на энуклеированные глаза доноровосуществлялось с помощью волоконного лазера с длиной волны 1.56 мкм, работающего вимпульсно-периодическом режиме, облучение доставлялось с помощью оптоволокна сдиаметром 600 мкм. Режимы воздействия соответствовали условиям, при которыхнаблюдалось существенное увеличение гидропроницаемости склеры: мощность излучения0,9 Вт, длительность импульсов 200 мс, частота следования импульсов 2,5 Гц, времяоблучения 4 с.
Облучение всех глаз проводилось контактно в проекции pars plana по всейокружности.После облучения из образцов вырезались препараты, содержащие места лазерноговоздействия. Препараты фиксировались с помощью 96% спиртового раствора, анепосредственно перед приготовлением срезов, препараты на 1 час помещались в216физиологический раствор. Срезы толщиной 50 мкм приготавливались с помощьюкриомикротома Leica CM 1900 при температуре -15° C с использованием замораживающегораствора Jung Tissue Freezing Medium. АСМ-исследование проводили с помощьюмикроскопа атомных сил NаnoScope (Veeco Instruments, США), тип использованногокантеливера: Nanosensors ATEC-NC-50. Обработку результатов производили с помощьюпрограммы NanoScopeSoftware 810.На Рис. 6.61 представлен подобный срез с подсветкой излучением длины волны532нм.
Зоны дальнейшего исследования обозначены цифрами и соответствуют интактнойткани (зона 1), ткани находящейся непосредственной под местом лазерного облучения (зона2) и на периферии лазерного облучения (зона 3), соответствующая максимальнымнапряжениям.Рис. 6.61. Оптическая микроскопия, подсвеченная излучением длины волны 532 нм, срезасклеры толщиной 50 мкм после лазерного воздействия: зоны исследования обозначеныцифрами и соответствуют интактной ткани (зона 1), ткани находящейсянепосредственной под местом лазерного облучения (зона 2) и на периферии лазерногооблучения (зона 3), соответствующая максимальным напряжениям [Baum et al., 2014].Были выделены 3 зоны: интактная зона (№1, Рис.6.61), зона вокруг лазерного пятна «разряженная зона» (№2, Рис.6.61) и зона непосредственно под лазерным пятном (№3,Рис.6.61).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
