Диссертация: Эффективность пробиотика белолин при коррекции микробиоценоза желудочно-кишечного тракта служебных собак

Актуальность темы. Для выполнения задач по обеспечению безопасности государства и общества силовыми структурами РФ используются служебные собаки в различных климатических и техногенных условиях. Неблагоприятные факторы внешней среды и постоянный стресс, испытываемый собаками при выполнении мероприятий оперативно-служебной деятельности, неизбежно приводят к появлению различных болезней. Наиболее уязвимой системой организма собак, первой реагирующей на стресс-факторы, является пищеварительная система (Василенко В.В., 2000; Горшков В.В., 2015). В питомниках служебного собаководства патологии желудочно-кишечного тракта (далее – ЖКТ) имеют широкое распространение и занимают второе место после травматических повреждений (Кузнецов А.И., 2016; Ковалев А.А., 2017). С каждым годом увеличивается доля заболеваний служебных собак, вызванных оппортунистическими инфекциями ЖКТ (Алексеева Л.Л., 2007; Кузнецов А.И., 2016; Ковалев А.А., 2017). Причинами, вызывающими нарушение микробного баланса пищеварительной системы у собак, наиболее часто являются воспалительные процессы, инфекционные и инвазионные болезни, нарушения режима кормления, антибиотикотерапия, стрессы различного характера, хирургические вмешательства на органах ЖКТ (Галицкая М.С., 2003; Санин А.В., 2005; Севрюков А.В., 2016). Патологии органов пищеварения служебных собак тесно связаны с дисбактериозом кишечника, а также другими соматическими заболеваниями, которые появляются на его фоне. Доказано, что деградация микрофлоры кишечника ведет к ослаблению клеточного и гуморального иммунитета (Садыкова Ю.Р., 2008; Culligan Eamonn P., 2009; Frolkis Alexandra, 2013 и др.). Многие ветеринарные препараты, предназначенные для коррекции микробиоценоза ЖКТ животных, не обладают высокой лечебно-профилактической эффективностью (Панин А.Н., 2005; Мефед К.М., 2007; Ивашкин В.Т., 2009; Хавкин А.И., 2012; Зудина Н.А., 2014; Грязнева Т.Н., 2017). Следовательно, проблема фармакокоррекции дисбактериоза и болезней желудочно-кишечного тракта служебных собак на сегодняшний день является актуальной. Вопрос изыскания новых эффективных препаратов при лечении собак с дисбактериозом ЖКТ, являющимся пусковым механизмом развития многих болезней животных, наиболее остро стоит перед исследователями в области ветеринарии и микробиологии.
Степень разработанности темы. Желудочно-кишечные болезни инфекционной и неинфекционной природы по распространенности занимают второе место среди всех болезней служебных собак. Применение антибиотиков негативно влияет на микробиоценоз ЖКТ. Недостаточная эффективность использования химиотерапевтических средств в служебном собаководстве в настоящее время, а также появление антибиотикорезистентных штаммов микроорганизмов, способных вызывать вторичные инфекции, привели к необходимости поиска альтернативных эффективных и безопасных лекарственных препаратов для лечения и профилактики желудочно-кишечных болезней собак (Василенко В.В., 2004; Бондаренко В.М., 2006; Калмыкова А.И., 2006). Стрессовый дисбактериоз кишечника является основной причиной развития диарейного синдрома у служебных собак в условиях интенсивных физических и нервно-психических нагрузок. (Субботин В.В., 2003; Бельмер С.В., 2004; Бондаренко В.М., 2006; Барановский А.Ю., 2007; Тимченко Л.В., 2013). Пробиотики широко используются для профилактики желудочно-кишечных болезней и лечения животных (Малик Н.И., 2005; Данилевская Н.В., 2008; Грязнева Т.Н, 2012; Севрюков А.В., 2015 и др.). В настоящее время для использования в собаководстве имеется широкий спектр пробиотических препаратов, в том числе на основе микроорганизмов - представителей облигатной микрофлоры ЖКТ, однако многие из них не востребованы в повседневной практике. Причинами недостаточного использования пробиотиков на основе лакто- и бифидобактерий являются низкая эффективность многих из них, некорректный подбор штаммов микроорганизмов в составе препаратов, нарушения технологии производства и др. (Сорокулова И.Б., 2007; Семенов А.В., 2011 и др.). С учетом специфики использования и дрессировки служебных собак, проблема дисбактериоза, вызванного стрессом, является наиболее актуальной. Многие исследователи отмечают перспективность применения при дисбактериозах собак пробиотиков, содержащих бактерии рода Bacillus (Penner R. at al., 2005; Гатауллин А.Г., 2005; Williams Paul, 2007; Гудзь Г.П., 2008; Soccol Carlos Ricardo, 2010; Севрюков А.В., 2012; Грязнева Т.Н. 2018 и др.). Однако, эффективность пробиотиков на основе бацилл при лечении и профилактике болезней ЖКТ у служебных собак на сегодняшний день изучена недостаточно (Галицкая М.С., 2003; Федосьина Е.А., 2009; Тимченко Л.В., 2013). Таким образом, проблема пробиотикопрофилактики дисбактериоза и пробиотикотерапии служебных собак при желудочно-кишечных болезнях является актуальной. Перспективными остаются вопросы изучения влияния пробиотиков на основе бацилл на организм служебных собак в условиях активной дрессировки и физических нагрузок, а также при антибиотик-ассоциированном дисбактериозе и диарее.
Цель и задачи исследований. Целью исследований явилось изучение эффективности применения пробиотика Белолин при дисбактериозе желудочно-кишечного тракта служебных собак, вызванного антибиотикотерапией, стрессами и хирургическим вмешательством на органах пищеварительной системы. Для решения были поставлены следующие задачи: 1. Провести эпизоотологическое обследование питомника служебных собак. 2. Изучить микробный пейзаж пищеварительного тракта здоровых служебных собак. 3. Изучить качественное и количественное состояние микрофлоры желудочно-кишечного тракта собак при дисбактериозе, вызванном антибиотикотерапией. 4. Определить эффективность Белолина в период физического стресса при дрессировке служебных собак. 5. Исследовать физиолого-биохимические показатели служебных собак при кормовом стрессе и применении пробиотика Белолин. 6. Исследовать эффективность Белолина в период реабилитации служебных собак после оперативного вмешательства на органах пищеварительной системы.
Научная новизна. Впервые определена эффективность применения пробиотика Белолин на основе бактерий рода Bacillus служебным собакам при коррекции дисбактериоза желудочно-кишечного тракта, вызванного антибиотикотерапией, стрессами и хирургическим вмешательством на органах пищеварительной системы. Изучены изменения физиолого-биохимического статуса и микробиоценоза ЖКТ служебных собак при стрессовых и лекарственном дисбактериозах, а также при пробиотикопрофилактике и пробиотикотерапии Белолином. Впервые изучен микробный пейзаж ЖКТ клинически здоровых собак в питомнике служебного собаководства Пограничной службы в условиях группового содержания. Определена высокая эффективность применения пробиотика Белолин служебным собакам при профилактике дисбактериоза, вызванного физическим и кормовым стрессами, а также при терапии антибиотик-ассоциированного дисбактериоза и нарушении нормобиоза ЖКТ после проведения хирургического вмешательства на органах пищеварительной системы.
Теоретическая и практическая значимость работы. Результаты исследований по изучению эффективности применения пробиотика Белолин позволят более эффективно организовывать профилактические мероприятия, направленные на недопущение развития у служебных собак стрессовых и алиментарных диарей, дисбактериоза ЖКТ, снизить количество неблагоприятных побочных эффектов при использовании антибиотиков в служебном собаководстве. Результаты полученных исследований и рекомендации по использованию пробиотикотерапии включены в методические рекомендации ветеринарным врачам Пограничной службы «Пробиотикотерапия в служебном собаководстве». По результатам применения пробиотика Белолин в питомнике служебного собаководства утверждены производственные акты. Применение пробиотика Белолин внедрено в ветеринарную практику питомника служебного собаководства и включено в план профилактических мероприятий кинологического центра Пограничной службы.
Методология и методы диссертационного исследования. Объектами количественных и качественных клинических исследований выступали служебные собаки одной возрастной группы. В течение работы были проведены несколько серий аналитических экспериментальных нерандомизированных контролируемых динамических проспективных исследований. В качестве лабораторно-клинических методов использовались бактериологический метод исследования микрофлоры, биохимический и клинический метод анализа крови, а также метод электрофореза сыворотки крови в полиакриламидном геле и копрологическое исследование фекалий.
Степень достоверности. Результаты работы были получены при использовании сертифицированного лабораторного оборудования, прошедшего поверку средств измерений согласно ГОСТ 8.513-84 и определяются достаточным количеством проведенных исследований на средних выборках служебных собак. Экспериментальные данные обработаны методом статистического анализа.
Соответствие паспорту специальности. Диссертационная работа содержит материалы исследований в следующих областях: теоретические и прикладные проблемы экологии микроорганизмов; культивирование бактерий; методы выделения микроорганизмов из биологического материала; биологические и физико-химические свойства бактерий; явления, процессы и механизмы взаимодействия микрои макроорганизмов в условиях воздействия экзогенных и эндогенных факторов. Работа соответствует паспорту специальности 06.02.02 – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология.
Апробация работы. Результаты проведенных исследований доложены на VI Международной научно-практической конференции (Ростов-на-Дону, 2014), научно-практической конференции молодых ученых и специалистов в рамках всероссийского фестиваля науки «Актуальные вопросы ветеринарии и ветеринарной биологии» (Москва, 2015), международной научно-практической конференции «Современные проблемы инфекционной патологии и иммунологии животных» (Москва, 2016) и международной конференции по ветеринарной иммунологии «Актуальные проблемы ветеринарной иммунологии» (Москва, 2017).
Публикации. По результатам диссертации опубликовано 9 работ, в том числе 4 научные статьи в научных журналах, рекомендованных ВАК (Дезинфекция и антисептика, Ветеринария и кормление, Ветеринария, зоотехния, биотехнология), методические рекомендации «Пробиотикотерапия в служебном собаководстве».
Личный вклад автора. Автору принадлежат организация и непосредственное осуществление исследований по изучению микробного пейзажа желудочно-кишечного тракта собак в питомнике служебного собаководства кинологического центра в условиях группового содержания; определение лечебно-профилактической эффективности пробиотика Белолин при дисбактериозе у служебных собак, вызванном антибиотикотерапией; проведение изучения влияния кормового и физического стрессов на микрофлору желудочно-кишечного тракта собак, в условиях питомника служебных собак кинологического центра; изучение изменения микрофлоры желудочно-кишечного тракта и показателей гомеостаза организма служебных собак после проведения хирургического вмешательства на органах пищеварительной системы; изучение влияния препарата-пробиотика Белолин на физиолого-биохимические показатели организма служебных собак, а также оценка эффективности коррекции микробиоценоза желудочно-кишечного тракта служебных собак данным пробиотиком; оценка лечебно-профилактической эффективности применения Белолина при дисбактериозе желудочно-кишечного тракта служебных собак; внедрение мероприятий по пробиотикопрофилактике в ежегодный план противоэпизоотических мероприятий кинологического центра; анализ полученных результатов, выводы и предложения для практики. В работе использованы материалы, полученные лично автором, а также в соавторстве с Шайбель А.Я. (ООО «Пробиотик-Плюс», Москва), которому выражаю глубокую благодарность за помощь и поддержку.
Объем и структура диссертации. Материалы диссертации изложены на 220 страницах машинописного текста и включают введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы, данные о практическом использовании научных результатов, рекомендации по использованию научных выводов, список использованной литературы (180 источников, из которых 124 отечественных и 56 иностранных авторов). Работа содержит 56 таблиц, 32 рисунка, 20 страниц приложений.