Диссертация (Регенеративные и протекторные эффекты экзогенного пероксиредоксина 6 и паракринных факторов мезенхимальных стволовых клеток при химических и механических травмах кожи)
Описание файла
Файл "Диссертация" внутри архива находится в папке "Регенеративные и протекторные эффекты экзогенного пероксиредоксина 6 и паракринных факторов мезенхимальных стволовых клеток при химических и механических травмах кожи". PDF-файл из архива "Регенеративные и протекторные эффекты экзогенного пероксиредоксина 6 и паракринных факторов мезенхимальных стволовых клеток при химических и механических травмах кожи", который расположен в категории "". Всё это находится в предмете "биология" из Аспирантура и докторантура, которые можно найти в файловом архиве РНИМУ им. Пирогова. Не смотря на прямую связь этого архива с РНИМУ им. Пирогова, его также можно найти и в других разделах. , а ещё этот архив представляет собой кандидатскую диссертацию, поэтому ещё представлен в разделе всех диссертаций на соискание учёной степени кандидата биологических наук.
Просмотр PDF-файла онлайн
Текст из PDF
Федеральное государственное бюджетное учреждения науки Институтбиофизики клетки Российской академии наукФедеральное государственное бюджетное общеобразовательноеучреждение высшего образования Тульский государственный университетНа правах рукописиПОТАПОВА АНГЕЛИНА ВЛАДИМИРОВНАРЕГЕНЕРАТИВНЫЕ И ПРОТЕКТОРНЫЕ ЭФФЕКТЫЭКЗОГЕННОГО ПЕРОКСИРЕДОКСИНА 6 И ПАРАКРИННЫХФАКТОРОВ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ПРИХИМИЧЕСКИХ И МЕХАНИЧЕСКИХ ТРАВМАХ КОЖИ03.01.04.
– БиохимияДиссертацияна соискание ученой степеникандидата биологических наукНаучные руководители:доктор биологических наук, профессор Музафаров Евгений Назибович;доктор медицинских наук Темнов Андрей АлександровичПущино – 20182ОГЛАВЛЕНИЕСПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ .................................................. 5ВВЕДЕНИЕ ..............................................................................................................
6I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ...................................................................................... 111. Морфология, функции и особенности регенерации кожи ............................ 111.1. Морфология кожи .......................................................................................... 111.2. Основные функции кожи...............................................................................
151.3. Особенности физиологической регенерации кожи .................................... 162. Кожные раны и их классификация .................................................................. 182.1. Классификация ран ........................................................................................ 182.2. Химический ожог ........................................................................................... 193.
Особенности заживления ран и современные препараты ............................ 203.1. Механизмы заживления ран ......................................................................... 203.2. Фазы заживления ран и их особенности ...................................................... 213.3. Митоз и миграция клеток в процессе заживления ран............................... 253.4. Сигнальные пути во время заживления ран ................................................ 263.5.
Окислительный стресс и регенерация раны ................................................ 273.6. Современные препараты для лечения кожных ран .................................... 294. Окислительный стресс и антиоксидантные системы кожи .......................... 354.1. Ферменты-антиоксиданты и их роль в заживлении кожных ран ............. 364.2. Пероксиредоксины ......................................................................................... 384.2.1. Роль пероксиредоксинов в защите клеток от окислительного стресса . 414.2.2.
Пероксиредоксины и их роль в заживлении кожных ран ....................... 434.3. Пероксиредоксин 6......................................................................................... 455. Факторы, регулирующие процессы регенерации в эпителиальных тканях 4935.1. Паракринные факторы мезенхимальных стволовых клеток ..................... 50II.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ............................................................................ 541. Материалы ......................................................................................................... 541.1. Животные и этика ..........................................................................................
541.2. Рекомбинантный человеческий пероксиредоксин 6 .................................. 541.3 Паракринные факторы МСК .......................................................................... 552. Методы ............................................................................................................... 572.1. Модель ожога трихлоруксусной кислотой ..................................................
572.1. Модель механической полнослойной кожной раны .................................. 582.3. Планиметрические методы исследования ................................................... 592.4. Приготовление парафиновых срезов ........................................................... 602.5. Гистологический анализ ................................................................................
602.6. Иммуногистохимический анализ ................................................................. 612.7. Иммуноферментный анализ .......................................................................... 612.8. Измерение концентрации оксида азота в сыворотке крови....................... 622.9. Определение малонового диальдегида ........................................................ 622.10. Биохимический анализ крови ..................................................................... 632.11. Статистический анализ ................................................................................ 63III РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ ................................................................ 641. Химический ожог кожи, вызванный трихлоруксусной кислотой ...............
641.1. Динамика регенерации химического ожога кожи ...................................... 641.1.1. Морфология раневого процесса при химическом ожоге ........................ 641.1.2. Уровень клеточного апоптоза в ожоговой ране ....................................... 661.1.3. Уровень клеточной пролиферации в ожоговой ране ..............................
671.1.4. Степень окислительного стресса в ожоговой ране .................................. 6841.1.5. Интерлейкиновый профиль ожоговой раны ............................................ 691.1.6. Уровень оксида азота в ожоговой ране ..................................................... 721.1.7. Биохимические показатели крови при химическом ожоге..................... 731.2. Влияние экзогенного пероксиредоксина 6 (Prx6) и паракринныхфакторов МСК (кМСК) на динамику заживления химического ожога кожи 751.2.1. Влияние Prx6 и кМСК на морфологию ожоговой раны .........................
751.2.2. Влияние Prx6 и кМСК на уровень апоптоза в ожоговой ране ............... 781.2.3. Влияние Prx6 и кМСК на уровень пролиферации в ожоговой ране ...... 791.2.4. Роль Prx6 в нейтрализации окислительного стресса в ожоговой ране.. 811.2.5. Влияние Prx6 и к МСК на интерлейкиновый профиль ожоговой раны 821.2.6. Влияние Prx6 и кМСК на биохимические показатели крови прихимическом ожоге кожи ....................................................................................... 841.2.7.
Роль пероксидазной активности экзогенного Prx6 ожоговой ране ....... 852. Влияние экзогенного Prx6 и паракринных факторов МСК (кМСК) надинамику заживления механической полнослойной кожной раны ................. 872.1. Влияние Prx6 и кМСК на морфологию механической раны ..................... 872.2. Влияние Prx6 и кМСК на уровень апоптоза в механической ране ........... 952.3. Влияние Prx6 и кМСК на уровень пролиферации в механической ране . 962.4.
Влияние Prx6 и кМСК на биохимические показатели крови посленанесения механической раны............................................................................. 97IV. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ ................................ 99ЗАКЛЮЧЕНИЕ ................................................................................................... 107ВЫВОДЫ ............................................................................................................. 109СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ ................................ 109СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ ..................................................... 1145СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙPrx1-6 – пероксиредоксин 1-6АФК – активные формы кислородаОС – окислительный стрессGPx – глутатионпероксидазаGSH – восстановленный глутатионGSSG – окисленный глутатионSOD – супероксиддисмутазаTrx - тиоредоксиныАТФ – аденозинтрифосфатПОЛ – перекисное окисление липидовМДА – малоновый диальдегидМСК - мезенхимальные стволовые клеткикМСК – кондиционированная культуральная среда МСК (паракринныефакторы МСК)TNF – фактор некроза опухолиEGF - эпидермальный фактор ростаHGF - фактор роста гепатоцитовKGF - фактор роста кератиноцитовFGF - фактор роста фибробластовIGF - инсулиноподобный фактор ростаVEGF - фактор роста эндотелия сосудовEPO - эритропоэтинTPO - тромбопоэтинPDGF - тромбоцитарный фактор ростаNFκB - транскрипционный факторIL 1-10 - интерлейкины 1-10ТХУ – трихлоруксусная кислота6ВВЕДЕНИЕЗаживление кожных ран различной этиологии является одним из давноизучаемых разделов медицины.
Несмотря на обилие препаратов для местноголечения ожогов и ран, совершенствование методов их лечения по-прежнемуостается актуальной задачей [Li Y. et al., 2017; Marshall C.D. et al., 2018;Еськова А. Ю. и др., 2018].Для эффективного заживления ран кожи необходимо решить двепроблемы:уменьшитьтяжестьпораженияиускоритьпроцессывосстановления ткани.1. Одним из факторов, определяющих тяжесть поражения, являетсямощный окислительный стресс, связанный с гиперпродукцией активныхформ кислорода (АФК), который сопровождает большинство патологий[Mathieu D. et al., 2006; Ланкин, В.З.
и др., 2001; Han Y. et al., 2018; Li D.J. etal., 2018]. В связи с этим для нейтрализации окислительного стресса обычноиспользуют различные антиоксиданты [Chelombitko M.A. et al., 2017; PieleszA. et al., 2018; Ahmed O.M. et al., 2018]. В этом отношении заслуживаютособого внимания ферменты-антиоксиданты класса пероксиредоксинов,которые способны нейтрализовать широкий спектр АФК (неорганические иорганические гидропероксиды, пероксинитриты и т.
д.). В настоящей работев качестве антиоксиданта предполагается использовать пероксиредоксин 6(Prx 6), высокая эффективность которого была показана ранее при леченииряда патологий [Волкова А.Г. и др., 2014; Гордеева А.Е. и др., 2014; Lee D.H.et al., 2017; Fisher A.B. et al., 2018].2. В процессе заживления раны перед организмом стоит задачавосполненияутраченнойцелостностикоживобластидефекта,приближенного по строению к первоначальной ее структуре [Velnar T.
