Диссертация (Клиническое значение эндотелиальной дисфункции в развитии акушерских и перинатальных осложнений), страница 2

Тем не менее, отмечется повышениеконцентрации этих клеток в периферичекской кровотоке при заболеваниях,сопровождающихся сосудистыми нарушениями (сахарный диабет, сердечнососудистые заболевания, нарушение мозгового кровообращения, васкулиты и т.п.)[166; 170]. Десквамированные эндотелиальные клетки имеют плоскую форму иобладают выраженной морфологической неоднородностью: толщина клеткисоставляет 1-2 мкм, диаметр варьирует от 10 до 50 мкм. Доказано, что основныммеханизмом поражения эндотелиоцитов при эндотелиальной дисфункцииявляется апоптоз [27; 33; 40; 88; 123], морфологическими критериями которогоявляются уменьшение объема цитоплазмы и ядра с последующей фрагментациейклетки и формированием апоптозных телец [71]. Цифровой анализ изображениябиологических объектов является на сегодняшний день доступным и быстровыполнимым диагностическим методом. Современная техника визуализации иматематической обработки биологического объекта даёт возможность получитьультраточнуюколичественнуюхарактеристикуклеточныхмикроструктур,зафиксировать изменения, которые сопряжены с «предболезнью», нарушениемгомеостазанасамыхраннихстадияхзаболевания.Морфометриядесквамированных эндотелиоцитов открывает новые возможности раннеймалоинвазивной диагностики сосудистых нарушений в системе мать-плацентаплод и представляется важным дополнительным компонентом пренатальнойдиагностики, повышающим наш потенциал впрофилактике и леченииакушерской, перинатальной и детской патологии.Цель исследованияСовершенствование диагностики и лечения эндотелиальной дисфункции убеременных для снижения материнской, перинатальной и детской заболеваемостис применением метода компьютерной морфоденситометрии.9Задачи1.Разработатьновуюинформационнуютехнологиюобъективизациипоражения сосудистой системы у беременных на основе витальнойкомпьютерной морфоденситометрии десквамированных эндотелиоцитовпериферической крови.2.Проанализировать морфометрические параметры десквамированныхэндотелиоцитов у беременных в I триместре, определить диапазонколебаний значений исследуемых показателей при физиологическомтечении беременности, а также при нарушении гестации.3.Провести компьютерную морфометрию сосудов ворсинчатого хориона вI триместре беременности, определить морфометрические показателисосудов хориона плода, установить их корреляционные отношения сморфометрическими параметрами десквамированных эндотелиоцитовматери.4.Осуществитькорреляционныйанализпоказателейдесквамированныхновыхморфометрическихэндотелиоцитовиклассическихбиохимических маркеров эндотелиальной дисфункции у беременных.5.Проанализироватьматеринскую,перинатальнуюидетскуюзаболеваемость, выделить группы риска по развитию данной патологии сучетом результатов проведения у беременных в I триместре витальнойкомпьютерной морфоденситометрии десквамированных эндотелиоцитов.6.Провестианализвлияниягормональной,антиагрегантнойиантикоагулянтной терапии на состояние эндотелия у беременных спомощьюразработаннойморфоденситометрическоготехнологиикомпьютерногоисследованиядесквамированныхэндотелиоцитов.7.Разработатьдифференцированныйподходвпрогнозировании,профилактике и лечении материнской, перинатальной и детскойзаболеваемостинаосновеновойбиомедицинскойтехнологииобъективизации поражения сосудистой системы у беременных.10Научная новизнаРазработанановаяинформационнаябиомедицинскаятехнологияобъективизации поражения сосудистой системы у беременных на основевитальногокомпьютерногодесквамированныхморфоденситометрическогоэндотелиоцитов.Впервыеисследованияпроведенрасширенныйморфометричекий анализ биологического объекта, относящегося к разделуэксфолиантнойцитологиипериферической крови.–десквамированнымэндотелиоцитамиНовая технология позволяет с помощью цифровогоанализа изображения клетки зафиксировать в реальном времени минимальныеотклонения оптических характеристик цитообъекта и дать наиболее точный иобъективный анализ поражения эндотелия, зарегистрировать изменения, которыесопряжены с нарушением сосудистого гомеостаза на самых ранних стадияхзаболевания.Полученыдесквамированныхреферентныеновыеданныеэндотелиоцитовзначенияуобоптическихбеременных,морфометрическиххарактеристикахвпервыепоказателейопределеныдесквамированныхэндотелиальных клеток при физиологическом течении беременности, а такжедиапазон колебаний этих параметров при нарушении гестации.

Изученыморфометрическиехарактеристикиэндотелиоцитовворсинчатогохориона,проведен корреляционно-регрессионный анализ морфологических измененийэндотелия у матери и плода в I триместре беременности. На основе созданнойинформационной биотехнологии объективизации поражения сосудистой системыпроведена оценка влияния гормональной, антиагрегантной и антикоагулянтнойтерапии на состояние эндотелия у беременных. Впервые осуществлен анализтечения беременности и перинатального исхода, неонатальной и детскойзаболеваемостисучетомморфометрическойоценкиэндотелиоцитов у женщины в I триместре беременности.десквамированных11Теоретическая и практическая значимостьРазработанная технология витальной компьютерной морфоденситометриидесквамированных эндотелиоцитов у беременных позволяет на ранней стадиираспознаватьнарушениявсосудистомруслеформирующегосяфетоплацентарного комплекса.

Изучение патогенеза эндотелиальной дисфункциидает возможность рассматривать минимальные отклонения в структуре клеток какважные маркеры необратимых изменений, своевременная регистрация которыхявляется важным шагом в диагностике сосудистой патологии. Позиционированиеапоптоза эндотелиоцитов в период имплантации как патогенетического звенафетоплацентарной недостаточности открывает новые перспективы в поиске путейдиагностики,профилактикизаболеваемости.илеченияматеринскойиперинатальнойС помощью разработанной биотехнологии зафиксированыизменения в ядрах эндотелиоцитов: фрагментация, маргинация и компактизацияхроматина,чтооткрываетперспективыисследованияэндотелиальнойдисфункции на молекулярном уровне.Новая технология может быть использована в практической медицине вкачестве дополнительного, малоинвазивного и быстро выполнимого методапренатальной диагностики, эффективного для скринингового обследованияженщин в I триместре беременности с целью выявления групп риска развитияакушерскойиперинатальнойпатологии.Спомощьюразработанногодифференцированного подхода предложены рекомендации по прогнозированию,профилактике и лечению материнской, перинатальной и детской заболеваемостина основе новой биомедицинской технологии объективизации поражениясосудистой системы у беременных.Апробация результатов работыАпробация диссертации состоялась на заседании кафедры акушерства игинекологии стоматологического факультета ФГБОУ ВО МГМСУ им.

А.И.Евдокимова МЗ РФ 29 января 2020 г.12Результаты диссертации доложены на Российском конгрессе "Ранние срокибеременности. Проблемы ВРТ" (1-3 июня 2017); Международномконгрессе«Новые технологии в диагностике и лечения гинекологических заболеваний» (6-9июня, 2017); Московской научно-практической конференции посвященной"Международному дню недоношенных детей" (17 ноября 2017); собранияхкафедры акушерства и гинекологии стоматологического факультета ФГБОУ ВОМГМСУ им А.И.Евдокимова.Внедрение результатов исследования в практикуРезультаты диссертационной работы внедрены в практику отделениягинекологии ГБУЗ ГКБ №13 ДЗ г. Москвы, используются на семинарах, лекцияхи практических занятиях кафедры акушерства и гинекологии стоматологическогофакультета ФГБОУ ВО МГМСУ им.

А.И.Евдокимова МЗ РФ. По материаламдиссертации опубликовано 40 научных работ, в том числе 2 монографии, 1 работаза рубежом (Великобритания) и 12 публикаций в рецензируемых журналах,рекомендованных ВАК РФ.Личный вклад автора в проведенное исследованиеАвтором разработан дизайн исследования, обобщены и проанализированыпредставленные в литературе материалы по рассматриваемой проблеме.Самостоятельно изучены и проанализированы истории болезни 530 беременных,163 истории родов, а также 163 амбулаторные карты детей.

Лично или принепосредственномучастииавторапроведеноморфоденситометрическоеисследование десквамированнх эндотелиоцитов у 530 пациенток. Авторомпроведена статистическая обработка и анализ полученных результатов, наосновании которых сформулированы выводы, а также разработаны рекомендациипо планированию лечебно-профилактических мероприятий с учетом проведения вI триместре беременности витальной компьютерной морфоденситометриидесквамированных эндотелиоцитов.13Структура и объем работыДиссертация изложена на 257 страницах, иллюстрирована 80 таблицами и49 рисунками, состоит из введения, 7 глав, выводов, практических рекомендаций,списка литературы и приложений.Список литературы содержит 206 источников, из них 133 источника нарусском языке, 73 – на других языках.Положения, выносимые на защиту1.

Разработанная технология витальной компьютерной морфоденситометриидесквамированных эндотелиоцитов периферической крови является новыммалоинвазивным,быстровыполнимым,техническииэкономическидоступным диагностическим методом выявления нарушений сосудистойсистемы у беременных. Наиболее оптимальным морфометрическимпоказателемметодаявляетсясреднийэквивалентныйдиаметрдесквамированных эндотелиоцитов.2.

Витальнаякомпьютернаяморфоденситометриядесквамированныхэндотелиоцитов у беременных имеет равную эффективность с такимиклассическими методами диагностики эндотелиальной дисфункции, какисследование биохимических маркеров поражения эндотелия (фактор фонВиллебранда, С-реактивный белок, микроальбуминурия), а также подсчетциркулирующихэндотелиоцитовМорфометрическиепараметрывпериферическойдесквамированныхкрови.эндотелиоцитовубеременной в I триместре коррелируют с морфометрическими параметрамисосудов ворсин хориона плода, что подтверждает информативность новойбиотехнологии в диагностике нарушений маточно-плодовых отношений.3. Разработаннаятехнологияморфоденситометриидесквамированныхэндотелиоцитов позволяет выделять группы риска развития материнской,перинатальнойидетскойзаболеваемости,беременности и перинатальный исход.прогнозироватьтечение144.

Витальнаякомпьютернаяморфоденситометриядесквамированныхэндотелиоцитов позволяет применять дифференцированный подход впрофилактике и лечении эндотелиальной дисфункции у беременных, атакжеосуществлятьмониторингэффективноститерапевтическоговоздействия с целью снижения материнской, перинатальной и детскойзаболеваемости.15ГЛАВА I. ЭНДОТЕЛИАЛЬНАЯ ДИСФУНКЦИЯ У БЕРЕМЕННЫХ:ВОПРОСЫ ПАТОГЕНЕЗА, ДИАГНОСТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ1.1.Особенности васкулогенеза в фетоплацентарном комплексеВажнейшейзадачейсовременногоакушерстваявляетсяснижениегестационных осложнений, что неразрывно связано с изучением процессовимплантациииплацентации,определяющихадекватностькровотокавфетоплацентарном комплексе [14; 103; 107].

Тонкие механизмы ангио- иваскулогенеза на ранних сроках беременности программируют возможностьразвития гравидарных осложнений [108].Как известно, уже с 18-20-го дня гестации начинается развитие сосудистойсети в хорионе с превращением вторичных (бессосудистых) ворсин в третичные.Первые фетальные капилляры появляются в мезенхиме ворсин хориона, исодержат незрелые эндотелиальные клетки [10]. После четвертой недели примикроскопиихориальныхкапилляровобнаруживаютсяпервыеядерныеэритроциты, что свидетельствует о начале кровообращения фетоплацентарнойсистеме.Именноэтикапилляры,формирующиесянараннихсрокахбеременности, будут осуществлять кровообращение в плаценте до родов,определяя маточно-плодовые отношения[69]. Таким образом, периодформирования третичных ворсин можно считать критическим, так как онопределяет адекватность микроциркуляции в системе «мать-плод» на протяжениивсего предстоящего периода гестации [75; 101; 108].Морфометрические параметры первых фетальных капилляров рознятся, чтоопределяется неровностью их просвета и прерывистостью эндотелиальнойоболочки.Базальнаямембранаиперицитыупервичныхкапилляровотсутствуют.

Эндотелий фетальных сосудов имеет крупные, неправильной формыядра, площадь просвета капилляров составляет от 20 до 29 мкм 2 [95]. Цитоплазмаэндотелиоцитов образует выросты и отростки. Толщина стенок первичных16фетальных капилляров варьирует от 0,15 до 1,2 мкм и определяется толькотолщиной цитоплазмы эндотелиоцитов. Максимальная площадь сосудов втретичных ворсинах выявляется в сроке 7-8 недель и может достигать 40-45 мкм2,что объясняется высокой активностью трофобласта. Позже площадь капилляровстановится меньше и не превышает 32-36 мкм2.