Автореферат (Физиолого-биохимический статус разных половозрастных групп пушных зверей и его коррекция), страница 4

Животным 1, 2 и 3 опытных групп в рациондобавляли янтарную кислоту из расчета, соответственно 5, 10 и 15 мг/кг живоймассы. Препарат вводили в первые 10 дней каждого месяца, делая через 5 днейскармливания 2-дневные перерывы. Всех животных выращивали в стандартныхусловиях клеточного содержания.13Ежемесячно у щенков определяли живую массу на электронных весах Escale с точностью до 10 г. У зверей в возрасте 2, 3, 7, 12 месяцев брали кровьдля исследования.

В 7-месячном возрасте по окончании периода интенсивногороста и формирования зимнего волосяного покрова проводили убой животных(ноябрь) для получения шкурки и оценки ее качества. Качество шкурокоценивали по ГОСТ 2790-88, ГОСТ 27769-88, ГОСТ 7907-78.Изучение влияния препарата на репродуктивную функцию пушныхзверей проводили на племенных самках красной лисицы, вуалевого исеребристого песца, стандартной темно-коричневой норки.

Из племенныхсамок пушных зверей красной лисицы и вуалевого песца по принципу группаналогов сформировали 3 группы: контрольная и две опытных. Животныеконтрольной группы препарат не получали. Звери 1-й опытной группыполучали дополнительно к рациону янтарную кислоту из расчета 10 мг/кгмассы тела в течение месяца перед спариванием, за исключением выходныхдней (всего 20 раз); животные 2-й опытной группы – получали препарат втечение месяца перед спариванием и во вторую половину беременности, заисключением выходных дней (всего 40 раз).

Кроме того, на самках песцапровели дополнительный опыт, для которого сформировали опытную иконтрольную группы. Звери контрольной группы препарат не получали.Животные опытной группы получали янтарную кислоту в дозах 5 и 10 мг/кгмассы тела во вторую половину беременности за исключением выходных дней(всего 20 раз).Из племенных самок стандартной темно-коричневой норки по принципугрупп-аналогов сформировали 4 группы: контрольная и три опытных. Самкиконтрольной группы препарат не получали.

Норкам 1-ой опытной группывключали в рацион янтарную кислоту в дозе 5 мг/кг массы тела ежедневно втечение месяца перед спариванием, 2-й опытной группы – в течение месяцаперед щенением, 3-й опытной группы – в течение месяца перед спариванием ищенением. У самок оценивали общее физиологическое состояние и показателирепродуктивной функции. Щенков регистрировали в 2-месячном возрасте вовремя отсадки от матерей.Экономическую эффективность применения янтарной кислоты врационах молодняка и племенного поголовья пушных зверей определяли всоответствии с методическими рекомендациями (2007).Изучение биохимических показателей крови после введениябактериальных и вирусных агентов в организм пушных зверей проводили последующей схеме.

В качестве антигенов использовали: у норок - вирусалеутской болезни, у лисиц - вакцину против сальмонеллеза, у песцов - вакцинупротив чумы плотоядных.Динамику биохимических показателей крови при заражении вирусомалеутской болезни изучали на молодняке норки. Для этого из молодняка норкистандартного темно-коричневого окраса в возрасте 7 месяцев по принципугрупп-аналогов сформировали 3 группы: контрольная и две опытных. Звериконтрольной группы были здоровыми – их не заражали вирусом и им не14вводили янтарную кислоту. Животным 1-й и 2-й опытных групп вводиливнутрибрюшинно в дозе 2 см3 12-недельный культуральный изолят «Сапфир»вируса алеутской болезни норок, полученный из ВГНКИ.

С момента зараженияноркам 2-й группы дополнительно ежедневно вводили per os (с питьевой водой)янтарную кислоту в дозе 5 мг/кг массы тела. В течение месяца после зараженияеженедельно от 5 зверей из каждой группы брали кровь для исследования.Заболевание норок алеутской болезнью подтверждали исследованием крови вреакции иммуноэлектроосмофореза - РИЭОФ (Слугин В.С., 2004).Состояние организма лисицы и песца в поствакцинальный периодизучали следующим образом. В предварительных исследованиях использовалиплеменных самок красной лисицы, из которых за месяц до гона (декабрь) попринципу групп-аналогов сформировали 2 группы: контрольную и опытную.Лисиц обеих групп иммунизировали инактивированной вакциной противсальмонеллеза, пастереллеза и стрептококкоза внутримышечно в дозе 2,0 мл,однократно в соответствии с инструкцией по применению.

Вакцина содержаламикробную взвесь Salmonella tyhimurium, Salmonella choleraesuis, Pasteurellamultocida сероваров А, В, Д, Streptococcus серогрупп C, R (изготовлена ФГУП«Армавирская биофабрика» 06.2007 года, серия 14, контроль 14),Дополнительно лисицам опытной группы за 4 дня до и 4 дня послеиммунизации вводили в рацион янтарную кислоту из расчета 10 мг/кг живоймассы.Из молодняка красной лисицы 2-месячного возраста по принципу группаналогов сформировали 3 группы: контрольная и две опытных.

Всех лисициммунизировали инактивированной вакциной против сальмонеллеза,содержащую микробную взвесь Salmonella tyhimurium и Salmonella choleraesuis(изготовлена ФГУП «Армавирская биофабрика» 08.2007 года, серия 9,контроль 9) внутримышечно в дозе 1,0 мл двукратно с интервалом 10 дней всоответствии с инструкцией по применению. Животным контрольной группы,кроме вакцины, ничего дополнительно не вводили. В рацион зверей 1-йопытной группы добавляли янтарную кислоту в дозе 5 мг/кг живой массы втечение 5 дней до иммунизации, 2-й опытной группы - в течение 5 дней до и 3дней после вакцинации.Из молодняка песца 2-месячного возраста по принципу групп-аналоговсформировали три группы: контрольная и две опытных. Всех зверейиммунизировали вакциной против чумы плотоядных Бионор-Д(ООО«Биоцентр» 06.2009 г., серия 36, контроль 55) внутримышечно в дозе 1,0 млоднократно в соответствии с инструкцией по применению.

Песцамконтрольной группы, кроме вакцины, ничего дополнительно не вводили. Врацион 1-й группы добавляли янтарную кислоту в дозе 5 мг/кг массы тела втечение 5 дней до иммунизации, 2-й группы – 5 дней до и 3 дней послевакцинации. Для изучения формирования иммунитета в поствакцинальныйпериод брали кровь из плантарной вены у 5 лисиц и 5 песцов из каждой группыодин раз неделю в течение месяца.15Для оценки влияния янтарной кислоты на организм пушных зверейпрепарат скармливали зверям в одно и то же время утром per os вместе скормом. Для этого навеску препарата растворяли в воде, подогретой до 50 оС,до 1% концентрации.

Полученный раствор вводили в корм и тщательноперемешивали.У зверей каждого возрастного периода утром натощак брали кровь излатеральной подкожной вены голени (лисица и песец) или хвостовой вены(норка) для исследований на биохимические показатели, в том числе макро-имикроэлементы. Пробы крови отбирали у 5 самцов и 5 самок из каждой группы,животных определяли методом случайной выборки.В сыворотке крови определяли следующие показатели: общий белок,глюкозу,активностьаланинаминотрансферазы(AЛT),аспартатаминотрансферазы (AСT), лактатдегидрогеназы (ЛДГ), щелочнойфосфатазы (ЩФ) определяли на полуавтоматическом биохимическоманализаторе «Biochеm SA» (США) с использованием наборов реактивовфирмы «High Technology» (США). Белковые фракции сыворотки кровиопределяли нефелометрическим методом (Берестов В.А., 2005), общиеиммуноглобулины - методом высаливания сульфатом натрия (Keckwick R.A.,1940), бактериальную активность сыворотки крови (БАСК) - по общепринятойметодике (Кузьмина Т.А., Смирнова О.В., 1966), лизоцимную активностьсыворотки крови (ЛАСК) – по методу В.Г.

Дорофейчука (1968), опсонофагоцитраную реакцию – по А.С. Лабинской (1978), лейкограмму – по И.П.Кондрахину (2004), церулоплазмин – по В.Б. Гаврилову и др. (1987), SHгруппы белков – по методу В.Ф. Фоломеева (1981), малоновый диальдегид(МДА) – в соответствие с рекомендациями В.С. Камышникова (2000), титрантител к сальмонеллезным антигенам – в реакции агглютинации (ЛабинскаяА.С., 1978), титр антител к вирусу чумы плотоядных – иммуноферментныманализом (Равилов Р.Х., 2011).Одновременно со взятием проб крови у зверей брали пробы кормов (n=5 вкаждый срок исследования), а также пробы волоса путем выщипывания их скончика хвоста (n=5 у каждого вида зверей в каждый срок исследования).В рационах, в цельной крови и волосяном покрове определялисодержание макроэлементов (P, Ca, K, Na, Mg), жизненно (Fe; Co; Mn, Cu, Cr,Zn Se, I) и условно необходимых элементов (В, Si, Ni, V, Li), токсичныхэлементов (Sn, Sr, Al, Pb, Cd, Hg, As) с помощью атомной эмиссионной и массспектрометрии на приборах Optima-2000 DM и ELAN-9000 (Perkin-Elmer,USA).После убоя животных для гистологических исследований были взятыкусочки печени и почек от 20 лисиц (по 5 зверей из каждой группы), которыефиксировали в 5% нейтральном формалине.