Автореферат (Изучение травы Inula Viscosa (L.) с целью создания экстракта и геля для местного и наружного применения), страница 4

Жидкий экстракт 1:1 из травы Inulaviscosa, был назван «Жэтривис».181. ПодготовкаоборудованияИзмельчение ЛРС2. Подготовка сырья иэкстрагентаПросеивание ЛРСПодготовка экстрагента3. Получение жидкогоэкстрактаНамачивание ЛРСНастаивание с 1/3экстрагентаI. Слив (85% от массыЛРС)4.

Объединение ивыпаривание (до 15% отмассы ЛРС)II. Слив (полностью) иотжимIII. Слив (полностью) иотжимШрот5. Объединение с первойвытяжкойОтстаивание6. Очистка7. Упаковка и маркировкаРегенерацияспирта (отгонка)ФильтрованиеУпаковка во флаконыМаркировкаСпирт.отгонШротПриготовлениеэкстрагентаОтходРисунок 16. Схема способа получения жидкого экстракта I.viscosa (1:1) - «Жэтривис»Контроль качества препарата «Жэтривис» проводился согласно принципусквозной стандартизации от ЛРС к препарату по разработанной ранее методике(рисунок15). Содержание суммы флавоноидов в экстракте в пересчете на рутин составилоне менее 1,96%.Установление срока годности «Жэтривис» проводилось на 6 сериях препарата втечение 2,5 лет хранения, результаты определения стабильности по показателям качества(представленным в таблице 6), позволяют установить срок годности 2 года.19Таблица 6.

Номенклатура показателей качества препарата «Жэтривис»Показатель качестваОписаниеПодлинность:ТСХ (в системе н-бутанол - кислота уксуснаяледяная – вода (4:1:1).Детектирование зоны адсорбции веществпроводили в УФ (365 нм) до и послеобработки хроматограмм последовательнорастворами дифенилборилоксиэтиламина иПЭГ-400Количественное содержание:флавоноиды в пересчете на рутин, %,УФ-СФМ при 410 нм.Содержание спирта этилового, масс %ОФС.1.2.1.0016.15 (1.2. ГХ)Плотность, г/см3Сухой остаток, %Микробиологическая чистотаСодержание тяжелых металловпрепарат «Жэтривис»Жидкость зелено-коричневого цвета с легкойопалесценцией и характерным запахом.Зоны голубого цвета с Rf около 0,51(хлорогеновая кислота) и 0,75 (кофейнаякислота), зона коричневого цвета с Rf около0,58 (рутин). После опрыскивания: зоны синезеленоватого цвета с Rf около 0,51(хлорогеновая кислота) и 0,75 (кофейнаякислота), зона оранжевого цвета с Rf около0,58 (рутин).

Допускается наличие других зонадсорбции. В соответствии со стандартами.Не менее 1,96Не менее 480,964 – 0,970Не менее 30Соответствует требованиям ГФ (категория 4Б)Не более 0,01%На основании проведенных исследований разработан проект НД Девясила липкоготравы экстракт жидкий (1:1) «Жэтривис».4. Разработка состава и технологии получения «Жэтривис-гель»Препарат«Жэтривис»,предполагаетсяиспользоватьвкачествеантибактериального и противовоспалительного средства для местного и наружногоприменения в составе мазевых ЛФ и самостоятельно в виде раствора для орошения.Изучение антимикробной активности и противовоспалительного действия вопытах in vitro и in vivo на лабораторных животных показало выраженнуюпротивовоспалительную активность при содержании 1,0-1,5%, антимикробное действиеот 3%. Для обеспечения репаративного эффекта предложено использовать 10% препарат«Жэтривис» в составе аппликационной ЛФ «Жэтривис-гель».На основании экспериментов по разработке состава геля в качестве полимеравыбран Ареспол и установлена его концентрация 1,5%, при содержании жидкогоэкстракта 10%.

Поскольку введение 10% препарата «Жэтривис» в гель Аресполаприводит к изменению растворимости веществ экстракта изучено влияние глицерина, ПГи ПЭГ-400 на вязкость и внешний вид образцов. Критериями приемлемости считали:удовлетворительный внешний вид – прозрачный однородный гель со слабой20опалесценцией и значение динамической вязкости в диапазоне 80-120 Пахс, при 9 об/сек,как комфортную при аппликации на поврежденную кожу. Состав геля с препаратом«Жэтривис» представлен в таблице 7.Таблица 7. Состав «Жэтривис-гель» на 100,0 гКомпонентыСодержание, гПрепарат «Жэтривис»Ареспол (ТУ 2219-005-29053342-97)Трометамол (ЛСР-001567/08-140308, 2008)Глицерин (ФС.2.2.0006.15)Пропиленгликоль (Ph.Eur.)Полиэтиленгликоль-400 (ТУ 2483-007-71150986-2006)Вода очищенная (ФС.2.2.0020.15)10,01,5до рН 6,0-7,010,010,010,0до 100,0Схема разработанной технологии получения «Жэтривис-гель», представлена нарисунке 17.ВР.2.2.Санитарная подготовкапомещенийПодготовка персонала кработеВР.2.3.Подготовка оборудованияВР.3.1.Прием и распределениесырьяВР.3.2.Взвешивание компонентовТП.4.1.Приготовление дисперсииАреспола в водеТП.4.2.Нейтрализация дисперсииРАП трометамоломВР.2.1.ТП.5.2.Приготовление раствораЖэтривис в смеси спиртовСмешивание гелевойосновы и раствораТ.П.5.3.Гомогенизация геляТП.5.1.ЖэтривисУМО.6.1 Фасовка в тубыКх, КмУМО.6.2.

МаркировкаВР.1.Получение водыочищеннойВР.2.Кх, КмСанитарнаяподготовкапроизводстваотходыВР.3.Кт, КхПодготовка сырьяТП.4.КтПолучение гелевойосновыМатериальные механическиепотериТП. 5.Кт, Кх,КмПолучение«Жэтривис-гель»Материальные механическиепотериМатериальные механическиепотериУМО.6. Фасовка и упаковкаКт, КхМатериальные механическиепотериНа склад готовой продукцииКт - контроль технологический, Кх – контроль химический, Км - контроль мбчРисунок 17. Технологическая схема получения «Жэтривис-гель».21Биофармацевтическая оценка разработанного состава показала высвобождение80% действующих веществ за 4 часа эксперимента (рисунок 18).Количество флавоноидов в пересчете на рутинот общего, %9080706050403020100012345Время, чРисунок 18.

Кривая кинетики высвобождения флавоноидов из «Жэтривис-гель»Стандартизация качества «Жэтривис-гель» проведена по показателям качества,представленным в таблице 8. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин(рисунок 15) в «Жэтривис-гель» составило не менее 0,178%.Таблица 8. Показатели качества «Жэтривис-гель»Показатель качестваОписание (Визуально)Подлинность:ТСХ (в системе н-бутанол - кислота уксуснаяледяная – вода (4:1:1).Детектирование зоны адсорбции веществпроводили в УФ (365 нм) до и послеобработки хроматограмм последовательнорастворами дифенилборилоксиэтиламина иПЭГ-400Масса содержимого упаковки,ОФС.1.4.2.007.15Однородность - ОФС.1.4.1.0008.15 (Мази)pH 10% водного извлечения геляОФС.1.2.1.0004.15 ПотенциометрическиМикробиологическая чистотаОФС 1.2.4.0002.15Количественное содержание флавоноидов впересчете на рутин, %,УФ-СФМ при длине волны 410 нм.НормыОднородная,гелеобразнаямасса,безмеханических включений, буро-зеленого цветасо слабой опалесценцией и специфическимзапахом.Зоны голубого цвета с Rf около 0,51(хлорогеновая кислота) и 0,75 (кофейнаякислота), зона коричневого цвета с Rf около0,58 (рутин).

После опрыскивания: зоны синезеленоватого цвета с Rf около 0,51(хлорогеновая кислота) и 0,75 (кофейнаякислота), зона оранжевого цвета с Rf около 0,58(рутин). Допускается наличие других зонадсорбции.В соответствии со стандартами.± 4% для одной упаковки (от 28,8 г до 31,2 г.).Не должно наблюдаться сгустков не менее,чем в трех пробах.6,5-7,0категория 2Суммы флавоноидов в пересчете на рутин неменее 0,178%.По результатам определения стабильности на 5 сериях образцов в процессехранения в тубах алюминиевых, согласно разработанной спецификации, предложен срок22годности «Жэтривис-гель» 2 года. На основании проведенного исследования разработанпроект НД «Жэтривис-гель».Изучение специфической активности на лабораторных животных показало (таблица9), что «Жэтривис-гель», обладает лечебным эффектом в условиях модели термическогоожога, превышающим лечебный эффект препарата сравнения.

Местнораздражающего иаллергизирующего действия за время проведения эксперимента не выявлено.Таблица 9. Влияние «Жэтривис-гель», на динамику заживления термическогоожога у мышейПолноезаживление, дниПлощадь ожога (см2)Вариантопыта (n=10)Контроль(безлечения)Исходнаяплощадьожога(см2)1,0003 день7 день10день14день17день21день1,043±0,0300,907±0,0710,724±0,0730,292±0,0200,135±0,0430,094±0,01023-«Жэтривис-гель»1,0000,832±0,0800,750±0,014*0,566±0,006*0,102±0,003*0017Препаратсравнения1,0000,994±0,1120,910±0,0720,622±0,0440,256±0,0900,107±0,020*021Плацебо1,0000,927± 0,865± 0,704± 0,247± 0,115±0210,1080,060* 0,0400,0170,010*Примечание: * - различия статистически достоверны по сравнению с контролем при Р ≤ 0,5Такимобразом,исследованновыйвидЛРСтраваI.viscosa,изученыдиагностические признаки и состав целевого фрагмента метаболома.

Предложен способполучения жидкого экстракта «Жэтривис». С помощью методов in silico, in vitro и in vivoобосновансоставиразработанатехнологияполучения«Жэтривис-гель»противовоспалительного, антимикробного и ранозаживляющего действия.ОБЩИЕ ВЫВОДЫ1. На основании анализа данных научной литературы о БАС целевого фрагментаметаболома и опыта народной медицины Сирии выявлена возможность использованиярастения I.viscosa, в качестве источника ЛРС для получения аппликационных ЛФпротивовоспалительного репаративного и антимикробного действия;232. Изучены фармакогностические особенности травы девясила липкого – I.viscosa,выявлены макро- и микро- диагностические признаки, установлены числовыепоказатели;3.

установлен состав БАС целевого фрагмента метаболома I.viscosa и in silicoподтверждено наличие противовоспалительной, антимикробной и других видовактивности предполагающих целесообразность разработки лекарственных препаратовдля местного и наружного применения;4. Разработаны методики количественного определения БАС в сырье I.viscosa УФ-СФМпри длине волны 410 нм, приемлемые для сквозной стандартизации жидкого экстракта«Жэтривис» и аппликационной лекарственной формы «Жэтривис-гель»;5.

Разработан способ получения жидкого экстракта травы I.viscosa, определеныпоказатели его качества и стабильность в течение двух лет хранения. Установленаантимикробная активность in vitro, противовоспалительная с помощью iNOs, доказанопротивовоспалительное действие на лабораторных животных in vivo;6. Разработаны состав и технология аппликационной лекарственной формы –«Жэтривис-гель», определены показатели его качества и стабильность при хранении втечение 2х лет. Определены фармацевтическая доступность суммы флавоноидов(80%) в опытах in vitro и репаративная активность на модели термического ожога налабораторных животных in vivo, доказано отсутствие местнораздражающего действия;7.