Автореферат (Изучение травы Inula Viscosa (L.) с целью создания экстракта и геля для местного и наружного применения), страница 2

конф. Science4health 2017 (Москва, 2017); V науч.-практ. конф. с международнымучастием: «Молодые учёные и фармация XXI века» ФГБНУ ВИЛАР (Москва, 2017); XXVРоссийском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2018); Апробациярезультатов диссертационной работы проведена на кафедре ОФиБМТ ФГАОУ ВО РУДНот 28.08.2018, протокол 307-04 №2.Личный вклад автора заключается в том, что он инициировал тему по изучениюлекарственного растения из флоры Сирии (страна приема), сформулировал цель и задачиисследования и разработал дизайн исследования.

Автором проведены необходимыеисследования, обработаны и систематизированы полученные результаты. Фрагментыдиссертации, выполненные в специализированных научных центрах, осуществлялись сличным участием автора. Тексты тезисов, докладов, статей, автореферата идиссертационной работы написаны лично автором.Внедрение результатов исследованияПолученные в ходе исследования результаты используются в процессепреподавания фармацевтической технологии и фармакогнозии (Акты об использованиив учебном процессе от 30.03.18 и 05.04.18 соответственно).

Апробирована технологияполучения геля с экстрактом I.viscosa на производственном участке ЦКП (НОЦ) РУДН(Акт внедрения от 20.02.18).Соответствие диссертации паспорту научной специальностиДиссертационноеисследованиепроведеновсоответствииспаспортомспециальности 14.04.01-Технология получения лекарств и паспортом специальности14.04.02-Фармацевтическая химия, фармакогнозия. Результаты диссертационной работысоответствуют области исследования специальностей, пунктам 3, 4, 6 паспортаспециальности Технология получения лекарств и пунктам 5, 6, 7 паспорта специальностиФармацевтическая химия, фармакогнозия.7Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтической наукиИсследования выполнены в рамках договоров о Сотрудничестве между ФГАОУВО РУДН и ФГБНУ ВИЛАР и «О создании Научно-образовательного комплекса РУДН–ВИЛАР».ПубликацииПо теме диссертации опубликовано 7 научных работ, в том числе 2 врецензируемых изданиях, рекомендованных Высшей аттестационной комиссией (ВАК)при министерстве науки и высшего образования России.Объём и структура диссертацииТекст диссертации занимает 218 страниц компьютерного текста и состоит извведения, обзора литературы и трех глав экспериментальных исследований, выводов,списка цитируемой литературы, содержащего 164 источника, из которых 114зарубежных, 12 приложений; в работе приведены 37 рисунков и 34 таблицы.ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ1.

Материалы и методы исследований1.1 Объекты исследования: трава девясила липкого (Herba Inulae viscosae),срезанная на высоте 35-40 см от верха растения, собранная до цветения, и побеги девясилалипкого, собранные в фазу цветения, срезанные на высоте 30-35 см от верха растения.Образцы сырья собраны в период 2014 – 2017 г.г. в Сирии в окрестностях г. Хомс.В работе использовали стандартные образцы (СО) галловой кислоты, кофейнойкислоты, хлорогеновой кислоты и рутина Ph.Eur. standart (Sigma-Aldrich, Германия).Вспомогательные вещества (ВВ), растворители и реактивы фармакопейногокачества в том числе: вода очищенная (ФС.2.2.0020.15), Ареспол (TУ 2219-005-2905334297) и другие марки редкосшитых акриловых полимеров РАП (Lubrizol, США),трометамол (ЛСР-001567/08-140308, 2008), глицерин (ФС.2.2.0006.15), пропиленгликоль(ПГ) (Ph.Eur), полиэтиленгликоль-400 (ПЭГ-400) (ТУ 2483-007-71150986-2006), спиртэтиловый (ФС.2.1.0036.15).1.2 Методы исследований: Сушку травы проводили на открытом воздухе в тени.(ГФ XIII, Общие методы анализа).

Высушенное сырье измельчали на аналитическоймельнице Ika (Германия).8Микроскопическое исследование растительных тканей и получение изображенийпроводили с помощью биологического микроскопа «Ломо Микмед 1», камеры NikonCoolpix A10 и программы «AdobePhotoshop CS5.1».Аналитические методы: качественное определение фенольных соединений ТСХ –Merck (Германия); изучение БАС целевого фрагмента метаболома УВЭЖХ/ МС – AcquityUPLC «Waters» (США) с детекторами PDA и TQD, ГЖХ/МС - Varian 450GC-220MS, ГХ- Agilent 7890 с пламенно-ионизационным детектором; количественное определение БАССФМ - Cary WIN UV (Varian, США).Отгонку растворителей из извлечений проводили на ротационном испарителеLaboratory 4002, (Heidolph, Германия).

Гомогенизацию гелей осуществляли нагомогенизаторе Ika (Германия), вязкость измеряли на приборе Rheotest II (ГДР).Дляопределениятехнологическиххарактеристиксырьяипрепаратовиспользовали сертифицированное оборудование: Granulate Flow Tester GT (Erweka,Германия) - сыпучесть, SVM 101/201 - насыпная плотность (Erweka, Германия), влагомерАВ-50 (Аквилон, Россия), pH-метр S 80-К (Mettler Toledo, Испания).Прогноз активности in silico проводили с помощью программы PASS(http://www.way2drug.com/). Исследование противовоспалительной активности in vitroосуществляли с помощью специфической ферментной биотест-системы на основеиндуцибельной NO-синтазы Sigma-Aldrich (США).

Оценку антимикробной активности invitro и микробиологической чистоты (МБЧ) проводили в соответствии с методикамиОФС.1.2.4.0002.15. Изучение биологической активности in vivo проведено на моделяхформалинового отека лап и термического ожога у мышей. Фармацевтическуюдоступность действующих веществ из геля определяли методом равновесного диализачерез полупроницаемую мембрану (по Крувчинскому).Статистическую обработку результатов проводили с помощью программногообеспечения Statistica 10.0 (Stat Soft, США) и в соответствии с ОФС.1.1.0013.15.РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ2. Фармакогностическое изучение сырья I.viscosaЭксперименты по фармакогностическому изучению травы I.viscosa и разработкепрепаратов на его основе проводились согласно дизайну исследования, представленномуна рисунке 1.Рисунок 1.

Дизайн исследования910Проведено фармакогностическое изучение I.viscosa, произрастающего в Сирии. Вкачестве сырья этномедицина использует листья, собранные с марта по ноябрь. Массовыйсбор сырья с дикорастущих зарослей (рисунок 2), предполагает заготовку надземнойчасти растения (рисунок 3).Рисунок 2. Заросль I.viscosa в регионе ХомсРисунок 3. Трава I.viscosaДля обоснования выбора сырья I.viscosa проведено сравнение двух вариантовзаготовки по показателям, представленным в таблице 1.Таблица 1. Сравнительная характеристика возможных видов сырья I.viscosaВид сырьяТрава до цветенияТрававфазецветенияСостав биомассы высушенного сырья, %Стеблей:42Стеблей: 41Листьев: 58Листьев: 26Соцветий: 33Содержаниеэкстрактивныхвеществ,31,12±0,7131,22±1,22извлекаемых водой, %Содержаниеэкстрактивныхвеществ,32,10±0,3427,28±0,53извлекаемых 70 % спиртом, %Содержание фенольных соединений, %6,87 – 7,633,35-4,72Показатель сравненияДанные таблицы 1 показывают, что содержание экстрактивных веществ,извлекаемых водой и 70% спиртом, в обоих видах сырья сопоставимо.

Однако, в травесобранной до цветения, листья составляют около 60% биомассы сырья и содержаниефенольных соединений достигает 7%, что служит основанием для ее дальнейшегоизучения в качестве перспективного вида ЛРС.Цельное сырье - смесь цельных и частично измельченных листьев и стеблей.Листья размером около 30-70 х 20-30 мм, сидячие, продолговато-ланцетные сокругленной или заостренной верхушкой, мелкозубчатые, цвет с обеих сторон темнозеленый. Запах сильный, специфический.11Верхняя и нижняя эпидерма листа состоит из тонкостенных полигональных клетокс многочисленными устьицами (аномоцитный тип), присутствуют многочисленныетрихомы 3-х типов.Рисунок 4.

Фрагмент эпидермы нижнейстороны листа1-Головчатый волосок на одноклеточнойножке;2-Головчатый железистый волосок смногорядным основаниемРисунок 6. Головчатыйволосоксдвурядноймногоклеточной головкойжелезистыйножкойиРисунок 5.

Фрагмент эпидермы верхнейстороны листа1-Головчатый железистый волосок смногорядным основанием;2-Головчатый волосок на одноклеточнойножке;3-УстьицаРисунок 7. Головчатый волосок надвуклеточной ножке и многоклеточныйволосок с удлинёнными апикальнымиклетками и расширенным основаниемМелкие железистые трихомы, состоящие из короткой ножки и многоклеточнойголовки (рисунок 4, 5). Крупные железистые волоски, состоящие из массивной двурядной(иногда однорядной) ножки и многоклеточной (6-10 клеток) головки (рисунки 4, 5, 6).Крупные волоски, состоящие из толстостенных клеток, покрытых складчатой кутикулой(рисунки 7, 8). Эпидерма стебля состоит из полигональных клеток, на микрофотографиитакже видно устьице аномоцитного типа (рисунок 9). На эпидерме стебля имеютсяголовчатые железистые волоски с многоклеточной головкой на многоклеточнойдвурядной ножкой (рисунок 10).

Поперечный срез стебля (рисунок 11) не пучковогостроения, на котором видны: паренхима сердцевины, сосуды древесины, паренхима коры,пучки лубяных волокон и железистые волоски. Значительная часть стебля занятамеханическими тканями.12Рисунок 8. Простые многоклеточныеволоски с бочонковидными клетками восновании и с удлиненными апикальнымиклетками.Рисунок 9. Фрагмент эпидермы стебля сустьицем1 - Паренхимасердцевины;2 - Сосудыдревесины;3 - Кора;4 - Пучкилубяныхволокон;5 - Железистыеволоски.Рисунок 10. Головчатый железистыйволосок с многоклеточной двуряднойножкой и многоклеточной головкой наэпидерме стебляРисунок 11.