Автореферат (Разработка подходов к стандартизации инновационного лекарственного средства в рамках реализации программы стратегии фарма 2020), страница 2

Количественное определение и идентификация примесейосуществляласьметодамиВЭЖХ-УФиВЭЖХ-МС/МС.Валидацияразработанных аналитических методик осуществлялась в соответствии стребованиями ОФС ГФ XIII (ОФС.1.1.0012.15).7Достоверность научных положений и выводовДиссертационная работа выполнена на современном научно-методическомуровне. В ходе выполнения исследования использованы современныефармакопейные методы (ВЭЖХ, ВЭЖХ-МС/МС и другие), соответствующиепоставленным целям и задачам. Экспериментальные данные, полученныеавтором, достоверны, обработаны с применением методов современнойстатистики.Научныеположенияивыводы,сформулированныевдиссертационной работе, обоснованы, достоверны и логично вытекают изполученных автором экспериментальных данных.

Первичная документацияисследования проверена и соответствует материалам, содержащимся в работе.Апробация результатов исследованияМатериалы исследования были изложены на конференции «Достижения иперспективы молодых ученых НИИФ (результаты работы дипломников /аспирантов / докторантов / соискателей)» (Москва, 2015 г.), на Факультетскойнаучно-практической конференции, посвященной 110-летию со дня рожденияЗаслуженного деятеля науки СССР, д.б.н., профессора Швайковой М.Д.(Москва, 2015 г.), на VII Международной научно-методической конференции«Путииформысовершенствованияфармацевтическогообразования.Актуальные вопросы разработки и исследования новых лекарственныхсредств» (Воронеж, 2018 г.).

Апробация работы проведена на заседаниикафедры фармацевтической и токсикологической химии им. А.П. АрзамасцеваПервого МГМУ им. И.М. Сеченова (28.04.2018).Личный вклад автораАвтору принадлежит ведущая роль в выборе темы исследования, постановкецели и задач работы; планировании и реализации эксперимента, обработкеэкспериментальных данных, их обобщении и систематизации, формулировкеобщих выводов; докладах и публикациях.8Внедрение результатов исследованияРезультаты диссертационного исследования, в том числе разработанныеметодики контроля качества, внедрены в практическую деятельность компании«WDSФарма»,связаннуюспроизводствомстоматологическогогеляГерпенокс© R.O.C.S.© (ООО «ЕВРОКОСМЕД-Ступино»).Соответствие диссертации паспорту научной специальностиНаучные положения диссертации соответствуют формуле специальности14.04.02 – фармацевтическая химия, фармакогнозия.

Результаты проведенногоисследования соответствуют области исследования специальности, пункту 3 –«Разработкановых,совершенствование,унификацияивалидациясуществующих методов контроля качества лекарственных средств на этапах ихразработки, производства и потребления».Связь исследования с проблемным планом фармацевтических наукДиссертационная работа была выполнена в рамках комплексной темы Развитиенаучных и научно-методических основ, базовых и инновационных подходомпри разработке, внедрении и применении лекарственных средств, № гос.Регистрации01201261653.Темаработывключенавпланнаучныхисследований кафедры фармацевтической и токсикологической химии им. А.П.Арзамасцева ФГАОУ ВО Первый МГМУ им.

И.М. Сеченова Минздрава России(Сеченовский Университет) «Основные направления создания и оценкикачества лекарственных средств».Объем и структура диссертацииДиссертационная работа изложена на 142 страницах машинописного текста,состоит из введения, обзора литературы, трех глав собственных исследований,общих выводов, списка литературы и приложений. Работа иллюстрирована 20таблицами и 33 рисунками.

Список литературы включает 108 источников, в томчисле 41 – на иностранных языках.9ПубликацииОсновное содержание, результаты исследования и выводы отражены в 6публикациях, в том числе 3 статьях в изданиях, рекомендованных ВАКМинобрнауки РФ.ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫОбъекты исследованияОбъектамиисследованияявлялисьобразцысубстанцииновогокомплексного лекарственного препарата ациклогермания, промежуточныепродукты его синтеза, компоненты комплексной молекулы (ацикловир,лимонная кислота, гуанин), а также образцы лекарственной формы (гель 3%).Экспериментальные образцы субстанции и лекарственной формы былисинтезированы ООО «ВДС Фарма».Таблица 1.

Компоненты лекарственной формы ациклогермания (гель)№НаименованиеЗначение1Вода очищеннаярастворитель2Пропиленгликольгелеобразователь [31]3Ациклогерманийдействующее вещество4Гидроксиэтилцеллюлозагелеобразователь5Натрия альгинатгелеобразователь [5]6Полисорбатсолюбилизатор7МетилпарабенконсервантКсилитолкоррегент вкуса [25, 26]Ментолароматизатор8OHOOOOO+H3NONHNOHN2OHOHOOGeNOOHONHHO+H3NOOONHOHNH2Рисунок 1. Структурная формула ациклогермания10Материалы и методы исследованияИзучение физико-химических свойств ациклогермания, разработку методиканализа, установление сроков годности и научно-обоснованных норм качествасубстанции осуществляли на базе Лаборатории Фармакокинетики НИИФармации Первого МГМУ им. И.М.

Сеченова, а также ООО «Центрфармацевтической аналитики». Хроматографический анализ ациклогерманияметодомВЭЖХпроводилисиспользованиемвысокоэффективногожидкостного хроматографа Agilent 1290 series, с УФ-детектором, США,(обработку данных производили при помощи ПО Agilent Chemstation v. 7.1), атакже с использованием высокоэффективного жидкостного хроматографаAgilent 1290 series, с масс-селективным детектором с тройным квадруполем(6410), обработку данных проводили с использованием программногообеспечения Mass Hunter Quantitative Analysis, версия B.03.01, AgilentTechnologies.ИдентификациюиспользованиемосновнойвысокоэффективногопримесижидкостногоосуществлялихроматографасWatersAcquity H-class system с масс-селективным детектором (обработку данныхпроводили при помощи ПО MassLynx v 4.1, Waters).Изучение субстанции ациклогермания методом атомно-абсорбционнойспектрометриипроводилосьнаспектрометресэлектротермическойатомизацией (ЭТА) и зеемановской коррекцией неселективного поглощениямодели Люмэкс МГА-915МД, с использованием лампы с полым германиевымкатодом.Изучение pH водного раствора субстанции ациклогермания осуществлялипри помощи pH-метра лабораторного S220 SevenCompact (Mettler ToledoШвейцария).Изучениеспектральныххарактеристикациклогерманияатакжекомпонентов комплексной молекулы осуществляли про помощи ИК Фурьеспектрофотометра ФСМ 1201 (ООО Инфраспек, Россия).11Изучениестабильностиациклогерманияметодомиустановлениеускоренногосрокастарениягодностихраненияосуществлялисиспользованием термостата FD 53 (Binder, Германия).Изучение реологических свойств геля ациклогермания осуществлялось сиспользованием ротационного вискозиметра Lamy Rheology RM 200 скоаксильными цилиндрами ms din 33 объемом 17 мл, программное обеспечениеRHEOMATIK (Франция).Результаты исследованияВ Главе 1 диссертационной работы предоставлен анализ отечественных изарубежных публикаций в научных изданиях, нормативных документов ипатентов, посвященных сущности Стратегии Фарма 2020, классификации икраткой характеристики фармакологического действия противовирусныхлекарственных препаратов, в том числе, более подробно, предназначенных длятерапии заболеваний, вызванных вирусом простого герпеса, Varicella zoster,вируса Эпштейна-Барр и цитомегаловируса.

Кроме того, отдельное вниманиеуделено истории и современной практике использования германийсодержащихлекарственных препаратов в противовирусной терапии, истории создания ирезультатам доклинических исследований собственно ациклогермания, а такжесовременным требованиям к структуре и принципам создания нормативнойдокументации для фармацевтических субстанций и мягких лекарственныхформ.Глава 2 посвящена изучению физико-химических свойств и разработкеметодов анализа ациклогермания. Начало главы содержит перечень объектовисследования, использованных реактивов, растворителей и оборудования.Основное содержание главы составляет описание процесса и результатовисследования физико-химических свойств субстанции ациклогермания, аименно внешнего вида субстанции, растворимости субстанции в различныхрастворителях (воде очищенной, метаноле, диэтиловом эфире, хлороформе игексане), прозрачности и цветности водного раствора субстанции, pH водного12раствора, и его сравнение с pH водного раствора ацикловира, изучениеспектральныххарактеристиксубстанции.Последнеевключаетвсебяспектрометрию в инфракрасной области, включая расшифровку ИК-спектра,атомно-абсорбционнуюспектрометриюсцельюразработкиметодикикачественного и количественного определения германия, УФ- и массспектрометрический анализ, совмещенный с ВЭЖХ.

Разработанные методикиколичественного определения и качественного анализа валидированны,результаты валидационных испытаний включены в главу. Подробныерезультаты исследования изложены далее.Растворимость.Таблица 2. Растворимость субстанции ациклогерманияРастворительСтепень растворимости ациклогерманияВодаОчень легко растворимМетанолМало растворимДиэтиловый эфирМало растворимХлороформМало растворимГексанОчень мало растворимСогласно требованиям рекомендациям, изложенным в ГФ XIII, (нерекомендуется использование легкокипящих и легковоспламеняющихся илиоченьтоксичныхрастворителей),атакжепринимаявовниманиеиндивидуальные особенности исследуемой субстанции, было принято решениевключить в проект нормативной документации испытание с использованиемтрех растворителей: воды очищенной, метанола и хлороформа.Прозрачность и цветность раствора субстанции ациклогермания.Было проведено изучение прозрачности 1% водного раствора субстанцииациклогермания.

Исследование проводилось в соответствии с требованиями ГФXIII,длятрехобразцовсубстанции,соответствующихразнымпроизводственным циклам. По результатам испытания было установлено, чтораствор является прозрачным.13Было проведено изучение цветности 1% водного раствора субстанцииациклогермания. Исследование проводилось в соответствии с требованиями ГФXIII,длятрехобразцовсубстанции,соответствующихразнымпроизводственным циклам. По результатам испытания было установлено, чтораствор является бесцветным.РH водного раствора.По результатам исследования было установлено, что значение pH 1%водного раствора ациклогермания достоверно укладывается в диапазон от 2,0до 2,2.

Кислая реакция среды субстанции может быть обусловлена наличием веесоставефрагменталимоннойкислоты,чтобылоподтвержденосоответствующим исследованием.Спектрометрия в инфракрасной области при анализе ациклогермания.В качестве основного метода идентификации субстанции ациклогерманиябыл предложен метод спектрометрии в инфракрасной области, описанный в ГФXIII (в таблетках с калия бромидом). При изготовлении образцов методомпрессования таблеток в качестве матрицы используется чистый калия бромид,несодержащийпостороннихполоспоглощения,предварительноразмельченный и осушенный. ИК-спектр субстанции ациклогермания, снятый вобласти от 4000 до 500 см-1 в диске с калия бромидом, по положению полоспоглощения должен соответствовать эталонному ИК-спектру.Было произведено исследование ИК-спектров ациклогермания, а такжесубстанций его структурных компонентов (ацикловира, аргинина и лимоннойкислоты), с целью сопоставления полученных спектров и идентификациихарактеристических полос поглощения ациклогермания.

При исследованииобразцов ациклогермания методом спектрометрии в инфракрасной областиотмечены следующие характеристические полосы поглощения: Широкая полоса поглощения с максимумами при 3443 и 3380 см-1(валентные колебания N-H в лактамной форме фрагмента ацикловираи NH2- группе аргинина.14Широкая полоса поглощения с максимумами при 1724, 1670 см -1(валентные колебания С=О в лактамной форме сложноэфирной связии карбоксильной группы и валентное колебание C=NH, неразделяемоеперекрывание ряда полос).Полученные данные соответствуют теоретическим представлениям охимической структуре ациклогермания.Атомно-абсорбционная спектрометрия фрагмента германия в составеациклогермания.Для определения фрагмента германия в составе ациклогермания былпредложенметодатомно-абсорбционнойспектрометрии,сочетающийотносительную простоту анализа и пробоподготовки, а также высокуюселективность.В качестве стандарта был использован раствор германия диоксида(Germanium Oxide, ESPI Metals, США) в воде очищенной (класс чистоты MilliQ).Проведены испытания растворов с различной концентрацией германия (потри испытания для каждой концентрации) и на основании полученных данныхпостроен первичный калибровочный график.