Диссертация (Фармакогностическое изучение комплексных лекарственных растительных средств), страница 8

Испытанияналигнифицированныеэлементы (р-р флороглюцина и25% р-р серной кислоты; р-рсафранина;крахмал(р-вЛюголя);.дубильныевещества(1%р-ржелезоаммониевых квасцов);производные антрацена.ТравыКачествен-ныемикрохимическиеигистохимическиереакцииЛистьяпроводящей,механической тканей,секреторныхикристаллическихобразований, запасныхвеществ.наличиеспецифических слоев);секреторныеикристаллическиеобразования,механическиеипроводящиеткани,запасныевещества.-Корни,корневища и т.д.ПлодыСеменаПочкиПоперечныесрезы,распилыпослеразмягченияилипорошок.Свечениесосудовксилемы,одревесневшихэлементовмеханических тканей,содержимоесекреторныхобразований и клетокпаренхимы.Поперечныесрезыпослеразмягчения.

Свечениекутикулыэкзокарпия,механическихипроводящих элементовмезокарпия;выстилающиеслоисекреторных каналов иихсодержимое.Поперечныесрезыпослеразмягчения. Характерсвечениясеменнойкожуры,содержимоеклетокэндоспермаи зародыша(голубоесвечениежирногомасла)Цельныепочкисповерхностиили срезы.Корни,корневища и т.д.ПлодыСеменаПочкиЦельное сырье, срезыпорошок. Испытания накрахмал (р-в Люголя);жирное, эфирное масло (рр Судана III, медиленовогосинего); слизь (р-р чернойтуши)Препараты споверхностичешуй, срезы.Обнаружениекутикулы,эфирногомасла(р-рСуданаIII),слизи(р-рчерной туши);лигнифицированныеоболочки38клеток(р-рфлороглюцинаи 25% р-рсернойкислоты; р-рсафранинаСлизь (р-рчернойтуши);инулин(приотсутствиикрахмала ср-ром –нафтола исернойкислотой)Значительным шагом в совершенствовании микроскопического анализа ЛРС ипрепаратов стала ОФС 13 ГФ РФ «Техника микроскопического и микрохимическогоисследования лекарственного растительного сырья (ЛРС) и лекарственных растительныхпрепаратов (ЛРП)» [40, 169].По сравнению с предыдущим вариантом ОФС ГФ СССР 11 издания в настоящийдокумент впервые включен раздел «Термины и определения», в котором охарактеризованытакие понятия как «анатомо-диагностические признаки», «микроскопическое исследование»,«микрохимическоеисследование»,«гистохимическоеисследование»,«микропрепарат»,«поперечный срез», «продольный срез», «давленый микропрепарат», что позволит лучшеориентироваться и интерпретировать изложенный в статье материал в практическойдеятельности аналитика [40, 141, 169].

Широко и полно приведены методики приготовлениямикропрепаратов и проведения микрохимического и гистохимического исследования дляцельного, измельченного и порошкованного сырья различных морфологических групп.Впервые в статью введен раздел, посвященный количественной характеристике анатомодиагностических признаков ЛРС, таких как размеры, частота встречаемости измерениетолщины объектов (лепестков и чашелистиков).Частью микроскопического анализа является микро- и гистохимическое исследованиеЛРС. В ОФС «Техника микроскопического и микрохимического исследования ЛРС и ЛРП»приведены реакции на основные БАВ сырья различных морфологических групп.В отечественной и зарубежной литературе, посвященной анализу лекарственногорастительного сырья, приведены следующие наиболее распространенные реакции (Таблица 7).39Таблица 7. Некоторые качественные, микро- и гистохимические реакции,используемые при анализе лекарственного растительного сырья [39, 40, 49, 50, 51, 73, 89,90, 91, 142, 172, 173, 175, 196, 200, 214, 221]ВеществоЭфирные маслаЖирные маслаАнтрахиноныДубильныевеществаПроизводныекатехинаФлавоноидыНазвание реактива1.

Судан ΙΙΙ (∗)2. Осмиевая кислота1. Судан ΙΙΙ (∗)2. Осмиевая кислота3. Омыление по Розенталеру1. 5 % р-р щелочи (∗)1. Р-ры солей окисного железа(∗)2. Р-р бихромата калиякрасное окрашиваниечерно-коричневое окрашиваниекрасное окрашиваниечерно-коричневое окрашиваниеигольчатые кристаллы1. Р-р ванилина + HCl (конц.)красное окрашиваниечерно-синее или черно-зеленоеокрашиваниекрасновато-коричневыйзернистый осадоккрасное окрашивание1.

Р-р алюминия хлорида (∗)2. Цианидиновая р-ция (∗)Осаждение 96 % этанолом (∗)желто-зеленое окрашиваниекрасное окрашиваниеаморфные беловатые осадкиПолисахариды(крахмал, инулин,слизь)КрахмалР-р иода (∗)ИнулинР-ция Молиша (послеисключения крахмала) (∗)Слизь1. Р-ция с тушью ∗2. Р-р тионинаПектины(и кислые сизи)СапониныРезультат реакции3.

Р-ция двойного окрашивания(∗)4. Спиртовой р-р метиленовогосинего(∗)Рутениум красный1. Р-р иода (∗)2. Р-ция с хлоридом сурьмы3. Кровяная желатина4. Р-ция пенообразования (∗)Целлюлоза1. Хлор-цинк-иод2. Гуоксам (р-в Швейцера)Лигнин1. Р-р флороглюцина +HCl(конц.) (∗)2. Р-р сульфата анилина(∗) - реакции, предусмотренные ГФ ХIII.сине-феолетовое окрашиваниеоранжево-красное (краснофеолетовое) окрашиваниесветлые зоны на темном фонекрасно-феолетовые набухшиечастицыжелтое окрашивание клеток сослизьюголубое окрашиваниекрасное окрашиваниежелтые глыбки и сгусткипурпурно-красные (краснофеолетовые) сгусткипрозрачная зона гемолизасине-феолетовое окрашиваниерастворение клеточных оболочеккрасное окрашиваниежелтое окрашивание40МетодлюминесцентноймикроскопииЛРС,разработанныйивнедренныйвфармакопейный анализ отечественными фармакогностами, также нашел свое место в ОФС ГФРФ 13 в специальном разделе.

С помощью него определяются наличие и локализация БАВнепосредственно в растительных тканях всех морфологических групп сырья [40, 91, 92, 94].Без использования микроскопического анализа не возможно ни одно современноефармакогностическое исследование. Изучая новые растительные источники ЛРС, разрабатываяи совершенствуя нормативную документацию, микроскопический анализ в полной меревостребован фармацевтической наукой, чему свидетельствуют многочисленные публикации[22, 24, 41, 53, 100, 108, 109, 122, 134, 156, 159, 168, 183, 190, 208, 210, 213, 222].В настоящее время развитие микроскопического метода анализа происходит в областистандартизации свежего и быстрозамороженного лекарственного растительного сырья, болееширокого внедрения количественных характеристик при микроскопической диагностике ЛРС[35, 56, 57, 153, 163, 182], в оценке качества пищевых растительных продуктов и биологическойэкспертизе курительных смесей (спайсов) [47, 48, 86, 133, 158].

В Самарском ГМУ изучаютсявозможности петиолярной микроскопии в качестве нового метода диагностики лекарственногорастительного сырья [110, 120, 131, 155, 184]. Вместе с тем в литературе нет сведений обисследованиях, посвященных системному подходу к микроскопической диагностике ЛРСсырья как ФСРП в составе разного рода комплексных лекарственных растительных средствах,основанной на вариабельности диагностических признаков в зависимости от морфологическойгруппы, размера частиц, способа измельчения и обработки сырья.Не нашли пока отражение в ГФ РФ 13 издания требования к качеству твердыхдозированных лекарственных форм, содержащих ЛРС и особенности оценки его подлинностиметодом микроскопического анализа.Анализ литературных данных показал, что:1.Проведенноеинформационно-аналитическоеисследованиепоказалоширокоеприменение ЛРС в качестве ФСРП в составе лекарственных растительных препаратов и другихдозированных лекарственных форм (123 вида ЛРС из 270 разрешенных к медицинскомуприменению - 46%).

С учетом опыта традиционной, в том и числе восточной, а такжесовременной медицины внедрение в фармацевтическую практику монокомпонентных икомплексных лекарственных средств на основе растительного сырья различных условийобработки является перспективным.2.Предложена классификация лекарственных препаратов на основе ЛРС как ФСРП,диференцирующая ЛРП для приготовления водных извлечений и твердые дозированные41лекарственные формы, содержащие нативное ЛРС (а также сырье животного происхождения игрибы).3.Изучениесовременнойнормативнойдокументациипоказаловажнуюрольмикроскопического анализа в стандартизации ЛРС (а также сырья животного происхождения игрибов) как ФСРП. Однако системный методический подход к определению подлинности ЛРСкак ФСРП в составе монокомпонентных и комплексных лекарственных растительных средствметодом микроскопического и микрохимического анализа отсутствует.42Глава 2.

Объекты и методы исследованияОбъектамиисследованияслужили95видовЛРСпромышленныхсерийииндивидуального сбора дикорастущих и культивируемых растений европейской и восточноймедицины, относящихся к различным морфологическим группам, семействам и содержащимразные группы БАВ.ЛРС, соответствующее нормативным документам, было предоставлено предприятиями:ООО «Фирма Здоровье», АО "Красногорсклексредства", Фармацевтическая компания "ЦисинЛтд." (г.

Гуанчжоу, Китай); ЛРС от культивируемых ЛР - Ботаническим садом ФГБОУ ВОПервый МГМУ им. И.М. Сеченова МЗ РФ; заготовка дикорастущих ЛР осуществлялась вКалужской области, Горноалтайской автономной области, республике Крым, провинцииЛаокай республики Вьетнам. Листья шалфея предсказателей (Salvia divinorum Epling & Javito),запрещенные постановлением Правительства РФ для культивирования и распространения былипредоставленыФедеральнойслужбойпоконтролюзаоборотомнаркотиковдляисследовательских целей (Таблица 8).Сырье исследовалось в цельном, измельченном виде и в виде порошков с размерамичастиц, соответствующими фармакопейной классификации как – крупный имелкий (сразмером частиц менее 2; 1; 0,5мм и менее 0,16 мм соответственно) (Таблица 8).Таблица 8.

Лекарственное растительное сырье – объекты исследования.Морфологическаягруппа№№Название сырья,производящих растенийИзмельчениеПроисхождение1Трава полыни(Полынь горькая – Artemisia absinthium L.,сем. Астровые — Asteraceae)Трава тысячелистника(Тысячелистник обыкновенный –Achillea millefolium L., сем. Астровые —Asteraceae)Трава чередыЧереда трехраздельная – Bidens tripartita L.,сем. Астровые — Asteraceae)Трава одуванчикаОдуванчик лекарственный – Taracsacumofficinale Wigg., сем.