Автореферат (Фармакогностическое изучение комплексных лекарственных растительных средств), страница 6

Анатомо-диагностическаякартина будет меняться. Для цельного сырья на срезе важно соотношение коры идревесины, расположение проводящих, механических и секреторных элементов; в«давленном» препарате измельченного сырья, тем более в порошке, эти критерии своезначение теряют, и диагностически значимыми остаются отдельные элементы покровной,22паренхимной, проводящей, механической и секреторной тканей.АБРисунок 6. Микроскопия плодов фенхеля (сухой околоплодник)А – цельное сырье (поперечный срез) (ув. х400); Б - порошок (ув. х100)Диагностическая значимость отдельных элементов анатомического строенияподземных органов и кор ниже, чем в листьях, травах, цветках и плодах, так какотсутствуетэпидермис(экзокарпий),обладающий,какправило,важнымидиагностическими признаками.Таким образом, прослеживается четкая вариабельность анатомо-диагностическихпризнаков сырья разных морфологических групп от цельного к порошку.Изучение микроскопических маркеров сырьяживотного происхождения и грибовИспользование в медицине сырья природного происхождения не ограничиваетсятолько растительными объектами.

И в европейской, а особенно в восточной медициненаходят применение грибы и животные организмы. Характеристики подлинностиподобного сырья, безусловно, должны присутствовать в нормативной документации,несмотря на определенные особенности и трудности проведения микроскопическогоанализа. Значимость микроскопической идентификации сырья животного и грибногопроисхождениямногократновозрастаетвслучаевключенияеговсоставмногокомпонентных лекарственных средств.В наших исследованиях в качестве сырья животного происхождения изучалисьбадяга и грудной щит сепии (каракатицы аптечной). Была доказана возможностьопределения показателей подлинности их порошков методом микроскопического анализа.Диагностическое значение у обоих видов сырья имеет внутренний скелет – спикулыкремнезема у бадяги и рудиментарная раковина – сепион у сепии (рис.7).Объектами исследования сырья грибного происхождения служили плодовые телатрутовика скошенного (чаги) и пории кокосовидной.23АБРисунок 7.

Микроскопия сырья животного происхожденияА – Бадяга (Spongilla lacustris L., Spongillidae), порошок (менее 1,0 мм), Ув.х90.Б - Грудной щит сепии (Sepia officinalis, Sepiidae), порошок (менее 1,0 мм), Ув.х90.Несмотря на то, что плодовые тела грибов состоят из недефференцированныхтканей–переплетенныхгифов,микроскопическаядиагностикаихвозможна.Диагностическое значение в данном случае будут иметь: строение, ветвление, размеры ицвет гиф мицелия; а также как в случае пории кокосовидной - наличие капсуловидныхобразований.Использование гистохимического анализа в определении подлинности иидентификации ЛРС различной дисперсностиДополнением к микроскопической диагностике ЛРС служат гистохимические имикрохимические реакции на различные группы БАВ, включенные во все ведущиефармакопеи.

Не смотря на то, что они приведены и в отечественной фармакопее, приописании в частных статьях микроскопии ЛРС – используются редко, что безусловнообедняет анатомо-диагностическую картину анализируемого сырья.Обобщив результаты проведенного исследования были выявлены основныефункции микрохимических реакций в диагностике ЛРС и препаратов, каждая из которыхможет иметь дополнительное диагностическое значение и расширяет возможностимикроскопического анализа (рис.8).Функции гистохимического анализав диагностике ЛРС и препаратовДоказательствоналичия БАВОпределениелокализацииБАВВизуализация признаков в растительныхпорошках ипрепаратахВидоваядифференциацияЛР и ЛРСРисунок 8. Функции гистохимического анализа в диагностике ЛРС и препаратов24В качестве примеров данных функций приводим наиболее показательныегистохимические реакции, выполненные с цельным сырьем, растительными порошками ипрепаратами (рис.9, 10, 11).АБРисунок 9.

Подтверждение наличия и локализации БАВ. Кора корицы. Поперечный срез. Ув.х90А - эфирное масло (р-ция с Суданом III)Б - крахмальные зерна (р-ция с р-вом Люголя)АБРисунок 10. Подтверждение наличия и локализации БАВ. Корневище сыти круглой, поперечный срез.А - клейстеризованный крахмал (р-ция с р-вом Люголя). Ув.х200Б - дубильные вещества (р-ция с р-ром железоаммониевых квасцов). Ув.х400АБРисунок 11. Визуализация микроскопических маркеров в порошках и лекарственных препаратахА - Порошок травы термопсиса струйного измельчения (менее 0,1 мм), (р-ция с Суданом III) Ув.

х90Б - Порошок коры дуба в драже «Тонзилгон», каменистые клетки, (р-ция с флороглюцином), Ув. х20025Изучение влияния технологических факторов на вариабельность анатомодиагностических признаков ЛРС при микроскопическом анализе.Влияние размера частиц порошкаС уменьшением размера частиц порошка диагностичность сырья уменьшается, чтодостоверно доказано на примере 20 видов сырья с размером частиц менее 1 мм.Установлены оптимальные интервалы измельченности растительных порошков длямикроскопического анализа (таблица 5).

Диагностичность ЛРС с уменьшением размерачастиц менее 0,16 мм снижается у всех видов.Былипредложеныотличныеотобщепринятыхметодикиприготовлениямикропрепаратов порошков. Известно, что по фармакопее для порошков препаратыготовятся на стекле. Установлено, что для крупного порошка менее 2,0 мм подобнаяпробоподготовка не подходит, так как растительные ткани просветляются недостаточно,от воздуха полностью не освобождаются и остаются мало пригодными для детальногоисследования. Целесообразно использовать методику для цельного или измельченногосырья. Готовить микропрепараты на стекле имеет смысл лишь для подземных органов,чтобы определить запасное питательное вещество, да и то, как дополнение кмикропрепаратам, приготовленным по методике «давленого препарата» (Таблица 4).Таблица 4. Пробоподготовка порошкованного сырья длямикроскопического исследованияОбъектыТравапустырника,траватермопсиса ланцетного, цветкибессмертника, цветки календулы,цветки липы, плоды шиповника,плоды рябины, кора крушины,кора дуба, корень солодки, кореньревеня,корневищелапчатки,корневище аираЛистья крапивы, листья сенны,листья подорожника большого,плоды аронииЛуковицы чеснокаЛистья толокнянкилистья брусникиМетодика по ГФНагреваниенапредметном стекле вкаплер-рахлоралгидратаПредлагаемая методикаОднократное кипячение в 2,5 % р-ре NaOH втечение 1-2 минут с последующимпромыванием водой методом декантацииНагреваниенапредметном стекле вкаплер-рахлоралгидратаНагреваниенапредметном стекле вкаплер-рахлоралгидратаКипячение в 5 % р-реNaOHОднократное кипячение в 5 % р-ре NaOH втечение 1-2 минут с последующимпромыванием водой методом декантацииОднократное кипячение в воде в течение 1-2минутМногократное кипячение в воде со сменойжидкостиЗатем однократное кипячение в 2,5 % р-реNaOH в течение 1 минуты с последующимпромыванием водой методом декантацииКипячение в 5 % р-ре Двукратное кипячение в 5 % р-ре NaOH вNaOHтечение 1 минуты с промыванием водойметодом декантацииВлияние измельченности и групповой принадлежности сырья на диагностичность порошков№№п/п11Вид сырья2листьякрапивы2листьятолокнянки3листьябрусникилистьясенны467листьяподорожникатравапустырникатраватермопсисаИзмельченностьсырья, оптимальная Анатомо-диагностические признакидля диагностики, мм (курсивом выделены высокоспецифичные элементы)340,1 - 1,0Фрагменты: листовой пластинки с цистолитами, жгучими, ретортовидными,головчатыми волосками и их обломками; жилок и черешков с цепочками друз оксалатакальция; отдельные волоски и их фрагменты.0,25 - 0,31Фрагменты листовой пластинки с поверхности и в поперечном сечении.

Групповоерасположение устьиц (аномоцитный тип) на нижнем эпидермисе. Кристаллы оксалатакальция различной формы.0,16 - 0,31Фрагменты расщепленной листовой пластинки. Устьица (парацитный тип) и остаткибулавовидных железок только на нижнем эпидермисе. Группы друз оксалата кальция.0,16 - 0,31Фрагменты листовой пластинки, перикарпия, крупных жилок и рахисов. На эпидермисе:многоугольные клетки с прямыми стенками, одноклеточные простые согнутые волоски сгрубобородавчатой поверхностью, розетка клеток вокруг мест прикрепления волоска.Кристаллоносная обкладка крупных жилок листа и механических волокон стеблей ирахисов.

Пласты волокнообразных кристаллоносных клеток мезокарпия плодов. Вмезофилле друзы оксалата кальция.0,16 - 0,5Фрагменты листовой пластинки и крупных жилок. На эпидермисе: головчатые волоски,места прикрепления простых волосков.0,1 - 1,0Фрагменты листовой пластинки, чашечки и венчика цветка с простыми многоклеточнымисуставчатыми волосками, местами их прикрепления и(ли) обломками; головчатымиволосками, округлыми железками; простыми многоклеточными тонкостенными волоскамичашечки и венчика.0,1 - 1,0Фрагменты эпидермиса листовой пластинки, чашечки и завязи цветка, элементы стеблей.Простые двуклеточные волоски с длинной терминальной толстостенной клеткой скрупнобугристой поверхностью и(ли) их обломки; простые двуклеточные волоски стонкостенной терминальной клеткой и(ли) их обломки; округлые валики эпидермиса места прикрепления волосков; сферокристаллы фенологликозида в клетках эпидермиса265Таблица 5Продолжение таблицы 4182цветкикалендулы30,1 - 1,0цветкибессмертника0,1 - 1,010цветкилипы0,1 - 1,011плодышиповника0,16 - 1,012плодырябины0,16 - 1,013плодыаронии0,16 - 1,0Фрагменты язычковых и трубчатых цветков с хромопластами; кусочки цветоложа и листочковобвертки.