Диссертация (Разработка состава и технологии пероральных пролонгированных гелей на основе производных акриловой кислоты), страница 9

На аналитических весахотвешивают 0,0036 г и 0,0100 г нимесулида, помещают в две разные мерные колбына 1000 мл и добавляют 800 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты в однуи 800 мл фосфатного буфера в другую. Мерные колбы помещают в ультразвуковуюванну на 30 минут при температуре 45°С.Приготовление стандартных растворов ибупрофена. На аналитических весахотвешивают 0,0160 г и 0,0268 г ибупрофена, помещают в две разные мерные колбына 1000 мл и добавляют 800 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты в однуи 800 мл фосфатного буфера в другую. Мерные колбы помещают в ультразвуковуюванну на 30 минут при температуре 45°С.2.2.2.6 Количественное определение нимесулида в пробахКоличественное определение нимесулида в гелях проводили с помощью УФспектрофотометрии при длине волны 390±2 нм в фосфатном буферном растворерН 7,5 и при длине волны 305±2 нм в среде 0,1 М хлористоводородной кислоты.Аппаратура:аналитические весы Ohaus Discovery DV-214C (США);автоматическая пипетка Biohit mLINE (Финляндия);весы лабораторные AND GX-600 (Япония);магнитная мешалка с нагревом IKA C-MAG HS 4 Digital (Германия);ультразвуковая ванна Bandelin DT 100 H, Sonorex Digitec с нагревом(Германия);спектрофотометр Shimadzu UV-3600 (Япония);программное обеспечение UVProbe 2.42.Хода анализа: Измерение спектра поглощения нимесулида в фосфатном буферес pH 7,5.

На аналитических весах отвешивают 0,01 г нимесулида, помещают вмерную колбу на 10 мл и доводят до метки фосфатным буфером с pH 7,5,встряхивают. 125 мкл полученного раствора отбирают автоматической пипеткой вмерную колбу на 10 мл, доводят до метки и встряхивают. Полученный раствор49нимесулида с концентрацией 0,0125 мг/мл переносят в кварцевые кюветы столщиной поглощающего слоя 1 см. Анализ проводят в области от 300 до 500 нм.Получение спектра поглощения нимесулида в 0,1 М хлористоводороднойкислоте. На аналитических весах отвешивают 0,003 г нимесулида, помещают вмерную колбу на 100 мл и доводят до метки этиловым спиртом, встряхивают.Автоматической пипеткой отбирают 15 мкл полученного раствора, переносят вмерную колбу на 10 мл, доводят до метки 0,1 М раствором хлористоводороднойкислоты.

Мерную колбу помещают на 30 мин в ультразвуковую ванну снагреванием до 45°С. Полученный раствор нимесулида с концентрацией 0,0045мг/мл переносят в кварцевые кюветы с толщиной поглощающего слоя 1 см. Анализпроводят в области от 200 до 400 нм.Получение спектра поглощения геля-плацебо. Измеряют оптическую плотностьгеля-плацебо, полученного в ходе теста растворения, от 200 до 500 нм.Наличие подчинения зависимости оптической плотности концентрации позакону Бугера-Ламберта-Бера определяли в интервале уровней концентраций от 11до 111% в кислой среде и от 20 до 200% в фосфатном буфере с pH 7,5 [140,153].На аналитических весах отвешивают 0,0005 г нимесулида, помещают в мернуюколбу на 100 мл, доводят до метки, встряхивают. Отбирают 100 мклавтоматической пипеткой, переносят в колбу на 100 мл и заливают 0,1 Мхлористоводородной кислотой до метки.

Мерную колбу помещают на 30 мин вультразвуковую ванну с нагреванием до 45°С. Полученный раствор имеетконцентрацию 0,005 мг/мл. Затем делают серию разведений, как указано в таблице2.2.Таблица 2.2 Серия разведений растворов нимесулида в среде 0,1 Мхлористоводородной кислотыУровень концентрации, %11223344Объем 0,1 М раствораОбъем0,005мг/млхлористоводороднойраствора нимесулида, мклкислоты, мкл500,04500,01000,04000,01500,03500,02000,03000,050Уровень концентрации, %55677889101111Объем 0,1 М раствораОбъем0,005мг/млхлористоводороднойраствора нимесулида, мклкислоты, мкл2500,02500,03000,02000,03500,01500,04000,01000,04500,0500,05000,00,0Для полученной серии разведений измеряют оптическую плотность при длиневолны 305±2 нм.

Параллельно проводят измерение оптической плотности 0,1 Мраствора хлористоводородной кислоты, значение которой учитывают в ходевычисления оптической плотности нимесулида. На основе полученных данныхстроят график зависимости оптической плотности от концентрации раствора.На аналитических весах отвешивают 0,0025 г нимесулида, помещают в мернуюколбу на 20 мл и заливают фосфатным буфером с pH 7,5 до метки. Мерную колбупомещают на 30 мин в ультразвуковую ванну с нагреванием до 45°С. Полученныйраствор имеет концентрацию 0,125 мг/мл. Затем делают серию разведений, какуказано в таблице 2.3.Таблица 2.3 Серия разведений растворов нимесулида в среде фосфатногобуферного раствора с pH 7,5Уровень концентрации, %20406080100120140160180200Объем0,125мг/млраствора нимесулида, мкл1002003004005006007008009001000Объем фосфатного буферарН 7,5, мкл4900480047004600450044004300420041004000Для полученной серии разведений измеряют оптическую плотность при длиневолны 390±2 нм.

Параллельно проводят измерение оптической плотностифосфатного буферного раствора с pH 7,5, величину которой учитывают в ходевычисления оптической плотности нимесулида. На основе полученных данных51строяткалибровочныйграфикзависимостиоптическойплотностиотконцентрации раствора.2.2.2.7 Количественное определение ибупрофена в пробахКоличественное определение ЛВ в гелях проводили с помощью УФспектрофотометрии при длине волны 220±2 нм в соответствии с требованиямиОФС 1.2.1.1.0003.15 «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимойобластях».Аппаратура:аналитические весы Ohaus Discovery DV-214C (США);автоматическая пипетка Biohit mLINE (Финляндия);весы лабораторные AND GX-600 (Япония);магнитная мешалка с нагревом IKA C-MAG HS 4 Digital (Германия);ультразвуковая ванна Bandelin DT 100 H, Sonorex Digitec с нагревом(Германия);спектрофотометр Shimadzu UV-3600 (Япония);программное обеспечение UVProbe 2.42.Хода анализа:Измерение спектра поглощения ибупрофена в фосфатном буферном растворе сpH 6,8.

На аналитических весах отвешивают 0,02680 г ибупрофена, помещают вмерную колбу на 10 мл и доводят до метки фосфатным буферным раствором с pH6,8, встряхивают. 125 мкл полученного раствора отбирают автоматическойпипеткой в мерную колбу на 10 мл, доводят до метки и встряхивают. Полученныйраствор ибупрофена с концентрацией 0,0335 мг/мл переносят в кварцевые кюветыс толщиной поглощающего слоя 1 см. Анализ проводят в области от 210 до 300 нм.Получение спектра поглощения ибупрофена в 0,1 М хлористоводороднойкислоте. На аналитических весах отвешивают 0,0020 г ибупрофена, помещают вмерную колбу на 10 мл и доводят до 0,1 М хлористоводородной кислотой рН 1,2.Мерную колбу помещают на 30 мин в ультразвуковую ванну с нагреванием до45°С.

Полученный раствор ибупрофена с концентрацией 0,02 мг/мл переносят в52кварцевые кюветы с толщиной поглощающего слоя 1 см. Анализ проводят вобласти от 210 до 300 нм.Получение спектра поглощения геля-плацебо. Измеряют оптическую плотностьгеля-плацебо, полученного в ходе теста растворения, от 210 до 300 нм.Получение спектра поглощения Soluplus®. Полученный ранее в п. 2.2.1.5 растворSoluplus® концентрацией 20 мг/мл разбавляют в 2000 раз. Снимают спектрполученного раствора в области от 210 до 300 нм.Наличие подчинения оптической плотности концентрации по закону БугераЛамберта-Бера определяют в интервале уровней концентраций от 12 до 120% вкислой среде и от 20 до 180% в фосфатном буфере с pH 6,8 [166].На аналитических весах отвешивают 0,0004 г ибупрофена, помещают в мернуюколбу на 20 мл и заливают 0,1 М хлористоводородной кислотой до метки.

Мернуюколбу помещают на 30 мин в ультразвуковую ванну с нагревом до 45°С.Полученный раствор имеет концентрацию 0,0200 мг/мл. Затем делают сериюразведений, как указано в таблице 2.4.Таблица 2.4 Серия разведений растворов ибупрофена в среде 0,1 Мхлористоводородной кислотыУровень концентрации, %1225,53952,56679,593106,5120Объем 0,1 М раствораОбъем 0,02 мг/мл растворахлористоводороднойибупрофена, мклкислоты, мкл500,04500,01062,53937,51625,03375,02187,52812,52750,02250,03312,51687,53875,01125,04437,5562,55000,00,0Для полученной серии разведений измеряют оптическую плотность при длиневолны 220±2 нм.

Параллельно проводят измерение оптической плотности 0,1 Мраствора хлористоводородной кислоты, значение которой учитывают в ходевычисления оптической плотности ибупрофена. На основе полученных данныхстроят график зависимости оптической плотности от концентрации раствора.53На аналитических весах отвешивают 0,0067 г ибупрофена, помещают в мернуюколбу на 20 мл и заливают фосфатным буфером с pH 6,8 до метки. Мерную колбупомещают на 30 мин в ультразвуковую ванну с нагревом до 45°С.