Автореферат (Сравнительная оценка эффективности препаратов для лечения зоонозного кожного лейшманиоза на лабораторной модели)

На правах рукописиКузнецова Юлия КонстантиновнаСРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРЕПАРАТОВДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗООНОЗНОГО КОЖНОГО ЛЕЙШМАНИОЗА НАЛАБОРАТОРНОЙ МОДЕЛИ03.02.11 – паразитологияАвторефератдиссертации на соискание ученой степеникандидата медицинских наукМосква – 2018Работа выполнена в Федеральном государственном автономном образовательномучреждении высшего образования Первом Московском государственном медицинскомуниверситете имени И.М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации(Сеченовский Университет).Научный руководитель:доктор медицинских наук, профессорКоваленко Феликс ПавловичОфициальные оппоненты:Довгалев Анатолий Семенович – доктор медицинских наук, профессор,Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение дополнительногопрофессионального образования «Российская медицинская академия непрерывногопрофессионального образования» Министерства здравоохранения Российской Федерации,кафедра тропических, паразитарных болезней и дезинфекционного дела, заведующийкафедрой.Соколова Татьяна Вениаминовна – доктор медицинских наук, профессор,Медицинский институт непрерывного образования ФГБОУ ВО «Московскийгосударственный университет пищевых производств», кафедра кожных и венерическихболезней с курсом косметологии, профессор кафедрыВедущая организация: Федеральное государственное бюджетное образовательноеучреждение высшего образования «Московский государственный университет имени М.

В.Ломоносова».Защита диссертации состоится «___» _________ 2018 г. на заседаниидиссертационного совета Д.208.040.15 при ФГАОУ ВО Первый Московскийгосударственный медицинский университет им. И.М. Сеченова Минздрава России(Сеченовский Университет), по адресу: 119991, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2.С диссертацией можно ознакомиться в ЦНМБ ФГАОУ ВО Первый Московскийгосударственный медицинский университет им.

И.М. Сеченова Минздрава России(Сеченовский Университет) по адресу: 119034, г. Москва, Зубовский бульвар, д. 37/1 и насайте www.sechenov.ruАвтореферат разослан «_____ » ________ 2018 годаУченый секретарь диссертационного советадоктор медицинских наук2Козовенко Михаил НиконовичОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫАктуальность проблемы. Лейшманиозы – паразитарные, трансмиссивные болезни людейи животных, распространенные в странах с жарким климатом. Их регистрируют в 98 странахмира. Более 350 млн. человек (около 10% населения земного шара) находятся в зоне риска.Более 12 млн. человек уже инфицированы, а ежегодное число новых случаев экспертыоценивают в 1,3-2 млн. [ВОЗ, 2010; 2018]. После распада СССР за пределами РФ осталисьэндемичные по лейшманиозу территории Закавказья и Средней Азии.

Единичные местныеслучаи висцерального лейшманиоза регистрируют на территориях Дагестана и Крыма. Однакопроблема зоонозного кожного лейшманиоза (ЗКЛ) в настоящее время актуальна дляпрактикующих врачей. Это обусловлено миграцией населения РФ в эндемичные полейшманиозу регионы (туристические поездки, служебные командировки, работа по контрактуи др.). В Россию также нередко приезжают люди из стран Ближнего Востока, Азии, Африки иЛатинской Америки, где ЗКЛ регистрируют достаточно часто. Об этом свидетельствуютмногочисленные публикации о выявлении завозных случаев кожного [Тищенко Л.Д и соавт.,2001; Заславский Д.В. и соавт., 2014; Тумольская Н.И.

и соавт., 2014; Бодня Е.И. и соавт., 2014;Рахматов А.Б. и соавт., 2014; Добрев Х.П. и соавт., 2015; Мицура В.М. и соавт., 2016;Тихоновcкая И.В. и соавт., 2016; Исаева М.С., Саидова Т.О., 2016] и висцеральноголейшманиоза [Александрова О.К. и соавт., 2008; Лазарев В.В., 2010; Богадельников И.В, 2014;Баранец М.С. и соавт., 2017; В.Ч. Джалилов, 2017].

В РФ с 1991 по 2014 год зарегистрировано89 случаев лейшманиоза (83 – завозных и 24 стран, 6 – местное заражение на территории РФ)[Понировский Е.Н. и соавт., 2015]. Это свидетельствует об актуальности КЛ для населениянеэндемичных стран, каковой является Россия.У врачей практического здравоохранения возникают серьезные проблемы как вдиагностике [Тумольская Н.И. и соавт., 2014; Бодня Е.И. и соавт., 2014; Исаева М.С., СаидоваТ.О., 2016], так и в выборе метода лечения [Заславский Д.В. и соавт., 2014; Тихоносвская И.В. исоавт., 2016]. ЗКЛ спорадически завозят в Россию из стран Северной Африки (Египет, Тунис),Ближнего Востока (Турция, Израиль, Иордания), СНГ (Азербайджан, Армения, Узбекистан,Таджикистан), Грузии, где основным возбудителем является Leishmania major (L.

major),вызывающим у человек ЗКЛ [McGwire B.S., Satoskar A.R., 2014], что определило выборинфекционного агента.Стандарты лечения ЗКЛ в нашей стране отсутствуют. В национальном руководстве подерматовенерологии (2013) предлагается использовать 12 препаратов, зарегистрированных вГосударственном реестре лекарственных средств (ГРЛС) МЗ РФ. Однако в инструкциях фирмпроизводителей показания для лечения данного дерматоза имеются только у кетоконазола.Хорошо зарекомендовавший себя антибиотик из группы аминогликозидов (мономицин) в3настоящее время в России не производится.

Препарат 5-валентной сурьмы (солюсурьмин),поставлявшийся из Туркмении, в ГЛРС РФ не зарегистрирован. В рекомендациях ВОЗ (2010), вРуководстве по ведению случаев и эпиднадзору за лейшманиозами в Европейском регионе ВОЗ(2018) для лечения ЗКЛ предлагают меглумина антимонат (глюкантим), стибоглюконат натрия(пентастам), милтефозин (импавидо), липосомальный амфотерицин В (амбисом), паромомицин,аминохинол, пентамидин. Из перечисленных препаратов в ГРЛС имеется только амфотерицинВ (не липосомальный), а в инструкции фирмы производителя нет показаний для лечения КЛ.В связи с этим ценными являются публикации авторов, лечивших больных ЗКЛантибиотиками различных фармакологических групп.

Это доксициклин [Masmoudi A. et al.,2008] и цефотаксим (клафоран – цефалоспорин 3 поколения) [Шуйкина Э.Е. и соавт., 2009]. Вто же время данные о доклинических исследованиях данных препаратов в литературеотсутствуют.Учитывая,чтоцефотаксим–импортныйпрепарат(Франция),дляимпортозамещения актуальным является изучение отечественного антибиотика из той жегруппы – цефтриаксона. Универсальным препаратом для лечения лейшманиозов являютсяпрепараты 5-валентной сурьмы.

Поэтому меглумина антимонат может быть использован вкачестве контроля.Исследования зарубежных специалистов, свидетельствуют, что этиологическим факторомзаболевания могут быть не лейшмании, а вирус, находящийся в них (LRV – лейшманиальныйРНК-вирус), обнаруженный в 1988 г. у больного, инфицированного L. guyanensis [Tarr P.I. et al.,1988]. Позднее его обнаружили в L. braziliensis и указали на связь с более тяжелым течениемКЛ [Kariyawasam R. et al., 2017]. Установлена корреляция между наличием вируса и иммуннымответом хозяина. Назначение препаратов сурьмы, разрушающих паразитов, приводит краспространению инфекции [Ives A. et al., 2014]. Это явление можно назвать эндоцитобиозомвируса внутри лейшманий. При заражении хомяков лейшманиями, содержащими LRV, отмеченсильный воспалительный ответ за счет повышения уровня IFN-β и продление выживаемостипаразитов с вирусом [Ives A.

et al., 2014]. Это послужило основанием для изучения вдоклиническом исследовании эффективности комбинированной терапии с включениемпротивовирусного препарата – интерферона альфа-2b человеческого рекомбинантного.Вышеизложенное послужило поводом для сравнения in vitro и in vivo эффективности действия монои комбинированной терапии перечисленных препаратов на возбудителя ЗКЛ (L. major).Цель исследования: изучить in vitro и in vivo на лабораторной модели эффективностьпрепаратов для лечения зоонозного кожного лейшманиоза и дать им сравнительную оценку.Задачи исследования: 1. В эксперименте in vivo дать клиническую характеристикуособенностейтечениязоонозногокожногоиспользованных в качестве лабораторной модели.4лейшманиозаузолотистыххомяков,2.Изучить in vitro специфическую активность доксициклина (Россия), цефотаксима(клафорана, Франция) и цефтриаксона (Россия), применяемых по данным литературы длялечения кожного лейшманиоза, сравнив их эффективность с меглумина антимонатом.3.В эксперименте на лабораторной модели изучитьтоксичность препаратов–доксициклина, цефотаксима, цефтриаксона, меглумина антимоната и интерферона альфа-2bчеловеческого рекомбинантного (реаферона).4.Провести сравнительный анализ эффективности монотерапии антибактериальнымипрепаратами (доксициклином, цефотаксимом, цефтриаксоном), препаратом 5-валентнойсурьмы (меглумина антимонатом) и интерфероном альфа-2b человеческим рекомбинантнымпри лечении экспериментального ЗКЛ у золотистых хомяков.5.Обосновать целесообразность использования интерферона альфа-2b человеческогорекомбинантного (реаферона) в комплексной антилейшманиальной терапии.Научная новизна работы: впервые in vitro проведена сравнительная оценка трехантибиотиков (доксициклина, цефотаксима, цефтриаксона) на промастиготы лейшманий сучетом их минимальных доз, количества протистов в поле зрения и показателя инактивации ихподвижности.

Установлено лидирование доксициклина и цефтриаксона. Минимальные дозыобоих препаратов приводят к абсолютному подавлению подвижности возбудителя. Повышениетерапевтической дозы препаратов не обосновано. Сравнение этих препаратов с меглуминаантимонатом показало их превосходство по всем показателям.Впервые в эксперименте in vivo на золотистых хомяках доказано отсутствиетоксического действия антибиотика доксициклина и иммуномодулятора интерферона альфа-2bчеловеческого рекомбинантного и установлен выраженный токсический эффект препаратов изгруппы цефалоспоринов III поколения – цефотаксима и цефтриаксона.Впервые in vivo доказана высокая специфическая активность антибиотика доксициклинапри экспериментальном ЗКЛ у золотистых хомяков.