Диссертация (Разработка состава и технологии лекарственных форм с экстрактами эвкалипта прутовидного (eucalyptus viminalis labill.) и эхинацеи пурпурной (Echinacea purpurea Moench) для лечения воспалительных заболеваний полости рта), страница 5

Ломоносова и ЗАО «ВИФИТЕХ».Работу проводили по разработанной схеме исследований, представленнойна рисунке 1.Разработка состава и технологиитаблеток для рассасыванияРазработка состава и технологиимукоадгезивного спреяИсследование технологических характеристик разработанныхлекарственных формРазработка методов стандартизации лекарственных формИсследование специфической активности лекарственных формРисунок 1. Схема этапов диссертационного исследования.302.1. Объекты исследования2.1.1.

Лекарственные субстанцииВ качестве активных фармацевтических субстанцийвыбраны:- сухой очищенный экстракт эвкалипта прутовидного(Eucalyptus viminalis Labill)(эвкалимин) (ФС 42-3606-98.Эвкалимин–Eucaliminum). - аморфный порошок отсветло-кремового до кремового цвета с серым оттенком, растворим вхлороформе,95% спирте этиловом (возможно образование легкой мути),практически не растворим в воде, при растирании электризуется;- сухой экстракт из травы эхинацеи пурпурной (Echinacea purpurea L.)(эстифан)(ВФС42 – 2372-94.

Эстифан–Estiphanum) - аморфный порошок отсветло-коричневогосзеленоватымоттенкомдокоричневогосвета,соспецифическим запахом, гигроскопичен, комкуется, практически не растворим вводе, умеренно растворим в 95% спирте (возможно образование легкой мути).2.1.2.

Вспомогательные вещества- натрия стеарил фумарат (4070-80-8, LubriSanaq, Ph.Eur.);.-кремния диоксид коллоидный (aerosol-200 Pharma, Германия);- декстрозы моногидрат (JRS Pharma, GmbH&Co.KG, Германия);- альгинат натрия (Natriumalginatum) (ФСП 42-0372-3392-06) (Россия);- метилцеллюлоза (МЦ-100)Methylcellulose (BenecelA15CPharm, Великобритания),(соответствие USP);-спирт этиловый 96% (ГОСТ 5962-2013);- сахароза (ГОСТ 5833-75);- кислота лимонная (ГОСТ 908-2004);- кальция стеарат(ТУ 2232-002-57149839-07);- микрокристаллическая целлюлоза (ФС 42-2185-93);- тальк (ФС 42-0066-01);31- твин 20 (сорбитонмонолаурат)(OLEON (Бельгия) БН 404030001(соответствуетEP, USP);- твин 80 (полисорбат 80) )(OLEON (Бельгия) НП ОЕ50226Х01 (соответствуетEP);- нипагин– Nipaginum (ФС 42-1460-89);-соевый лецитин (TУ 9146-006-576002012) (ООО «Амурагроцентр»);- вода очищенная (ФС 2.2.0020.15).2.2.

Методы исследования2.2.1. Физические методыТехнологические характеристики исследуемых объектов- прессуемость: навеску порошка 0,5 г прессовали в стандартных условиях вматрицедиаметром 11 мм при давлении 117,6 Мпа; полученные таблеткианализировали по методике ОФС 1.4.2.0011.15 «Прочность таблеток нараздавливание» (ГФ ХIII) на тестере прочности таблеток Erweka TBH 125(Германия) с точностью измерений ± 1Н, а также рассчитывали по формуле:Кп  m / h(1)где:m – масса таблетки, гh – высота таблетки, см;-распадаемость; растворение; средняя масса; отклонение от средней массы;однородность дозирования; ситовой анализ; насыпная масса (насыпнаяплотность); угол естественного откоса; степень сыпучести - определяли постандартным методикам ГФ ХIII [23].Гравиметрия использована для количественной оценки эвкалимина в таблетках.32Размеры(диаметры)частицпорошковрастительныхэкстрактов(эвкалимин и эстифан) определяли, используя световую микроскопию (микроскопMOB-1-16, LOMO с окуляр микрометром (Россия) [47].Электроннаямикроскопияиспользованадляисследованиямикроструктуры порошкообразных компонентов.Методика исследования: образцы сухих экстрактов покрывали слоем (24нм) платины в автоматическом коутере JEO Lauto finecoater JFC – 1600.Исследуемый порошок наносили на металлический диск с помощьюполоски вощенной бумаги.

Во избежание попадания исследуемых частицпорошков в пушку электронного микроскопа, его обдували со всех сторонпотоком воздуха из резиновой груши.ИсследованиепроводиливЦКП(НОЦ)РУДНнасканирующемэлектронном микроскопе JEOLJSM – 6490LV при 30kV, детекторе SEM, размереэлектронного пучка 30, в высоком вакууме.Благодарим канд.фарм.наук Хомик А.С. за помощь и содействие.Реологические методы исследования (проводили на кафедре коллоиднойхимии МГУ им. М.В.

Ломоносова.Благодарим д.х.н., профессора Левачева С.М. за помощь и содействие.Реологические свойства (кривые течения, вязкость) растворов полимерови тонких пленок, сформированных из них, определяли методом ротационнойвискозиметрии.ИзмеренияпроводилинавискозиметреRheoStress1(HAAKE)(Германия)с системой конус-плоскость (конус = 60 мм, α = 2º) в CRрежиме со скоростью сдвига 0,003 – 1000 с-1 при температуре 20˚C, точностьподдержания данного значения температуры составляла 0,5˚C. Толщинаизмерительного зазора составляла для тонкого слоя жидкости(тонкой пленки) 0,050 мм и для характеристики объѐмных реологических свойств - 0,200 мм.33Определение размеров частиц методом фотонной корреляционнойспектроскопииДля оценки распределения размера рассеивающих свет частиц в растворахполимеровиспользовали фотонный анализатор частиц Zetasizer Nano ZS(«Malvern», Великобритания), с диапазоном измерений частиц от 0,6 до 6000 нм,при температуре 20–220С, угол детектирования рассеянного света при этомсоставлял - 173o; в качестве источника света использовали гелий-неоновый лазер сдлинной волны 633 нм.Предварительно раствор полимеров или ПАВ разбавляли до концентрации0,01 – 0,05% для исключения вторичного рассеяния света на фазовых частицах.Затем через кювету пропускали лазерный луч.

Наблюдали интенсивностьрассеивания света частицами во времени в автоматическом режиме.Фотонный анализатор частиц Zetasizer Nano ZS, Malvern внесен в ГосреестрСредств измерения Российской Федерации.Определение адгезии (липкости) растворов полимеров и композиций на ихоснове проводили на анализаторе текстуры Brookfield СТ3 (США) с программнымобеспечением.

Исследуемый образец подвергается действию контролируемых силпри отрыве зонда от тонкого слоя жидкости (пленки), находящейся напредметном столике прибора. Сопротивление материала этим силам измеряется спомощью динамометрического датчика. В режиме сжатия зонд медленноперемещается с предварительно заданной скоростью до достижения пороговогозначения (минимальной толщины слоя жидкости, составлявшей 0,050 мм). Затемзонд под определенной нагрузкой, возвращается в исходное положение, при этомфиксируется совершаемая работа по отрыву зонда от пленки полимерногораствора. Для выполнения анализа испытуемый образец тонким слоем наносилина предметный столик с помощью прибора Coatmaster 510, Erichsen (Германия).Начальная толщина слоя жидкости (пленки) составляла 1,0 мм.

Вдиалоговом окне программногообеспечениязадали параметры образца,34параметры процессов сжатия пленки и отрыва зонда от пленочного покрытия.Полученные результаты измерения заносили в таблицу и проводили ихстатистическую обработку.Анализатор текстуры Brookfield СТ3 внесен в Государственный реестрсредств измерения Российской Федерации.Определение поверхностного натяжения (σ) водных растворов полимеров икомпозиций на их основе проводили методом Вильгельми. Для измеренияиспользовали тензиометр (модель К-9 марки KRUSS) (Германия).

Точностьизмерений составляла 0,1 мДж/м2. Измерение величины поверхностногонатяжения исследуемого раствора проводилине менее трех раз. Средняяотносительная погрешность составляла не более 3% при доверительнойвероятности 0,95. Обработку результатов измерения, построение изотермповерхностного натяжения исследуемых растворов и расчет величин ККМ(критическойконцентрациимицеллообразования)проводилистандартнымметодом [130]. Для оценки распределения размера рассеивающих частиц вмицеллярных растворах использовали тот же фотонный анализатор частицZetasizer Nano ZS фирмы «Malvern» (Великобритания), с тем же диапазоном иусловиями измерений.2.2.2.

Физико-химические методыХроматографические методыПри проведении исследования были использованы стандартные образцы(РСО эвкалимина и цикориевой кислоты), полученные в ФГБНУ ВИЛАР.Выражаем благодарность за помощь и содействие при проведенииисследований руководителю Центра химии и фармацевтической технологии,канд. фарм. наук Сайбель О. Л., ведущему научному сотруднику, канд.

фарм. наукСавиной А. А.35ТСХ использовали (для качественного анализа БАВ) на пластинках«Сорбфил ПТСХ-П-А» размером 10 × 15 см.При проведении эксперимента, в химический стаканчик помещали 0,5 гпрепарата (таблетки предварительно измельчали в ступке), прибавляли2 млхлороформа, перемешивали в течение 1 мин, затем фильтровали (испытуемыйраствор). На стартовую линию хроматографической наносили 20 мкл (0,020 мл)извлечения из препаратов в виде полосы длиной 10 мм и по 5 мкл (0,005 мл)растворов РСО эвкалимина и цикориевой кислоты в виде точек.

Пластинкуподсушивали в течение 5 мин и опускали в вертикальную хроматографическуюкамеру, предварительно насыщенную в течение 40 мин смесью растворителей нбутанол – кислота уксусная - вода в соотношении 40:10:10. После прохожденияфронта растворителей 10 см - пластинку вынимали, высушивали при комнатнойтемпературе и рассматривали в УФ свете при длине волны 365 нм.Растворы РСО цикориевой кислоты и эвкалимина готовили растворением в10 мл спирта 96%около 0,01 г цикориевой кислоты или эвкалимина.ВЭЖХ–использовалидляисследованияфенольногосоставасмесирастительных экстрактов эвкалипта прутовидного (эвкалимин) и эхинацеипурпурной (эстифан) с целью исключения их химического взаимодействия.При проведении исследования - сухие экстракты эвкалимин и эстифан,массой, соответственно, 0,034 г и 0,021 г растворяли в 1 мл 70%-го этанола,фильтровали через фильтр PTFE с размером пор 0,2 µм.Состав и содержание фенольных соединений анализировали в исходныхобразцах и после их смешивания в соотношении 1:1 и выдерживания прикомнатной температуре 0,5 и 24 часа.Использовали колонку XBridge C18 (100 мм, внутренний диаметр 2,1 мм,размер пор 3.5 µм, Waters, Ireland).