Отзыв официального оппонента 2 (Разработка методик хроматомасс-спектрометрического определения наркотических средств, психотропных веществ и лекарственных препаратов в биообъектах)

ФСТЭК РОССИИ Федеральное государственное унитарное предприятие «Научный центр «Сигнал» (ФГУП «НЦ «Сигнал») Большая Оленья ул., д. 8, а/я 457 Москва, 107014 Тел./факс (495) 964-97-01 ОГРН 1 Г07746573670 ННН/КПП 77!8813855/771801001 «»мал 2017 г. № На№ от ОТЗЫВ официального оппонента доктора химических наук, профессора ШАНТРОХИ Александра Викторовича на диссертационную работу КИСЛЯКОВОЙ Яны Юрьевны, выполненную на тему «Разработка методик хроматом асс-спектрометрическо го определения наркотических средств, психотропных веществ и лекарственных препаратов в биообъектах» и представленную на соискание ученой степени кандидата химических наук по специальности 02.00.02 «Аналитическая химия» Разработка методов идентификации и количественного анализа в биологических объектах экзогенных веществ, способных оказывать активное физиологическое воздействие на организм человека, является важной задачей, имеющей научное и прикладное значение.

Особенно остро эта задача стоит в хнмико-токсикологическом контроле. При решении ряда практических задач в качестве объектов исследования часто используются моча„кровь и волосы. В первых двух объектах время нахождения исходного аналита существенно варьирует от часов до дней, Волосы же могут сохранять его в течение недель и. даже месяцев. Данные о содержании аналитов и их метаболитов в волосах получают с газовой применением высокочувствительных методов, например, хроматографии с масс-селективным детектированием ~ГХ-МС) и высокоэффективной жидкостной хроматографии . с тандемным массспектрометрическим детектированием (далее ВЭЖХ-МС/МС).

Данный метод хорошо зарекомендовал себя во многих видах исследования, В то же время для решения практических задач химико-токсикологического анализа необходимо каждый раз решать задачи оптимизации выделения аналита из сложных матриц и последующей пробоподготовки, а также подбора условий проведения анализа. Это обстоятельство побудило автора и его руководителя разработать хроматомасс-спектрометрические методы анализа наркотических, психотропных и лекарственных веществ в объектах биологического происхождения, прежде всего в волосах.

Необходимо отметить, что данная диссертационная работа выполнена в соответствии с плановыми НИР на кафедре физической и коллоидной химии ФГАОУ ВО с<Российский университет дружбы народов». Работа изложена на 147 страницах машинописного текста, включающего 33 таблиц и 58 рисунков. Диссертация состоит из введения, двух глав, выводов и списка цитируемых источников, включающего 146 наименований.

В первой главе приведены результаты анализа литературных, данных, позволившие автору уточнить состояние работ в рассматриваемой области, выявить нерешенные вопросы, а также сформулировать актуальность, цель и задачи диссертационного исследования. Вторая глава содержит перечень аналитической аппаратуры, материалов и реагентов, а также характеристики хроматографических колонок„использованных в работе. Третья глава диссертации посвящена изучению процессов адсорбции экзогенных веществ на волосах. 3 В ходе многоплановых исследований диссертант изучила влияние типа ~«темные» и «светлые») волос на их сорбционные характеристики «кислотность»(плотность кислотных групп), пористость и объем.

Автором получены данные, характеризующие сорбцию изученных веществ, а анализ кинетических кривых позволил установить скоростные характеристики этих процессов. Автором выделены 3 типа центров адсорбции — быстрые, средние и медленные, которые отвечают за различные механизмы процесса. При этом сделаны предположения, что быстрая сорбция обеспечивается физическими процессами, средняя обусловлена взаимодействием с кератином, а медленнаяхемосорбцией меланином.

Научное и практическое значение представляют результаты исследований по определению размера и объема пор волос различных типов. Несомненный научный интерес, представляют результаты аппроксимации адсорбции аналитов на поверхности подложки из меланинового полимера. Соискатель оценила четыре модели: Лэнгмюра, Фрейндлиха, Темкина и Дубинина-радушкевича, При этом показала, что наиболее адекватна модель Фрейндлиха ~сорбция гетерогенными поверхностями с хемосорбцией). Автором изучена также «кислотность» различных типов волос. На основе полученных результатов сделаны также выводы о необходимости разработки методов пробоподготовки.

4-я глава посвящена разработке подходов к анализу волос различных типов. Так, автором определены условия проведения отмывки волос от внешних загрязнений, содержащих различные типы адсорбированных веществ, и оптимизации условия дальнейшей пробоподготовки к инструментальному анализу аналитов, Интересные научные данные получены при исследовании влияния «основности» и температуры на степень извлечения аналитов из волос различных типов. Эти данные позволяют выбрать оптимальные условия проб опод готовки. Полученные экспериментальные данные теперь. можно использовать для расчета энергетических характеристик сорбции и, соответственно, десорбции аналитов. Для повышения выхода аналитов автором . предложена «щелочная обработкав биоматериала.

При этом условия обработки подобраны таким образом, что анализируемые вещества сохраняют свою исходную структуру. Определены пределы детектирования и количественной оценки аналнтов при использовании тандемной масс-спектрометрии Научный и практический интерес представляют также исследования по установлению особенностей сорбции и нахождению оптимальных условий определения новых классов лигандов каннабиноидных рецепторов (СВ1 и СВ2), которые у нас в стране практически не изучены. С использованием современного аналитического оборудования установлены особенности разделения и масс-фрагментирования (ГХ-МС/МС метод) некоторых представителей этих классов веществ (З-нафтоилиндолы, индол-3- карбоксилаты и индазол-З-карбоксамиды).

5-я глава диссертации посвящена разработке методик химикотокснкологического определения аналитов и биожидкостях ~кровь и моча) методом ВЭЖХ-МС/МС. Эти исследования показали возможность существенного расширения областей использования разработанных методов и сокращения времени анализа за счет устранения стадии пробоподготовки. Разработанные методы и здесь показали высокую с еле ктив ность и чувствительность. В заключении обобщены результаты работы по решению актуальной научной задачи и приведены выводы, подтверждаЮщие полноту решения отдельных научных вопросов.

Достоверность полученных результатов и обоснованность научных положений, выводов и рекомендаций подтверждаются; - использованием апробированных и аттестованных методик при проведении исследований и обработки экспериментальных данных; - сопоставимостью расчетных и экспериментальных данных, полученных в ходе проведения лабораторных экспериментов, их воспроизводимостью и согласованностью; - использованием для изучения рассматриваемых явлений и процессов достижений современного аттестованного аналитического инструментария, сходимостью теоретических и экспериментальных данных, согласованностью полученных данных с результатами других авторов, Таким образом, научные положения и практические результаты, приведенные в работе, являются полностью обоснованными, доказаны представленными материалами, Разработанные методики могут быть использованы в ходе криминалистической экспертизы объектов биологического происхождения на современном научно-техническом уровне.

Выводы, представленные в диссертации, вполне корректны и полностью соответствуют основным достигнутым результатам, В качестве замечаний следует отметить следующее: - в работе не приведены данные о дисперсности полученных порошков волос; - хотелось бы увидеть исходные кинетические кривые, характеризующие сорбцию/десорбцию рассмотренных в работе аналитов (стр. 53); -в табл, 4,2.1 (табл. 4.2.1) приведена не «степень» выхода, а выход аналита в отн. ',4 - требуют пояснения фразы «...выдержка в течение 30 минут в растворе метанола или ацетонитрила в ультразвуке„.» (это можно заменить «в условиях ултрозвукового воздейчтвия», а также «...полученную смесь выдерживают в сушильном шкафу при температуре„.» (нужно «...термостатировали/выдерживали при температуре...»), Эти замечания не снижают общего положительного впечатления от работы, являющейся глубоким и вполне законченным исследованием, обобщающим научные достижения автора в области инструментального анализа физиологически активных веществ.

В автореферате соискателем корректно изложены основные идеи и выводы диссертации, показаны вклад автора в проведенное исследование, степень новизны и практическая значимость результатов исследований, что соответствует основному содержанию работы. Материалы диссертации Кисляковой Я,Ю. неоднократно представлялись на научных конференциях и опубликованы в научной печати, что отражено в диссертационной работе, Диссертация хорошо оформлена и проиллюстрирована многочисленными рисунками, схемами и таблицами. Диссертация Кисляковой Яны Юрьевны является научно- квалификационной работой, в которой предложены методики определения наркотических средств, психотропных веществ и лекарственных препаратов в биообъектах, что позволяет производить исследования в области химико- токсикологического анализа и судебно-химические экспертизы.