Отзыв ведущей организации (Разработка методик хроматомасс-спектрометрического определения наркотических средств, психотропных веществ и лекарственных препаратов в биообъектах)

«УТВЕРЖДАЮ» Первый проректор-проректор по инновационной политике и международной деятельности Федерального государственного автономного образовательного учреждения высшего образования Первый Московский госу уни Ми Рос (Се д.м ОТЗЫВ ВЕДУЩЕЙ ОР на диссертационную работу Кис «Разработка методик хроматомасс-спе наркотических средств, психотропных веществ п лекарственных препаратов в бпообъектах»„представленную на соискание ученой степени кандидата химических наук по специальности 02.00,02 — Аналитическая Диссертационная работа Кисляковой Я.Ю. посвящена разработки комплекса методик хроматомасс-спектрометрического анализа наркотических средств, психотропных веществ, лекарственных препаратов и их метаболнтов в объектах биологического происхождения. Химикотоксикологический анализ цельных волос разделен на исследование внешней поверхности и внутренней области.

Изучены и экспериментально разработаны подходы к пробоподготовке волос к инструментальному анализу хроматом асс-спектрометрическими методами. Предложена универсальная процедура деконтаминации при подготовке волос к химикотоксикологическому анализу. Установлено влияние изменения параметров щелочного гидролиза и жидкость-жидкостной экстракции на степени извлечения наркотических средств, психотропных, сильнодействующих веществ и лекарственных препаратов) из матрицы волос. Впервые проведен анализ внешней поверхности волос на наличие синтетических каннабиноидов различных классов. Экспериментально определены критерии дифференциации употребления морфина и кодеина по результатам химикотоксикологического анализа мочи. Разработка вы с окочувствительных экспрессных способов анализа наркотических средств, психотропных веществ и лекарственных препаратов в биообъектах, является актуальной и практически значимой задачей.

Диссертация изложена лаконично, на 237 стр. машинописного текста, включает большой объем экспериментальных исследований, которые интерпретированы в 58 рис,, 38 таблицах. Работа построена традиционно, выделен в первую главу обзор литературы, который достаточно полным образом описывает состояние дел в данной области химического анализа.

Библиографический список содержит 146 источников. Относительно небольшой объем цитируемой литературы, тем не менее четко описывает проблематику проведенного исследования„ при этом демонстрируя весьма ограниченный объем ранее опубликованных работ по данной тематике, что позволяет судить о целесообразности и необходимости проведенных автором исследований, направленных на ликвидацию серьезных пробелов в методологии хром атомасс-сиектрометрич еского анализа биологических объектов для определения наркотических средств, психотропных веществ, лекарственных препаратов и их метаболитов, а также о корректности выводов и обобщений, согласованности с известными и ранее полученными данными.

Подробное описание условий экспериментов и расчетов позволяет сделать заключение о высокой достоверности результатов. Концепция решения поставленных задач и достижения цели работы верная, характеризуется научной новизной. Значительное место в работе занимает подбор условий извлечения наркотических средств, психотропных веществ и лекарственных препаратов из матрицы волос. В частности, определены условия проведения щелочного гидролиза, поз воляющето разрушать структуру данного биообъекта, и выбран органический растворитель для наиболее полного одновременного извлечения всех анализируемых веществ из гидролизата волос. Оптимизированы условия инструментального анализа целевых соединений, использование которых позволяет повысить селективность и чувствительность детектирования за счет снижения «химического шума». Разработаны и валидированы методики анализа наркотических средств (морфин, кодеин, «природные» н «синтетические» каннабиноиды)„психотропных 1амфетамин, метамфетамин, МДА, МДМА, МДЕА, МДПВ, РСР), сильнодействующих 1фентанил, стрихнин) веществ и лекарственных препаратов 1карбамазепин, амитриптилин) в волосах методами хроматомасс-спектрометрии.

Результаты работы широко апробированы в рамках многочисленных всероссийских и международных конференций, актуальность и практическая значимость работ подтверждается использованием разработанных методик при проведении судебных химико-токсикологических экспертиз. Основные результаты работы опубликованы в 6 статьях в журналах, соответствующих критериям ВАК для публикации результатов исследований при защите диссертационных работ, Во введении обоснована актуальность работы, сформулирована ее цель и задачи, необходимые для ее достижения. В первой главе «Литературный обзор» изложены особенности изучаемых биологических объектов и анализируемых в них веществ, а также представлены основные этапы подготовки и инструментального анализа данных биообъектов.

Во второй главе представлены условия проведения исследований: аппаратура, материалы и реагенты, использованные в работе. Результаты собственных исследований представлены в главах 3-5. В первой результативной главе 1глава 3), представлены результаты исследований адсорбции (1-пентил-1Н-и идол-3-ил)-(4-этилнафталин-1- ил)метанона на поверхности измельченньгх волос, моделирующей процесс попадания экзогенных соединений в их структуру из кровотока. Полученные результаты доказывают образование химических связей данных соединений с компонентами волос, Из чего следует, что для извлечения веществ из волос требуется проведение специальной пробоподготовки, которая позволила бы разрушать химические связи адсорбат-адсорбент для проведения десорбции экзогенных ФАВ из структуры данного биообъекта.

Следующая 4-я глава посвящена разработке методов извлечения целевых веществ из матрицы волос, оптимизация инструментальных ХМС методов идентификации целевых веществ и проведение валидации разработанных методик анализа наркотических средств, психотропных, сильнодействующих веществ и лекарственных препаратов в волосах. В частности, определены условия щелочного гидролиза и жидкость- жидкостной экстракции, позволяющие одновременно извлекать анализируемые соединения из матрицы данного биообъекта с достаточно высокими степенями извлечения. В связи с тем, что анализ волос информативен только в случае многократного употребления ФАВ, альтернативными 6 но объектами, позволяющими обнаружить экзогенные вещества в организме человека, являются моча и кровь. Поэтому пятая глава посвящена разработкам высокочувствительных методик анализа целевых веществ в биожидкостях.

Предложен подход к определению морфина и кодеина в моче методом ВЭЖХ-МС/МС и на основании анализа более 200 проб предложены критерии дифференциации употребления лекарственных препаратов, содержащих кодеин, и прием наркотического средства морфин. Все разработанные методики прошли тщательную апробацию, результаты которой тщательно описаны в главах 4-5. Продемонстрированы аналитические преимущества предложенных подходов, показана возможность их применения в химическом анализе.

Отмечу тщательное изучение и оптимизацию факторов, влияющих на степени извлечения анализируемых веществ из биологических матриц ~волос, мочи и крови) и чувствительность определения исследуемых веществ, широкую приборную базу, использованную в работе, и тщательный анализ метрологических характеристик, для предложенных методик. Объем экспериментальных данных, полученных и этом исследовании, значителен. Полученные результаты имеют практическую значимость, могут быть использованы в химико-токсикологических лабораториях, экспертных и научных учреждениях, работающих в области обнаружения наркотических средств, психотропных веществ и их метаболитов в биообъектахМосковском, Санкт-Петербургском, Владимирском, Воронежском, Казанском, Краснодарском, Самарском, Саратовском и др.

госуниверситетах, Институте геохимии и аналитической химии им. В.И. Вернадского РАН, Институте Элементорганических Соединений им. А.Н. Несмеянова РАН, Медицинских Университетах, Российском Центре Судебно-Медицинской Экспертизы, ГБУЗ города Москвы «Бюро судебно-медицинской экспертизы Департамента здравоохранения города Москвы» и др.

Они представляют интерес для специалистов, работающих в области анализа объектов биологического происхождения, работников клинических, пищевых, экологических и исследовательских лабораторий, а также других учебных, научных и производственных учреждений. К работе имеется ряд пожеланий, замечаний и вопросов: 1. В работе автор не упоминает о попытках создания собственных библиотек или баз данных масс-спектров исследованных соединений, в том числе тех, которые не описаны ранее в литературе.

Существует ли целесообразность в создании таких библиотек для автоматизации процедуры анализа? Известно„что для приборов ГХ-МС/МС и ВЭЖХ-МС/МС разных типов и разных фирм наблюдаются некоторые различия в масс- спектрах для одних и тех же соединений. Насколько сильно такие различия (особенности) проявлялись для исследованных в работе веществ? Ставил ли автор в своей работе задачу разработать методики 3. скринингового поиска заранее неизвестных наркотических средств и психотропных веществ в волосах? Указанные замечания и вопросы не снижают общей высокой оценки работы, в которой достигнуто и обосновано интересное и практически важное аналитическое решение.

Полный анализ диссертационной работы, автореферата соискателя, сопоставление их достоинств и недостатков, полученных новых знаний, практических рекомендаций, степени новизны позволяют сделать следующие Заключение: Диссертационная работа «Разрабогка методик хроматомасс- спектрометрического определенна наркотических средств, пснхотроиных веществ н лекарственных препаратов в бнообъектах», представляет завершенную научно-квалификационную работу, которая соответствует требованиям и.

9 «Положения о присуждении ученых выводы: 1. Обсуждение результатов и выводы согласуются с поставленными задачами и целью. 2. Содержание автореферата соответствует и отражает содержание диссертационной работы. 3. Материалы опубликованы в открытой печати в необходимом объеме. 4. Выводы, сформулированные в работе, логичны и следуют из представленных данных. 5. Диссертация Кисляковой Я.Ю. представляет собой законченную научноисследовательскую работу, выполненную на современном уровне с привлечением современных методов, формирует новое направление исследований. б. Содержание диссертации соответствует квалификационным требованиям паспорта работ по специальности 02.00.02 — Аналитическая химия. Отзыв составлен доктором химических наук главным научным сотрудником лаборатории фарм ако кинетики и метаболомного анализа института фармации и трансляционной медицины ФГАОУ ВО Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М.

Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский университет) Савчуком Сергеем Александровичем. Огзыв заслушан и одобрен на заседании лаборатории фармакокинегики и метаболомного анализа института фармации и трансляционной медицины ФГАОУ ВО Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М.