Заключение организации, где выполнялась работа (Разработка методик хроматомасс-спектрометрического определения наркотических средств, психотропных веществ и лекарственных препаратов в биообъектах)

УТВЕРЖДАЮ Проректор по научной работе ФГАОУ ВО «Росс народов» баев 016 ЗАКЛЮЧЕНИЕ Федерального государственного автономного образовательного учреждения высшего образования «Российский университет дружбы народов» по диссертации Кисляковой Яны Юрьевны на соискание ученой степени кандидата химических наук по специальностям 02.00.02 — «Аналитическая химия» Диссертация «Разработка методик хром атом асс-спектром етрического определения наркотических средств, психотропных веществ и лекарственных препаратов в биообьектах» выполнена на кафедре физической и коллоидной химии Федерального государственного автономного образовательного учреждения высшего образования «Российский университет дружбы народов».

В период подготовки диссертации соискатель Кислякова Яна Юрьевна являлась заочным аспирантом кафедры физической и коллоидной химии РУДН. В 2010 г Кислякова Я.Ю. окончила магистратуру РУДН по направлению «Химия» успешно защитив диссертацию «Исследование каталитической активности углеродных систем, содержащих наночаспщы М, Сп, Ре в реакции крекинга пропана» на соискание степени магистра по направлению подготовки 020100.б8 «Химия», специализация «Фундаментальная и прикладная химия». Справка о сдаче кандидатских экзаменов № 141 выдана соискателю в 03 июня 2015 г ФГАОУ ВО «Российский университет дружбы народов».

Научный руководитель — Шешко Татьяна Федоровна, кандидат химических наук, доцент кафедры физической и коллоидной химии РУДН. На заседании кафедры физической и коллоидной химии присутствовали: д.х.н., проф., зав. каф. ФХ Серов Ю.М., д.х.н., проф. Боженко К.В., д.х.н., проф. 1 Ягодовский В.Д., д.х.н., проф. Михаленко И.И., к.х.н., доц. Пылинина А.И„ к.х.н.,доц.Братчикова И.Г., к.х.н.,доц.Шешко Т.Ф., к.х.н., доц.

Исаева Н.Ю., ст. преп. Маркова Е.Б. Слушали: 1. Доклад Кисляковой Я.Ю. по кандидатской диссертации <сРазработка методик хром атом асс-спектром етрического определения наркотических средств, психотропных веществ и лекарственных препаратов в биообъектах». 2. Сообщение научного руководителя кандидата химических наук, доцента Шешко Т.Ф., давшей характеристику соискателя. В ходе обсуждения диссертационной работы Кисляковой Я.Ю.

были заданы следующие вопросы: Вопрос 1: д.х.н., проф. Ягодовский В.Д. Экспериментальные данные по адсорбции 3%Н-210 на образцах волос удовлетворяют модели Фрейндлиха при условии пересечения изотерм, полученных при разных температурах. Проводилось ли такое подтверждение соответствия адсорбции 3%Н-210 на образцах волос модели Фрейндлиха? Ответ: К сожалению такого подтверждения не проводилось, но мы обязательно проведем дополнительные эксперименты при разных температурах. Вопрос 2: к.х.н., доц. Пылинина А.И. Проводили измерение площади поверхности измельченных образцов волос? Есть ли корреляция с данными по адсорбции? Ответ: Площадь поверхности измельченных образцов волос проводили по адсорбции азота в автоматическом режиме.

Площадь поверхности измельченных темных волос составляет 1,13 м /г, а светлых — 2,47 м~/г. Полученные результаты хорошо коррелируют с данными по быстрой адсорбции 3%Н-210 на волосах. Вопрос 3: д.х.н., проф. Серов Ю.М. С какой целью проводили эксперименты по адсорбции на образцах измельченных волос? Ответ: Адсорбцию проводили с целью установить тип взаимодействия экзогенных соединений с матрицей волос и на основании этого выбрать наиболее оптимальный способ пробоподготовки волос к хроматомасс-спектрометрическому анализу. Вопрос 4: д.х.н., проф. Серов Ю.М. На графике температурного градиента для газового хроматографа у вас имеются плато, зачем они были введены? Ответ: На графике имеется пять плато.

Первое плато предназначено для обеспечения адсорбционного взаимодействия веществ с фазой колонки. На втором плато происходит смывание с хром атографической колонки органических 2 растворителей. Некоторые из анализируемых веществ имеют близкие температуры выхода с колонки, что затрудняет их разделение. Так температуры выхода с колонки стимуляторов амфетаминового ряда близки (-160-200'С), то с целью их надежного разделения было введено дополнительное плато продолжительностью 4 мин при температуре 180'С. МДПВ, морфин 2ТФА, метадон, РСР и карбамазепин имеют температуры выхода с колонки — 2б0'С, поэтому при этой температуре также было введено плато продолжительностью 0,5 мин.

Последнее плато (320'С вЂ” б мин) используется для удаления с хроматографической колонки труднолетучих компонентов матрицы волос, а также для разделения веШеств, выходящих при данной температуре. Вопрос 5: д.х.н., проф. Михаленко И.И. Степени извлечения некоторых соединений из волос не превьппают 50;4. Чем вы это объясняете? Ответ: Некоторые анализируемые соединения, к сожалению, могут разрушаться в условиях шелочного гидролиза. Однако использование высокочувствительных ХМС методов позволяет проводить анализ данных соединений в очень низких концентрациях.

Вопрос 6: д.х.н., проф. Боженко К.В. Поясните, пожалуйста, как вы проводили валидацию разработанных методик. Ответ: Валидацию разработанных методик проводили с использованием модельных образцов биообъектов в три этапа: 1. Определение предела детектирования и предела количественной оценки. 2. Определение линейного участка калибровочной кривой, 3. Определение повторяемости с учетом погрешности прибора и проб оподготовки. Модельные образцы готовили путем добавления к бланковым образцам био объектов растворы аналитических стандартов анализируемых соединений.

Концентрация стандартного раствора аналита зависела от применяемого инструментального метода исследования. Научный руководитель соискателя к.х.н. доцент Шешко Т.Ф. в своем сообщении дала положительную характеристику Кисляковой Я.Ю. При обсуждении с оценкой представленной работы выступили: Серов Ю.М., Ягодовский В.Д., Пылинина А.И. Все выступавшие дали положительную оценку представленной диссертационной работе. По итогам обсуждения принято следующее заключение: Актуальность работы.

Одной из важнейших задач химико-токсикологического анализа (ХТА) и судебной медицины является обнаружение в биологических объектах экзогенных веществ, способных оказывать физиологически-активное воздействие на организм человека (далее ФАВ). Такими веществами являются наркотические средства, психотропные и сильнодействующие вещества, лекарственные препараты и яды.

Объекты исследования, представляющие наибольший интерес, — моча, кровь и волосы. Анализ мочи и крови позволяет определить даже однократное употребление человеком ФАВ, но в этом случае необходимо проводить определение как исходных соединений, так и их метаболитов. В некоторых же случаях ФАВ может полностью метаболизировать в организме человека. Поиск метаболитов зачастую затруднен ввиду отсутствия аналитических стандартов и образцов сравнения данных соединений. Одной из наименее охваченных областей в ХТА волос является определение способа проникновения и удерживание экзогенных веществ в их структуре, что затрудняет определение условий пробоподготовки волос к инструментальному анализу.

Основной проблемой обнаружения ФАВ в биообъектах является их низкое содержание, что требует применения высокочувствительных методов исследования. Одним из таких методов является хроматомасс-спектрометрия (ХМС). Разработка и внедрение методик химической идентификации наркотических средств, психотропных веществ и лекарственных препаратов в биообъектах очень важны для работы химико-токсикологических лабораторий, судебной медицины и в рамках проведения криминалистических экспертиз. Научная новизна В ходе выполнения диссертационной работы по разработке методик хроматомасс-спектром етрического определения наркотических средств, психотропных веществ и лекарственных препаратов в биообъектах были достигнуты следующие результаты: ° Впервые исследована адсорбция представителя синтетических каннабиноидов класса нафтоилиндолы на темных и светлых образцах волос.

На основании экспериментальных данных по адсорбции 5%Н-210 подобраны и предложены к внедрению условия извлечения целевых аналитов из матрицы волос. ° Впервые проанализированы данные по методам деконтаминации волос, на основании которых предложены четыре методики отмывки внешней поверхности волос. ° Предложена универсальная процедура деконтаминации при подготовке волос к химико-токсикологическому анализу.

Установлено влияние изменения параметров щелочного гидролиза и жидкость-жидкостной экстракции на степени извлечения наркотических средств (морфин, кодеин, «природные» и «сннтетические» каннабиноиды), психотропных (амфератмин, метамфетамин, МДА, МДМА, МДЕА, МДПВ, РСР), сильнодействующих (фентанил, стрихнин) веществ и лекарственных препаратов (карбамазепин, амитриптилин) из матрицы волос. ° Впервые проведен анализ внешней поверхности волос на наличие синтетических каннабиноидов различных классов. Определены условия хроматографического разделения и детектирования каннабиноидов классов 3- нафтоилиндолы, индол-3-карбоксилаты и индазол-3-карбоксамиды методом ГХМС/МС. Предложены органические растворители, позволяющие избежать процессы метилирования целевых аналитов в инжекторе прибора. ° Предложены подходы к экспрессному высокоэффективному извлечению органических соединений из биологических жидкостей (моча, кровь).

Экспериментально определены критерии дифференциации употребления морфина и кодеина по результатам химико-токсикологического анализа мочи. Практическая значимость Разработан и апробирован комплект методик анализа наркотических средств, психотропных веществ и лекарственных препаратов в биообъектах методами ГХМС, ГХ-МС/МС, ВЭЖХ-МС/МС. Разработанные в ходе данной работы методики успешно применяются в практике Института криминалистики ЦСТ ФСБ России (Акт внедрения). Личное участие соискателя в получении результатов Непосредственно соискателем были подобраны условия пробоподготовки и условия анализа наркотических средств, психотропных веществ и лекарственных препаратов в биообъектах.