vvedenie & 1 (Профилактические и оздоровительные мероприятия против лейкоза крупного рогатого скота)

ВВЕДЕНИЕ

Улучшение обеспечения потребности населения продуктами питания и, в первую очередь, мясо-молочными продуктами является актуальной проблемой животноводства. Выполнение этих решений предполагает дальнейшее увеличение поголовья скота и на основе использования временных достижений науки повысить продуктивность животных.

Одной из актуальных задач ветеринарной науки является решение проблемы лейкоза крупного рогатого скота ( В.М. Нахмансон 1968, И.Н. Никитин, И.С. Докукин 1976, В.К. Паракин, 1979; Г.Р. Розенбергер,1979; Р.Ф. Галеев 1981; А.П. Кузнецова, В.П. Смирнов 1998). Широкое распространение лейкоза наносит значительный экономический ущерб. Падеж и вынужденная выбраковка животных, утилизация туш и органов при убое, нарушение воспроизводительной функции больных коров, а также ограничения, связанные с реализацией продукции в неблагополучных хозяйствах - все это приводит к потерям, которые особенно ощутимы в племенном животноводстве (Л.Г. Бурба и др. 1975; Т.П. Кудрявцева 1990; А.Т. Борзяк, В.С. Ковалющко, П.И. Киричук 1990, И.Н. Петров 1998).

Существенный вклад в изучение вопросов эпизоотологии, этиологии, патогенеза, патоморфологии, биохимии и роли наследственных факторов в развитии лейкоза крупного рогатого скота внесли отечественные и зарубежные исследователи ( Т.П. Кудрявцева 1967; Г.Ф. Коромыслов 1977; А.Ф. Валихов, В.М. Нахмансон, Л.Г. Бурба 1982; Н.И. Королев 1983; К.Н. Кондрахина 1985; А. Симонян 1995; П.Н. Смирнов 1998; И.П. Петров 1998; Р.Ф. Галеев 1999; N.Belev and A.Tolle 1964; O.C. Straub 1978). Установлено, что продукты, полученные от больных лейкозом животных – молоко и мясо – содержат вредные метаболиты триптофана и других циклических аминокислот и, следовательно, являются экологически опасными для человека ( П.П. Смирнов, А.Г. Левашов, А.Г. Незавитин и др. 1991; И.П. Петров 1998; П.П. Смирнов 1999).

Поэтому целенаправленная борьба с лейкозом крупного рогатого скота в нашей стране и Республике Башкортостан в частности является большой социальной задачей.

В первую очередь для достижения этой цели необходимо проводить широкомасштабные серологические, гематологические исследования животных всех категорий хозяйств с целью выявления больных. В настоящее время предложены и применяются в ветеринарной практике профилактические мероприятия против данного заболевания.

Заметный прогресс научных исследований в изучении вирусной этиологии лейкозов крупного рогатого скота, который наметился после обнаружения в культурах лимфоцитов крови больных лейкозом коров онковируса типа С. Многие исследователи считают его этиологическим агентом и называют бычьим лейкозным вирусом или ретровирусом лейкоза крупного рогатого скота (J. Miller et al. 1969).

Лейкоз крупного рогатого скота – хроническая инфекционная болезнь опухолевой природы, основной признак которой – злокачественное разрастание клеток кроветворных органов с нарушением их созревания, в результате чего происходит диффузная инфильтрация органов (В.М. Нахмансон 1977; А.А. Васильченко 1984; П.Н. Смирнов 1989; Г.А. Симонян 1988).

Возбудитель болезни – РНК-содержащий вирус, экзогенного происхождения, который классифицирован как вирус лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС).

Наличие вируса лейкоза является обязательным, хотя и не единственным этиологическим фактором в развитии лейкозного (опухолевого) процесса. Для реализации его лейкозогенных потенций необходимы генетическая предрасположенность и иммунологическая недостаточность инфицированного вирусом лейкоза организма животных (В.П. Шишков 1986).

С признанием вирусной природы этого заболевания и накоплением научных знаний о путях передачи ВЛКРС и патогенеза лейкоза крупного рогатого скота стало возможным для практики подготовить научно-обоснованные рекомендации по борьбе с этим заболеванием. Логическим завершением данного этапа работы явились: "Инструкции о мероприятиях по борьбе с лейкозом крупного рогатого скота" от 9 августа 1989, утвержденные Главным управлением ветеринарии СССР, правила по профилактике и борьбе с лейкозом крупного рогат ого скота от 23.02.99 г. и 11.05.99 г. министерства сельского хозяйства РФ.

Несмотря на значительное количество работ по этому вопросу следует уточнить региональные особенности проявления лейкоза, а в частности в республике Башкортостан.

Целью настоящей дипломной работы является проведение комплексного диагностического исследования, изучение распространения заболевания по Гафурийскому району Республики Башкортостан и разработать рекомендации для проведения профилактических работ с целью предотвращения распространения лейкоза среди молочного скота колхоза "Юлдуз".

В соответствии с постановленной целью были определены следующие задачи:

1. С помощью серологических, клинико-гематологических, патоморфологических методов диагностики изучить распространение лейкоза среди крупного рогатого скота разного возраста и породы.

2. Гематологически, гистологически изучить и провести сопоставление показателей морфологии крови и органов животных неблагополучного хозяйства.

3. Провести сравнительное изучение результатов серологического, клинико-гематологического, патоморфологического методов исследования при лейкозе у крупного рогатого скота разных пород и возрастных групп.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Особенности лейкоза крупного рогатого скота и современные методы его диагностики.

Понятие о лейкозе (лейкемии) как самостоятельной нозологической единицы внес в 1845 г. Р. Вирхов. Он наблюдал у людей увеличение селезенки, лимфатических узлов и содержание в крови большого количества лейкоцитов. Он рассматривал лейкемию как болезнь, проявляющуюся в лимфатической (с поражением лимфатических узлов), селезеночной и смешанных формах. В дальнейшем лейкоз определили как болезнь опухолевой природы ( Н.Д. Юдина 1940; Я. Энгельберт-Холм 1942; М.О. Раушенбах 1956; А.Г. Бурба 1983; П.В. Филатов, А.А. Кунаков 1986; Г.А. Симонян, В.М. Нахмонсон 1986; В.К. Паракин, Л.Р. Силкина 1981; Р.А. Кунайн 1982; D.A. Abt, R.R., J. Marshak Ferrer et al 1976; T. Agstier, R. Mamoun , B. Guillemain et al 1978; L.E. Baumgartener, J. Crowleg, S. Entine et al. 1978; L. Jerabek, P. Gupta, J.F. Ferrer 1978; W.T.R. Grimshaw, A. Wiseman, L. Petril et al. 1980; T. Honma et al. 1980; M.P. Bansal, K.P. Singh 1981).

Лейкозы, как злокачественные болезни, поражающие кроветворную ткань и проявляющиеся опухолевым ростом, объединены в нозологическую единицу злокачественных новообразований – гемобластозы. (А.А. Васильченко 1984; Г.Ф. Коромыслов, В.М. Нахмансон 1977; У. Джаррет, Л.Макки 1975). Некоторые из них ( лимфо-, ретикулосаркома, лимфогранулематоз) имеют аналогию с истинными опухолями, другие – лейкозы (лимфолейкоз, пиелолейкоз, гемоцитобластоз и недифференцированный лейкоз) характеризуются некоторым своеобразием (Г.А. Алексеев 1950; А. Горбатов 1988; Ю.И. Лорис 1971; Н.Н. Петров 1947; Г.А. Симонян 1965).

Вирус бычьего лейкоза, он получил название "вирус лейкоза крупного рогатого скота" (ВЛКРС) . Это экзогенный онковирус типа С относится к семейству Retroviridae, который состоит из четырех негликолизированных белков (Р10, Р12, Р15, Р24) , они состовляют сердцевину вириона, причем белок Р14 присутствует в наибольшем количестве. ( Р.А. Кукейн 1979; В.А. Крикун, В.Т. Куликов 1979; А.Ф. Валихов, Л.А. Макарова 1984; Э.С. Плотников 1978; L. Takastima, C. Olson 1980; L.V. Patrascis et al 1980). Вирус лейкоза чувствителен к температурным воздействиям, гибнет при нагревании до 56°С в течение 15 минут, а также он погибает при повторных замораживаниях и оттаиваниях. В естественных условиях крупный рогатый скот заражается горизонтальным путем ( В.П. Шишков 1988; П.Н. Смирнов 1998; O.C. Staub 1978;E.P. Cielmann, A. Borky, R. Kettmann 1984). Как сообщает В.П. Шишков (1988), у инфицированных животных появляется гуморальный ответ на структурные белки вируса, с персистентным лимфоцитозом. В крови увеличивается количество циркулирующих В-лимфоцитов, которые составляют 40-80% от общей популяции лимфоцитов, а у здровых они составляют 15-20% ( З.Р. Вилюмсон, О.К. Приедниекс 1978; Y. Hinuma 1984).

Локализация вируса ВЛКРС обнаруживается в клетках молозива и молока естественно клетки могут передовать вирусный геном потомству во время размножения клеток (В.А.Квачев 1997; И.Ангелов, И.Генов, В. зараженных животных. Инфицированные животные через лимфоидные Цуцуманский 1986; С.Хрусталев 1986; М.Батишева 1987; Р.Ф. Галеев, А.Ф. Валихов 1981; В.М. Нахмансон 1971; О.Ч. Парчинский 1979; D.Mans, D.Wiegand 1986).

На сегодняшний день диагноз лейкоз крупного рогатого скота рекомендуется ставить на основании комплексных лабораторных исследований: серологических, гематологических, патологоанатомических, гистологических и клинических.

По данным В.А. Бусол, Н.Н. Доронина, Г.Х. Субаева (1976); В.М. Нахмансона (1988); Г.А. Симонян (1988); П.Н. Смирнова (1989); Jhshima Kanichie et al. (1984) известно, что все формы лейкоза характеризуются увеличением в различной степени лимфоузлов. При лимфолейкозе они увеличены равномерно, не сращены с окружающими тканями, капсула снимается легко, на разрезе узлы серо-белого цвета, сочные и саловидные.

Лимфоузлы при лимфогранулематозе, лимфосаркоме и гистиоцетарной саркоме бугристые, капсула сращена с паренхимой, на разрезе обнаруживают кровоизлияния и некрозы, в органах брюшной, тазовой полостей на серозных оболочках отмечают опухолевые разрастания узлов в виде конгломератов серо-белого, желто-серого цвета, фолликулы плохо различимы, а на отдельных участках отсутствуют; ткань рыхлой консистенции с кровоизлияниями. При лимфоретикулосаркоме селезенка не увеличена. При всех формах лейкоза отмечают очаговые или диффузные разрастания серо-белого или серо-розового цвета в печени, почках, толще сердечной мышцы, органах пищеварения, матке, скелетных мышцах, диафрагме.

Ранняя и точная диагностика лейкоза является основой всех профилактических и оздоровительных противолейкозных мероприятий (В.А. Бусол, Н.Н. Доронин, Г.Х. Субаев 1976, В.П. Шишков, Л.Г. Бурба, В.М. Нахмансон 1988, Б.М. Беляров, К.М. Васильева, А.Н. Горелов, П.Б. Должанов, Н.С. Романов, Т.Г. Филатова, В.И. Чележин, В.Н. Шарлай 1990; Ю.С. Пристужалов, В.И. Околелов, Г.И. Максимов 1996; L. Deshayes et al. 1977). Особенно большое значение имеет при первичном установлении неблагополучие стада по лейкозу, так как от этого зависит результативность последующих оздоровительных мероприятий (Г.И. Максимов, В.И. Околелов, Ю.С. Пристужалов 1996). Основу диагностики лейкоза крупного рогатого скота составляет серологический метод исследования (РИД), который предложили M.Onuma (1975); M.Miller (1976). Из числа положительно реагирующих на РИД животных (инфицированных ВЛКРС) с помощью гематологического, клинического методов выявляют больных лейкозом.

При первичной постановке диагноза в хозяйствах, фермах, стадах проводят диагностический убой больных животных с последующим патологоанатомическим и гистологическим исследованием.

1.2. Иммунологическая диагностика лейкоза.

Одним из важных моментов в диагностике лейкоза крупного рогатого скота является выявление инфицированных животных с помощью разных серологических методов (РИД, РСК, МФА, РИА, ИФА, ELISA) Постоянным и характерным признаком инфицированности животных является наличие антител к антигену ВЛКРС (А.Ф.Валихов 1976; Р.А. Кукайн, В.Г. Куликов 1979; П.Н. Смирнов и др. 1998; L.E. Baumgartener, J.Crowley, S. Entine et al 1981; M.Mammerickx, D. Portelle, A. Burny 1981 ). Среди них РИД (реакция иммунной диффузии) отличается достаточно высокой чувствительностью и специфичностью, простотой и легкостью постановки (А.Т. Бордяк, В.С. Ковалюшко, В.А. Гротевич, П.И. Киричук 1980). Стандартный диагностический набор, выпускаемый биопромышленностью, делает эту реакцию весьма удобной для проведения массовых исследований в любой диагностической лаборатории. В настоящее время у нас в стране и в большинстве зарубежных государств РИД принята в качестве основного серологического теста для диагностики лейкоза ( П.Н. петров 1998; П.Н. Смирнов 1998; Deshayes L. et al 1977; J.M. Miller, M.J. van der Maaten 1976; J. Bortolozzi, H. Hines 1985). Вместе с тем на завершающем этапе оздоровления желательно было бы использовать и более чувствительные реакции – такие как ИФА, ПЦР (П.Н. Петров, В.Н. Сюрин, В.П. Шишков 1988). Серологический же метод, отмечают Л.Г. Бурба, В.М. Нахмансон, В.П. Шишков (1988); А.П. Кузнецов, Е.А. Маринин (1997); Н.И. Петров (1997), специфичен и выявляет животных на всех стадиях инфекционного процесса, вызванного ВЛКРС, а также позволяет проводить мероприятия, напрвленные на ликвидацию инфекции. Основан этот метод на обнаружении в сыворотке крови антител против гликопротеидного антигена вируса лейкоза. Время с момента внедрения вируса до образования антител к ВЛКРС, определяемых в реакции иммунодиффузии (РИД), составляет 1-1,5 месяца (Г.А. Симонян, Ф.Ф. Хисамутдинов 1995). Результаты серологических исследований позволяют выявить некоторые возрастные особенности (В.М. Нахмансон 1986). Как отмечают Л.Г. Бурба, В.П. Шишков (1988); А.П. Кузнецов, Е.А. Маринин (1995); Н.И. Петров и др. (1997), уровень инфицированности у молодняка 6-24 месяцев, а также количество носителей антител в ВЛКРС гораздо ниже по сравнению с более старшими возрастными группами животных. По данным Н.И. Петрова (1997), известно, что весной серо-негативный бык-производитель в пастбищный период заражается вирусом лейкоза от серо-позитивных коров может стать источником инфекции через 3 месяца. Поэтому осенью количество инфицированных быков-производителей увеличивается. Как сообщают М.Д. Тихонов (1987); Л.Г. Бурба, В.П. Шишков (1988); М.И. Гулюкин, В.М. Нахмансон, Е.А. Рун (1997); J.M.Miller, M.J. van der Maaten (1976); R. Chatterjee et al (1985) лейкоз по серологическим исследованиям установлен среди разных пород крупного рогатого скота. Так, уровень инфицированности черно-пестрой и красной породы (бурая латвийская, красная эстонская, красная литовская, красная степная, красная датская) выше, чем среди пород шведского происхождения (бурая карпатская, костромская, лебединская, бурая кавказская). На течение лейкоза и уровень инфицированности большую роль играет сезонность. Так по данным А.П. Кузнецова, Е.А. Маринина (1995) известно, что интенсивность перезаражения у коров выше зимой, нежели летом.

1.3. Выявление больных коров гематологическим методом.

По данным многих отечественных и зарубежных авторов ( П.Н. Смирнов 1998; Г.А. Симонян, А.Т. Абрамян 1990; В.М. Нахмансон, Г.С. Петровский 1975; Gotzer et al 1954; H Bendixen 1963; D. Ruliti et al 1977) больные лейкозом – это инфицированные вирусом лейкоза с переходом у животного процесса в гематологическую или клиническую стадию лейкозного (злокачественного, т.е. опухолевого) процесса. Серо-позитивных животных с двухлетнего возраста следует (согласно инструкции по лейкозу от 9 августа 1989 г.) исследовать гематологически. Как сообщают Г.А. Симонян, Ф.Ф. Хисамутдинов (1995); Ковалюшка В.С.(1987); Н.И. Петров (1997); А.Т. Тотарчук И.М. Донник, С.В. Малков (1998), эта стадия лейкозного процесса характеризуется более постоянными изменениями количественного и качественного состава периферической крови в виде абсолютного лимфоцитоза и наличием единичных малодифференцированных клеток.

Гематологические исследования способствовали более углубленному изучению патологических процессов в организме при гемобластозах (М.Р. Бриллиант, А.И. Воробьева 1976; Т.Л. Кудрявцева, П.Н. Смирнова 1985). Лейкозы включают в себя лимфоидный, миелоидный, недифференцированный, неклассифицированный (гемоцитобластоз) лейкоз, злокачественный гистиоцитоз (Г.А. Симонян 1995; J.Bousser et J.P. Bernhamon 1962; K.Mieth, W.S. Wittmann 1971). Длительное , бессимптомное течение лейкоза у крупного рогатого скота и многочисленное поражение животных происходит в гематологической стадии (В.М. Нахмансон 1986). Изменения в периферической крови отражают почти все патологические процессы, протекающие в организме явно и скрыто. Морфологическое исследование крови играет большую роль при заболеваниях кроветворной системы (М.Г. Абрамов 1985; Б.Б. Ермолаев 1968; W.Verter 1971; E.Weinhold, O.C.Straub 1968). Сущность ее заключается в оценке двух показателей белой крови (количество лейкоцитов в 1 мкл крови и процент лимфоцитов в лейкограмме). Сравнительно значимые изменения в показателях белой крови наблюдают в связи с возрастом животных, что находит отражение в "лейкозном ключе". По нему серо позитивно реагирующих животных подразделяют на здоровых, подозрительных и больных, (В.П. Смирнов 1990; Г.А. Симонян 1995). Лимфолейкоз характеризуется острой и хронической формой течения (Б.Б. Ермолаев 1967;Г.А. Симонян 1995). По мере прогрессирования лейкозного процесса наблюдают чередование алейкемического, сублейкемического, лейкемического составов крови. Сублейкемический уровень лейкоцитоза (лимфоцитоза) характерен для начальной стадии болезни, тогда как лейкемический показатель характеризуется быстрым, прогрессивным развитием процесса с наступлением конечной стадии лейкоза (М.Г. Абрамов 1985; Г.А. Симонян 1995). При лимфолейкозе важное диагностическое значение имеет качественный состав лимфоидных элементов крови. В начале болезни клеточные элементы представлены в основном зрелыми лимфоцитами всех трех величин (малые, средние, большие) ( Румянцев Н.В. 1967; Нахмансон В.М., Петровский Г.С., Зинкевич Л.А. 1975; Л.Г. Абрамян, А.Т. Джумалиев, Г.А. Симонян 1990; O.W. Schalm 1965). Могут появляться ридеровские, двухъядерные формы лимфоцитов (1-1,5 %), пролимфоциты, лимфообласти 1,5 %.

Возможно выделение и других клеток – теней Боткина-Гумпрехта, с рыхлым хроматином в ядре и цитоплазме, легко разрушающихся в связи с пониженной их устойчивостью к воздействию внешней среды. Часто их выявляют при высоком лейкоцитозе и при преобладании молодых клеток (пролимфоцитов, лимфобластов). Следовательно, морфологические исследования крови важны и с помощью их можно диагностировать больных лейкозом животных.