Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.3 (Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - 2001), страница 6

Таг8ет ргосеша сап аошетипеа Ъе аерагате6 гуош йе сатпег аее)пепсеа Ьу епхуша6с с!еача8е. ТЬ1а гет)штеа р1апп!п8 Ьесаиае йе тпаюп ртоге!п пшат Ъе бея8пе6 ю 1Ьас Ь сопса!па а арес!Вс ргогео1утк Ыеача8е яге аг гЬе )о!пс Ьетннееп гЬе гаг8ет ае1)пепсеа апс! тЬе сатпег ртотеш. ТЬта ргоЫеш Ьаа Ьееп 8геа1)у атис!юга!ее! Ъу йе т1ече1оршепс ог" сопппегс!а11у ана!1аЫе чесСота сопташш8 а ро!ус!ошп8 яте доннпвтгеап1 тготп ГЬе ае1!иепсеа со61п8 1ог тЬе сагпет ртотеш апд а рготео1утк с1еача8е яте. Рот ехапгр1е, !и тЬе РМАЕ2 таш11у от честогя 1Ье сот)!п8 ае1!пепсе ог" !птетеаг га 1паед тп-1тагпе то йе 3' епт! О1 а ауптЬетк ает!пепсе епсо6!п8 йе уош-апипо-асЫ гесо8пбюп яте тот Растит Ха (!1е-Аар/С1п-С1у-Ат8) ()н!а8а1 ап11 ТЬОВегаоп 1984; Ь)ашЬ)аг ет а!. 1987).

1Уратгеатп от'тЬта аес)иепсе га а ае8шепт ог" Еу!!А епсойп8 тЬе Е соВ Ма!Е рготе!п. Растит Ха с1еачеа 1Ье рерти1е Ьопс1 тЬаг 1а сагЪоху-тегпппа1 то тЬе аг81п!пе геясЬле !и тЬе гесо8пгбоп атТе (аее Р18пге 15-2). Ву сагетп11у сЬоояп8 йе геатпстюп ятеа тЬат чн)11 Ъе пает! то !паетт ГЬе Саг8ет ает!пепсеа што йе нес!от, Ь 1а роя)Ые то аггап8е йас гену, 11 апу, тоге18п апппо аснЬ теша1п аяасЬе6 то тЬе апппо гегш)ппа ог тЬе гаг8ет рготе1п аттег с1еача8е.

Яш1!аг атгате81еа сап Ье иаед нн1тЬ 1папу от йе ойег епхуша6с с1еана8е ауагеша 1гяед ш ТаЫе 15-3. А1йопВЬ гЬ1а шегЬО6 от рпт)гу!п8 тЬе ает)пепсеа ог гЬе ргосеш ог штегеаг гуош йе гияоп ртотеш 1оо!са Вгеат оп рарег, Ь чтит!са с!еап!у оп1у -50оуо ог" тЬе тпие. ЪйтЬ шаиу епхушея йе егтк!епсу ог'йе рготео1утк с!еача8е геасбоп та роот пп1ея 1Ье гпяоп рготе!п Ьаа Ъееп 11епатпге11 чн)тЬ 6 М Впаи!61пе ЬудгосЫотЫе от 8 !и! пгеа ог аттег а "арасег" Ьаа Ъееп шаегсе6 оп опе ог ЬогЬ ЕЫеа ог" гЬе с1еана8е яте.

1п огЬег сааея Ьесаиае тЬе арес)ВЕ)ту от' йе ргогеаае 1а пот аЪао!ше от Ьесапае гЬе епхупуе паед гог с1еача8е 1а сопташ!па!ее! Ъу ойег ргогеааея йе ргогегп ог шгегеат )а с!еаче6 шгегпа!!у ат атее йат аге ге!атей го тЬе гесо8пгтюп яте ()н)а8а) ап6 ТЬО8егаоп 1984, 1987; !Зу)сеа е1 а1. 1988; 1.аиптхеп ет а!. 1991). РгоЫеша о1 ГЬ)а Гуре сап еоше6тиея Ьпт пот аЬчауя Ье ао1че6 Ьу сЬап81п8 ргогеааеа ог Ьу иа!и8 честога !е.8., йоае сот!1п8 !Ог 81пгатЫопе гедпстаае ог тЬ)огебох!п гияопь) йас турка!!у ехргеаа тороп рготеша !и а ю1иЫе готш гайег ГЬап гп ап !пс1па!Оп Ьобу.

15.2) Отортег 15: Г хргезяоп оу" С!о!тес( Сепез т ЕасЬепсЬса со1! Весаиае Еетч йгесс сотирапаоп5 оЕ сЬе ейк(епсу оГ йеачапе оЕ Зрес(усе ргосетп5 Ьу с((ЕЕегепс ргосеаае5 Ьаче Ъееи риЫ(5Ьет), сс га иироаяЫе со гесоиипеис1 опе Зуасеш очег аиосЬег сч(ЕЬ сопЕсг!епсе. Носчечег, ш опе сошрагаНче Зсис(у, сЬе ТЕЧ (соЬассо ессЬ Ыги5) ргосеа5е тча5 Еаг июге еЕВссеис ас с1еач(ип В)исасЬюпе-5-сгаиЗЕегаае- апт! ша1соае-Ъшйип ргосе(п Еияои5 йап Рассог Ха. ТЕЧ ргоСеаае а15о Ьаа аг!чаптаое5 очег ойег ргоСеаае5: С1еачапе аС сгуртк яСе5 оссиг5 гаге1у (Е ас а11; СЬе епгутпе 15 Е01!у асбче )и йе ргеаеисе оЕ соиипои (пЬ)Ь(сог5 оЕ ргосеаае5 апс1 счог!45 ат !отч Сешрегатиге5 (4-30'С) (Ро!ауеа ет а!.

1994). Р)па))у, ЕЬе ТЕЧ рготеаае 15 Ьае1Е ачас!аЫе (Егош ЫЕе ТесЬио)оВ(е5) а5 а Еияоп ргосе(п саггу(ип а ро!уЬ(5114)(пе сап. ТЬГ5 Зиир1тйе5 гегиоча1 оЕ йе ргосеаае аЕ(ег с!еачаде оЕ ЕЬе Еияоп ргосеш. ТЬе сЬеииса! аис! епгушаНс геассюп5 йас Ьаче Ьееп пает! со асЫече Зрес!Есс с!еачаде оЕрерсЫе Ъоиг!5 !и Епяоп ргосе!и5 аге ЗЬотчп ш ТаЫе 15-3. ТАВЕЕ 35-3 61еачапе о( Рияоп Рготеспа 5еоиенсе Ат МегнОР ог СсеАчАсе Ссеачиое 5пе МАме Ое ЧестОа(5) Веееаенсе5 СЬеппса1 Суаио8еп ЬготЫе аис( 709а Гогпис асЫ -Мес2 !саьига ес а!.

(!97705гоьа ес а!. (1986) -Атр,~рго- Ы!1ааои ес а1. (1983Ь); 5го(са ес а1. (! 986); Воисе!)е ет а1. (1990) Рогпис асЫ (7096) аис( Ьеас Нуг(гогу(аш(пе ат РН 9 -АЗП46(уаиг1 Ьеас Мо144 ес а1. (1987Ь); РогтЪег8 ес а1. ( ! 990); Сапоча- Рачи ес а1. (1992); Ес(а()1 ес а1. (1992); К!п8 ес а1.

(!992) -Тгрг Ру1сет ет а1. (1988); Кпои ет а!. (1988); Ч!1!а еС а1. (1988) !ос(отоЬепго!с асЫ 2-(2-пигорЬспу1)-3- шесЬу1-3-Ьгогпо!Пт(о1е- пшс !и 50ага асеИс асЫ (ВЫР5-41сато!е) Епаугпаис А1а-64 юЬИ1сяи' -6!у-А1а-Н!яАг84 -Аг8 1 апс( 1.уь-Аг82 -Рго-Ча!26!у-Рго- РогтЬег8 ес а!. (1991, 1992) Вепиеи ес а1. (1984) С!ояпраси СП11а8еиате 6егпппо апс( ВатИа (1984); Ьее апи П!псЬ ( 1984); Нтгао)са ет а!. ( !99 1); СЬсиегу ес а!. (! 993) Ру1сеа ес а1. (1988); Норр ет а!.

(!988); 5и ес а1. (!992); Чап НееЬе ос а1.(1993) -Атр-Атр-Атр-Атр-!.ут2 -11е-61и (ог Аар)-6!у-Аг88 ЕисегоЫиате РМа1-с2 (сусоьо!Ы) РМа1-р2 (рог!Р1аяи!с) р6ЕХЗХ (РЬаппас!а) Ыа8а! апс1 ТЬв8егюп (1984, 1987); Ьаиистеп ес а1. (1991); ОЬазЫ ес а1. (199!) Рассог Ха -Рго-РЬе-Н(Е-Ееий.еи- НаВеу ес 41. (1987) ЕегИп а-ТЬготЫпа Тгурттп -Ьеи-Ча)-Рго-Аг8261у-5ег- -Агф. ог -1.ув2 Оеапи8 ес а!. (1989) 5Ь!Пе ет а1. (1980); О'Нага ет а1. (1990Ь ЪЧаи8 ет а1. (!989) РСЕХ2Т (РЬаппас!а) РРВОЕХ-! (ЬсТе ТесЬПП!о8!еь) РагЬь ес а1.

(1994Ь Ро!аует ес а1. (1994) -6(и-Ати-Ееи-Туг-РЬе- 6(П26(у- ТЕЧ рготеатег (соЬассо ессЬ Ыгы рготеате) 'А!ш64 гиЬГВ!яи и а ясеиигассе8 шисаис аГ гиЬстпяп !и гчясЬ сЬе гаса!Г ис Нь-64 и гар1ашо Ьу а!аисаг (Н64А). ТЬе шисапс еитугае и гагу граНйс Гаг гаЬгсгасгг саисашса8 а Ьяигиис (Сагсаг аао туг!!ь 1987). "ТЬа арсаиага г!шчаае ясгт Гаг аопгогаЬш ага (С ) Р4-РЗ-Рга-Аг8-РС'-Р22 ггЬегс РЗ аигт Р4 ага ЬуогарЬа)6с ашстга асят аиг( РС ' тагт Р2' ага ааааа!8!с аш!Па асяс аид (2) Р2 Ага Рт ', ггЬага Р2 аг Р! ' и 61у (СЬаи8 !985). 'ТЬг О!а, Туг 6!и, аао и!у гагяиат ага ге9шгао Саг с!шча84 (Саггти8саи аио Раи8Ьапу С 988; Раи8Ьаиу ас а!. ! 988; РаиВЬагсу аиг( Рагя ! 989).

Епггол)исг!ои 15.9 РЕАЕ1ЧС ЮЛТН ПЧБОШВЕЕ РВОТЕ!х!Б Очегехргевв!оп оЕ Еоге|8п рго|ен|в Его|п с1опес! Пепев !п Ье|его1о8оив Ьовгя висЬ ав Е со!П оугеп 1еабв со йе Еогшаг!оп оЕ |пво!иЫе |п|гасеПи1аг а88ге8асев оЕ |Ье ехргеввед рго|е|п (Ч'ППашв е| а1. 1982; 5сЬопег е| а!. 1985; Еог геч!елчв, р1еаве вее Магв|оп 1986; Капе ап|1 Наг|1еу !988; МпгаЕП ап|1 К|п8 !989; 5сЬеш 1989, 1991; Магв|оп ап|! Наг|1еу 1990; Сеог8!ои ап|1 Ча1ах !996). ТЬеве во-саПес) !пс!ияоп ЪосПев аге геасИу !во!а!ел) Ьу 1очг-вреес! сепспуи8а|юп апл! ивиаПу сопяв| оЕ а1пюв| риге ассге6опв оЕ л)епагигес! Еогшв оЕ |Ье Еоге!8п ргосе!и.!пс1ияоп ЪосПев арреаг ав апюгрЬоив Пгапи!ев !п е1ес|гоп шкго8гарЬв апс) ав Ъг!8Ьг геЕгас|Пе рагбс1ев !п сеПв ехаш!пес! ил|с!ег РЬаве-соп|гав| П!шпша6оп.

Хо виггоипсПп8 п|егпЬгапев аге ч!в!Ые. МогрЬо1о8!саПу япи1аг в|гис|игев аге оЪвегчес) ш Ъас|епа |Ьас Ьаче !псогрогагед апипо ас!6 апа!о8в !п|о |Ье|г рго|е!пв (Ргоигу апс) Со1ЙЪег8 1972; Ргои|у ес а!. !975) ог аге ехргевв!л|8 Ь!8Ь 1ече!в оЕ епс)о8епоив 8епев (Мага|оп !986; 5сЬе!и 1989). ЪЪе|Ьег а Еоге!8п рго|еш ехргевве|1 |о Ь!8Ь !ече1в |и Е соП геп|а!пв во1иЫе ог лчП! ассипш1асе !п !пс1ияоп ЬосПев !в ипрге6!ссаЫе. "С1оЪа1" ргорегбев оЕ рго|е!пв я|сЬ ав в!хе, очегаП Ьус)горЬоЪ|с!гу, апс! сЬаг8е аге роог рго8пов|к !п6!салогв. ТЬе л)|лагегпагу ягис|иге оЕ|Ье па|иге ргосеш !в а1во ап ипгеПаЫе 8и!|)е япсе Ьой пюпогпепс рго|ешв апс) виЬиппв !гож оП8ошепс рго|е|пв сап геасП1у Еопп шс1ияоп Ьо|Пев. ТЬе ачаПаЪ)е еч!с!епсе ви88евгв йа| шс! ияоп ЬосПев аг)ве Ъу йе |парргорпа|е а88ге8аг!оп оЕ рагбаПу Ео!дес) ог гпа1Ео!|)е|1 ро1урерг!с)ев, га|Ьег |Ьап ав а сопвес)иепсе оЕ йе !пво1иЬлП|у ог !пв|аЪ|1иу оЕ йе па6че рго|еш (МПгаЕП апс! К|п8 1989; 5сЬе|п !989; !аепк1|е 1991; СЬгипу1| ес а1.

!993). ТЬия Еогшаг!оп оЕ |пс1ияоп ЬосПев |в !!) епЬапсед лчЬеп ши|ап| Пепев епсосПп8 |Ьеппо1аЬПе Ео1еПп8 !п|еппесПа|ев аге ехргеввед !п Е. со!ю' !Нааве-Ре|бп8еП ап6 К!п8 !988) апс! Е2) рагбаПу ялрргевве6 ччЬеп Е со!|' Ргобис!п8!аг8е срлап66ев оЕ Еоге|8п рго|е|пв |в Пели ас )олч |еп|рега|иге (!лп е| а1. 1987; 5сЬе|п апл! ХогеЬогп 1988; Рап е| а1. ! 991; РегЬувЬ!ге е| а!. 1993). 5ечега) Пгоирв Ьаче овес) я|екПгес|е|1 ши|а8епеяв !п ап а||ешр| |о !с!епг!Еу ге8!опв, с!оспа!пв, ог шов!Ев йа| аге личо!че6 |п !пс1ияоп Ьос!у Еогша6оп Ьу раг6си!аг рго|ешв !Ччегхе1 е| а). 1991; СЬгипу)с е| а1.

1993). Ми|абопв аЕЕесг!п8 йе Еогшабоп оЕ шс1ияоп ЪосПев п|ар !п аП агеав оЕ йе ргосешв ап6 аге !оип|1 !п а Ье1кев, !п Ьой |1упаписаПу ап|1 в|а6саПу с!!вогс)егел! ге8!опв, |п вггапс)в оЕ )3 вЬее|в, ап|1 |и 1оорв апс! |игпв. Ргогп йеве гевиПя и веешв |Па| по яп8!е в|гис|ига1 пюПЕ !в гевропяЫе Еог |Ье ассипш!а6оп оЕ Ео1дш8 !пгегше6!алев ап6 йе|г а88ге8а|юп ш|о шс1ияоп Ъос)!ев. Но|чечег, !п опе саве — |Ье ро1у|пегаве с)оша!и оЕ йе К!епоъч Ега8шепг — ргоЫеп|в оЕ во! иЬ|16у лчеге воЫе6 Ъу глчо вггаге8!ев: (!) гееп8!пеег!п8 |Ье рго|е!и во ав со гегпоче Ьо|Ь а во1чепг-ехровес! ЬуйорЬоЬ~с ра|сЬ апд а ро|епбаПу ипяплс|иге|1 ге8!оп а| 6|е апипо гегш!пив оЕйе рго|е|п (13егЬувЬ!ге е| а1.