Егоров - Основы учения об антибиотиках - 1986 (947288), страница 64
Текст из файла (страница 64)
Если в среде с бардой сульфат аммония и нитрат калия угнетают биосинтез новобиоцина, то в синтетическихсредах эти вещества, являясь единственными источниками азота, обеспечивают достаточно высокий выход антибиотика (табл. 72). 7'аблиид 72 образование новобионина на фоне различных источников азота, добавленных к среде с бврдой (по 51п115, 1956) Источник амма Источник ванга и нбо ы1й амкед иоввбкоцина, мкг1мл Наибольшей вывод новобноцниа. мкг7мл концентрация. гда концентр- ацияя.
гсл добавленной н основной среде дсбаиленнмй к основной среде 7,5 10,0 10,0 К1чОв 11ЧНа1 3О Мясной екстракт Соевый белок 225 100 395 145 Без дополнительных добавок Барда Дрожма 380 475 270 20,0 12,0 Изучение влияния различных источников азота на рост актиномицета и образование новобиоцина было проведено на фоне синтетической среды (табл. 73). гических реакций (сыпь на коже, зуд). В отдельных случаях при цовториом применении антибиотика появляются тошнота, боли в области желудка. Все вышеотмеченные свойства новобиоцина способствуют успешному использованию его в медицннсцой практике.
Антибиотик применяется при лечении заболеваний, вызываемых формами микробов, устойчивыми к другим антибиотикам. Так, новобиоцин успешно применяется при лечении различных форм пневмонии, знтероколитов, флегмон, ангин, раненых инфекций и других заболеваний. Таблица 78 Влнвнне раъвнмнык а»то»нанон иота на рост Змерналрсм арвегойма н образование новобнакнна (по Егорову н Упаковой, !962) Ма»с»нала- »а» бас- »асса. г!1св мл н б в »асма а3ннб нагана (маг/м»1 »алас»санс, аарнанг Они»а 1,6 1,9 !.6 2,2 1,3 1,9 1,2 1,4 228 176 255 284 188 !08 264 125 115 Аммоннй лнмоннокнслый Глдролнзат казвина Хнлролнзат кгаенна Казана . 7келвтнн .Белок сон Зелик сон Понтон Йентон 1,00 0,75 1.25 1,00 1,00 0,50 1,00 0,50 1,ОО Данные, приведенные в табл.
73, показывают, что на фоне синтетической среды 51г. зр!!его!с(ез может использовать для роста, 'развития н образования антибиотика разнообразные источники азота. Лучшими из испытанных источников азота были гидролизат казеина (1,25%) и белок соевой муки (1,0%). Хорошим источником азота следует признать н аммоний лимоннокислый.
51г. :зрйегоЫез с успехом использует также нитратную форму азота. При внесении в синтетическую среду с крахмалом (47в) в качестве единственного источника азота некоторых аминокислот, найример глицина (1!7з), аспарагина (0,57в), глутамииовой кислоты 0,5%), аргинина (1Ъ), образование антибиотика доходит до 70— мкг/мл. По ходу развитая актнномицета на синтетической среде, уже !начиная с 48 ч роста, в субстрате обнаруживаются свободные ами:нокислоты: алании, глутаминовая кислота, аспарагиновая кислота, ,метионии, валин, триптофан, фенилаланин, лейцин, изолейцин. Пролин в свободном виде не обнаруживается.
Изучение влияния на биосинтез новобиоппна ряда аминокислот дозволило установить, что только пролнн способствует увеличению выхода антибиотика почти в два раза и прн этом происходит сти'мулирование синтеза биологически активных форм новобиоцина. 'Так, в отсутствие пролина биологически активная форма составляет 69''1з от общего выхода антибиотика, а в присутствии 0,2% пролива — 971зр. Добавка фенилаланина тнрозина в количестве 0,2$ приводит к снижению образования новобиоцина.
Триптофаи и гнстиднн особенно снижают синтез новобиоцина при внесении их в 72-часовую культуру, т. е. в момент перехода культуры к образованию новобиоцина. Источники углерода. Продуцент новобиоцина для роста и биосинтеза антибиотика может использовать различные источники углерода: глюкозу, крахмал, мальтозу, органические кислоты. Хороший выход антибиотика наблюдается на средах, содержащих в качестве источников углерода глюкозу или крахмал. В зависимости от характера источника углерода в среде 57г.
зрйегой)ез образует ие только различные количества антибиотика, ио и разные варианты его 1табл. 74). тМЬнио 74 Действие углерода на обраэование равяичнмв вариантов новобиоцина' 1по Ное1гяегпа„згп1 1Ь, 19611 Ксяценгряцяя, гГл Новобноцн», мкг/мл Углевцдм дескврбв- мнлнаво- бяоцвн юанояо- бвацяк 70 94 95 75 1055 575 750 1040 3 3 20 Глюкоэа . Мвлв тола Крэяиэл . ' Углеводы дабввлялксь к среде с бврдаа ИО г/л) Приведенные в табл. 74 данные показывают, что при использовании в качестве источника углерода мальтозы 95оь обшей антибиотической активности составляет новобиоцин, но наряду с этим происходит образование небольшого количества изоиовобиоцина н дескарбамилновобиоцина.
Два последних варианта антибиотика образуются в болыиом количестве при наличии в среде глюкозы или крахмала. В развитии Иг. зрлегоЫез на среде, содержащей в качестве единственного источника углерода глюкозу, образования неактивных форм новобиоцина не наблюдается. При частичной или полной замене глюкозы гидролом к концу процесса развития актиномицета обнаруживаются неактивные формы. Вместе с тем показано, что при использовании глюкозы в качестве единственного источника углерода биосинтез антибиотика снижается почти в два раза по сравнению с тем, что имеет место на среде с глюкозой вместе с гндролом. Установлено, что на среде с бардой йочти все испытанные органические кислоты стимулируют биосинтез антибиотика.
Однако иные результаты получаются при добавлении органических кислот к синтетической среде, содержащей крахмал и лнмоннокислый аммоний. В этих условиях лишь молочная, янтарная и яблочная кислоты стимулируют выход антибиотика, а присутствие фумаровой кислоты даже снижает образование новобиоцина. Использование в опытах более активного штамма 57г. зрйего1- с)ез (№ 35) позволило установить, что концентрация натрия лимоннокислого 0,3',Ээ является наилучшей в условиях проведенных опытов, оиа обеспечивает хорошее развитие актиномицета и нако- 'пление антибиотика (более 500 мгк/мл). Причем при этой концент'рации образуется 90О)з биологически активного вещества, в то время как при других концентрациях лимоннокислого натрия биоло'гически активное соединение составляет 75 — 80% от общего количества (табл.
75). Таблица 75 Влияние различных концентраций лмионнокислого катран на рост актиномнцета н образоаание ноеобноцниа (через 168 ч) (но Егорону и Упмкгщой, 1964) При замене лимонной кислоты солями уксусной, молочной, пировиноградной и янтарной кислот наблюдается снижение накопле'ния биомассы и образования новобиоцина (табл. 76). Таблица 7б Влияние органических кислот на биосинтез нонобноцина через 168 ч (по Егорояу н Уннковой, 1964) Н бнощм, гГ оорелеленнма Оргвнипесквя нжлотв, добавленная в сроку 1натрнеаме солн) Бномвсса. мгте спмгтрофотометриеесннм МЕ1ОЛОМ МПМРОбионо" гиееснкм мсгоаом Среды с солями фумаровой и яблочной кислот обеспечивают хорошее развитие культуры актиномицета и высокий уровень вы- Вез добавки .Уксусная Молочная л)нроннногрздная Яитлрт1ан Фунароезя Илочная Лимонная 8,30 8,20 8,25 8,30 8.
50 8,30 270 748 696 604 674 1058 1124 Р358 23 З)8 312 226 402 367 391 502 ЗО 458 385 303 533 658 577 555 Биологически активна а фор ма 1от общего кОли моева внтнбиотнквк % 73 6? 81 74 75 56 67 90 Габлица 77 Влннние различных намиентраинй неорганического источнива фосфора на развитие Ягсрсосндссз зрлсгогс«се и образование новобиоиина (по Уиановой н Егорову, 1966» Нлличесгио ноеооио нине черен 120 ч. мнггмл Слдериоснве ки,ра в среде.
«0 Еномлссл черен «20 ч, г/«00 мл источник «тлероил в санте«нчесиоа среде Однако эти же концентрации фосфата на синтетической среде с глюкозой дают иной эффект: 0,02 и 0,05% КН«Р04 не обеспечн- 296 хода антибиотика, однако при этом активная форма новобиоцина составляет 56 — 67% от общего количества образовавшегося антибиотика.
Изменение концентрации нитрата натрия (»«»а»«»02), являющегася единственным источником азота в среде, а также источника углерода позволяет существенно изменить процесс биосинтеза,осуществляемый актинамицетом. Так, при содержании в среде 0,3% »д»а»д»00 и 5% глюкозы актииомнцет синтезирует всего 61% активного антнбиотика; если же соотношение источников азота и углерода изменить и взять соотнетствеиио 0,6 и 4%, то количество биологически активного препарата составит 86%. При замене глюкозы на мальтозу (5%) выход биологически активного вещества доходит да 93%. Изучая влияние некоторых жиров на рост актиномицета н образование антибиотика, мы показали, что через 24 ч после добавки жира к среде раззнтие актиномицета и рост организма остаются примерно на там же уровне, что и на среде без жира (за исключением подсалнечнога масла).
При добавлении 0,4% жира не наблюдается увеличения выхода антибиотика. Кукурузное масло (0,2%) и, подсолнечное масло (0,5%» резко тормозят биосинтез новобиоцииа. хотя в присутствии подсолнечного масла наблюдается усиление роста актиномицета. Влияние фосфора. Известно„что фосфор существенно влияет на рост организмов и образование ими антибиотических веществ.
Изучение влияния различных концентраций неорганического источника фосфора на рост актиномицета и образование новобиоцина показало, что концентрации фосфата калия, равные 0,02, 0,05, 0,10 и 1,0%, на среде с крахмалом практически не влияют нарост актиномицета н биосинтез антибиотика (табл. 77). Специфические стимуляторы биосинтеза новобиоцина Продукты разложения новобиоцина (4-гидрокси-3-(3-метил-2- бутенил)-бензойная кислота, 0,05 мг/мл; новобиоцнновая кислота, 0,05 мг1мл и п-аминосалнцнловая кислота) на синтетической среде с глюкозой (30 г/л), 1.-пролином (10 г1л) и минеральными солямн стимулируют биосинтез иовобиоцина.
Другие компоненты молеку'лы новобиоцина таким действием не обладают. На сложных натуральных средах, содержащих, например, барду илп другие компоненты неопределенного состава, стимуляции образования новобиоцина вышеназванными веществами не наблюдается. Учитывая, что в молекулу новобиоцина входят аминогндрокси'кумарин и произвсщное бензойной кислоты, нами в качестве воз'можных стимуляторов образования новобиацина были изучены следующие соединения: кумарин„дикумарин и ряд производных сали- сооп ! г по †' сп ! !! псхь .сн с ! н он ои н ! ! ! ! с с~~ "сг ~~си нс,, с!! с=о о=с с ~~'и ! н он ! ! с и~~ с ~оси !! ! нс~~ с с=о с.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
