92597 (680797), страница 3
Текст из файла (страница 3)
При стандартизації вагінальних супозиторіїв з Протефлазідом вивчали показники якості та незмінність цих показників у процесі зберігання згідно з вимогами ДФ України: опис, однорідність маси, однорідність вмісту, ідентифікація, кількісне визначення, розпадання, розчинення, мікробіологічна чистота. Всі показники відповідають вимогам ДФУ, встановленим для вагінальних супозиторіїв (табл.3).
За допомогою періодичного контролю (з інтервалом у 6 місяців) встановлено незмінність показників якості вагінальних супозиторіїв з Протефлазідом протягом двох років зберігання.
Таблиця3
Фізико-хімічні показники супозиторіїв з Протефлазідом
| Показники якості | Вимоги АНД | Результати дослідження |
| 1 | 2 | 3 |
| Опис | Вагінальні супозиторії кульковидної форми світло-зеленого кольору без запаху | Вагінальні супози-торії кульковидної форми світло-зелено-го кольору без запаху |
| Середня маса | Від 3,8 до 4,2 | 3,96±0,05 |
| Однорідність маси | ±5% від середньої маси вагінаьного супозиторія, тільки 2 вагінальних супозиторії з 20 можуть вийти за ці межі, але не перевищувати ±10% | Відповідає вимогам ДФУ |
| Однорідність вмісту | Вміст діючих речовин у кожному з 10 вагінальних супозиторіїв повинен бути від 85,0% до 115 %, від вказаного в розділі "Склад на один супозиторій", а відносне стандартне відхилення не повинне перевищувати 6,0%. Вміст діючих речовин у кожному з 30 вагінальних супозиторіїв повинен бути від 75, 0 до 115 %, від вказаного у розділі "Склад на один супозиторій", і тільки в одному з 30 супозиторіїв вміст кожної з діючих речовин може перевищувати ± 15 % від вказаного в розділі "Склад на один су позиторій", але не більше ± 25 %, а відносне стандартне відхилення для 30 супозиторіїв не повинне перевищувати 7,8 % | Відповідає вимогам ДФУ |
| Розпадання | Не більше 60 хвилин | Відповідає вимогам ДФУ |
| Розчинення | Не менше 75% діючої речовини і не більше 115% за 45 хв | Відповідає вимогам ДФУ |
| Ідентифікація | ||
| Флавоноїди | 1. Реакція з алюмінію хлоридом 2. Хроматографічний метод | Результат позитивний |
| Карбонові кислоти | Хроматографічний метод | Результат позитивний |
| Кількісне визначення | Флавоноїдів (у перерахунку на рутин) не менше 0,0122% | 0,0129±0,0007% |
| Закінчення табл.3 | ||
| 1 | 2 | 3 |
| Мікробіоло-гічна чистота | У 1 г препарату допускається наявність не більше 100 бактерій і грибів (сумарно). Не допускається наявність ентеробактерій і деяких інших грам-негативних бактерій у 1 г. Не допуска-ється наявність Рseudomonas аеruginosa у 1 г. Не допускається наявність Staphy-lococcus aureus у 1 г | Відповідає вимогам ДФУ |
У четвертому розділі наведені результати імунофармакологічних та біологічних досліджень.
Імунофармакологічні дослідження проводили на кафедрі клінічної лабораторної діагностики ЛНМУ імені Данила Галицького. Консультативну допомогу на всіх етапах проведення цих досліджень надавав д.мед.н., проф. Б.Д.Луцик, за що автор висловлює щиру подяку.
Вивчення впливу Протефлазіду на лімфоцити проводили з тією частиною донорів, які мали лімфоцити з високою проліферативною активністю при культивуванні їх з фітогемаглютиніном (ФГА). Рецепторну характеристику лімфоцитів після БТЛ наведено у табл.4.
Результати досліджень свідчать, що у всіх серіях бласттрансформація лімфоцитів проходить за рахунок Т-хелперів. У процесі БТЛ на клітинах зберігаються маркери до нейтрофілів та до В-лімфоцитів. При порівнянні між апоптозозалежними лімфоцитами (CD 95) у трьох серіях дослідів різниця була істотною, критерій Стьюдента (t=3,7) й істотність різниці (Р < 0,004).
Різниця при порівнянні між В-лімфоцитами (СД-19), нейтрофілами (СД-16), Т-хелперами (СД-4) та Т-супресорами (СД-8) у всіх серіях дослідів не істотна. Протефлазід має виражений імуномодулюючий вплив на лімфоцити людини, знижуючи апоптозозалежність лімфоцитів. У процесі БТЛ з ФГА, Протефлазідом та екстрактом елеутерокока залишаються функціонально активними імунні синапси на лімфоцитах до моноклональних антитіл (СД-16, 19, 95).
Білковий спектр сироватки крові та культуральної рідини після БТЛ досліджували для вивчення можливого впливу Протефлазіду на білки плазми крові. Протефлазід та екстракт елеутерокока, перебуваючи в контакті з лейкоцитами і білками упродовж 3-х днів у застосованих концентраціях, не денатурують білки (зберігаються їх ізоелектрична точка і молекулярна маса, що забезпечує їх електрофоретичне розділення).
Нами вивчено вплив Протефлазіду на В-лімфоцити (при дослідженні in vitro) при визначенні імуноглобулінів сироватки крові донорів і культуральної рідини після БТЛ. ФГА, Протефлазід та екстракт елеутерокока, перебуваючи в контакті з лейкоцитами протягом 3-х днів у застосованих концентраціях, не активують В-лімфоцити до продукції імуноглобулінів.
Таблиця 4
Рецепторна характеристика лімфоцитів після реакції БТЛ
| Назва показника | Клітини до БТЛ M m S | (а) кліти-ни з ФГА Ma m S n - 12 | (b) клітини з ФГА і Проте-флазі дом M b m S t (a-b) n - 12 | (c) клітини з ФГА і елеу-терококом Mc m S t(a-c) n - 12 |
| CD-4 маркер хелперів | 32,3 0,9 S = 4,8 | 48,5 1,9 S = 6,5 | 51,9 1,8 S = 6,5 t (a-b) = 1,1 P 0,2 | 45,6 1,6 S = 5,8 t (a-c) = 0,9 P 0,3 |
| CD-8 маркер супресорів | 26,1 0,2 S = 3,7 | 15,7 1,6 S = 5,5 | 16,4 2,1 S = 7,3 t (a-b) = -0,45 P 0,6 | 15,6 1,4 S = 4,8 t (a-c) = 0,05 P 0,9 |
| CD-16 маркер нейтрофілів | 19,4 0,9 S = 5,1 | 20,6 1,9 S = 6,7 | 15,6 2,1 S = 7,1 t (a-b) = 1,87 P 0,08 | 22,5 1,8 S = 6,5 t(a-c)=-0,7 P 0,5 |
| CD-19 маркер В-лімфоцитів | 22,3 0,81 S = 4,6 | 26,7 1,6 S = 5,6 | 23,2 2,6 S = 9,1 t (a-b) = 1,2 P 0,2 | 23,8 2,2 S = 4,4 t (a-b) = 0,9 P 0,3 |
| CD-95 маркер апоптозу клітин | 9,7 0,5 S = 1,3 | 16,1 1,7 S = 5,9 | 9,3 0,5( ***) S = 1,8 t (a-b) = 3,7 P 0,004 | 13,4 1,2 S = 4,4 t(a-c)= 1,54 P 0,1 |
Цитокіни (г-інтерферон та 1-інтерлейкін) у сироватці крові донорів і культуральних рідинах після бласттрансформації лімфоцитів з ФГА, Протефлазідом та екстрактом елеутерокока вивчали для визначення функціональної активності лімфоцитів. В утворенні г-інтерферону приймають участь Т-хелпери. Більшість клітин людського організму можуть продукувати 1-інтерлейкін, але для цього вони повинні бути активовані.
На даний час активно вивчається значення цього інтерлейкіну для ендокринної системи, фібробластів, епітеліальних клітин, остеокластів, клітин головного мозку, гепатоцитів та інших систем. Результати дослідження наведено в табл.5.
Таблиця 5
Гама-інтерферон і інтерлейкін-1 у сироватці крові і культуральних рідинах після бласттрансформації лімфоцитів
| Назва показника | У сироватці крові (а) M m S a | У культуральних рідинах | ||
| 1 (b) M m S b S d t (a-b) | 2 (с) M m S c t (b-c) | 3 (d) M m t (b-d) | ||
| г-інтерферон | 57,2 8,2 S - 28,4 | 2772,623,8 82,6 t – 113,6 P 0,001 | 2446,5 69,2 239,6 t – 4,8 P 0,001 | 2420,1 59,6 206,4 t – 5,2 P 0,001 |
| 1-інтерлейкін | 84,0 4,7 S -16,4 | 742,3 10,4 65,2 t –31,3 P 0,001 | 275,8 10,4 36,1 t – 19,6 P 0,001 | 332,7 8,7 30,2 t – 19,5 P 0,001 |
1 (b) –БТЛ під впливом ФГА; 2 (с) – БТЛ під впливом ФГА і Протефлазіду;
3 (d) – БТЛ під впливом ФГА та екстракту елеутерокока
Під впливом ФГА, Протефлазіду та екстракту елеутерокока значно зростає концентрація г-інтерферону (різниця істотна). При порівнянні концентрації -інтерферону у культуральних рідинах з Протефлазідом та екстрактом елеутерокока не було істотної різниці: t – 0,27, P 0,7. Протефлазід виступає в ролі супресора продукції прозапального цитокіна (1в-інтерлейкіну) лімфоцитами (при порівнянні з ФГА, різниця достовірна).
Результати проведених досліджень показали, що Протефлазід стимулює продукцію г-інтерферону лімфоцитами людського організму in vitro в процесі БТЛ. На фоні ФГА (in vitro в процесі БТЛ) Протефлазід виступає інгібітором прозапального цитокіна 1в-інтерлейкіну.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
