92231 (680518), страница 3

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 3)

Существенный положительный момент метода электрослияния состоит в том, что он не связан с химическим воздействием. Действующим началом здесь является не какой-либо химический или биологический фактор, который необходимо вводить в раствор к исследуемому объекту, а электрический ток, пропускаемый через объект. В среду для электрослияния ничего дополнительного не вносится, кроме электродов, да и то на короткое время. При подаче необходимого для сливания электрического поля на клетки, как мы уже отмечали, по существу возможны два случая: либо обе клетки или одна из сливающихся клеток сразу же разрушается (в пределах 5-15 с), что означает образование у мембраны необратимого пробоя; либо слияние проходит благополучно, что означает обратимость пробоя. Во втором случае происходит, по-видимому, временное нарушение гомеостаза внутриклеточной среды за счет образования пор. Принципиально иная ситуация имеет место при действии на клетки полиэтиленгликоля или инактивированного вируса Сендай. В этом случае используемые факторы попадают внутрь клетки и могут там каким-либо образом достаточно долго и сложно взаимодействовать с внутриклеточными структурами. Не случайно есть указания, что и полиэтиленгликоль и вирус Сендай могут понижать жизнеспособность клеток.

Уместно также отметить еще одну важную положительную особенность этого метода, которая явилась важным фактором в развитии всей электробиологии. Это - большие экспериментальные удобства в легкости и широком диапазоне строгой количественной дозировки.

При современном использовании диэлектрофореза и электрослияния в плотных клеточных суспензиях можно получать громадные многоядерные клетки, что невозможно при других способах слияния. Такие многоядерные гигантские клетки, достигающие до 1 мм, могут оказаться очень полезными для решения различных экспериментальных задач.

С помощью электростимулируемого слияния можно избирательно сливать вполне определенные клетки, что, по-видимому, малореально при химическом стимулировании слияния. Например, при получении химер необходимо слить криопласт от другой линии, введенный под зону пеллюцида двухклеточного зародыша, только с тем бластомером, у которого предварительно удалено ядро.

Такое избирательное слияние может достаточно легко контролироваться расположением электродов по отношению к исследуемой группе клеточных структур. Если расположить электроды таким образом, чтобы линия их продольных осей проходила перпендикулярно к области контакта тех клеток, которые необходимо слить (бластомер / и кариопласт), то преимущественно будет сливаться именно эта пара клеток. Возможны и другие типы вариантов локального и направленного слияния у различных клеточных структур.

Заключение

Рассмотренные особенности метода электростимулируемого слияния (безопасность для генома, универсальность, чистота, технологическая простота, избирательность, строгая дозированность и ряд других) позволяют полагать, что он действительно резко расширит и ускорит исследования в области клеточной инженерии.

Литература

1. Трайтак Д.И. Биология: Справочные материалы. - М., Просвещение, 1983. - 208 с., ил.

2. http://www.krugosvet.ru

Характеристики

Список файлов реферата