4736 (567174), страница 19

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 19)

– при засеве инокуляторов в зоне дыхания и между инокуляторами;

– при отборе проб из инокуляторов;

– при засеве посевных аппаратов (при условии прямого засеивания);

– при отборе проб из посевных аппаратов у пробника и между посевными аппаратами;

– при отборе проб из ферментеров;

– при спуске культуральной жидкости из ферментеров в коагуляторы или прямо на фильтрацию.

Если в технологическом процессе имеет место сушка биомассы, то отбор проб проводится:

– при перемешивании;

– при выгрузке из сушильных аппаратов;

– при фасовке биомассы.

Перечисленные точки отбора ориентировочные и на каждом предприятии устанавливаются индивидуально с учетом данных валидации, характеристик процесса, методологии тестирования и т. п.

2.4. При текущем контроле в одном помещении число контрольных точек должно быть не менее трех

2.5. Для сравнительного анализа концентраций микроорганизмов в воздухе рабочей зоны отбор проб должен проводиться не реже 1 раза в неделю в аналогичный по интенсивности технологического процесса временной период

2.6. Объем пробы воздуха должен быть достаточным для обнаружения микроорганизмов Он устанавливается опытным путем с учетом характеристик используемого пробоотборника и концентрации микроорганизмов в тестируемой зоне

Примечание. Для импакторов и центрифужных пробоотборников одним из ограничивающих факторов является высыхание поверхности агара при больших объемах проб, а также возможность повреждения поверхности агарового слоя (растрескивание)

2.7 Отбор проб на содержание микроорганизмов проводят в рабочей зоне, высота установки прибора 1,5 м от уровня пола.

3. Характеристика метода

3.1. Метод основан на аспирации микроорганизмов из воздуха на поверхность плотных элективных питательных сред (специфичных для данного микроорганизма) и подсчета выросших колоний по типичным морфологическим признакам.

3.2. В специфическую питательную среду добавляют вещества (этиловый спирт, нефтепродукты, антибиотики и т. п.) для подавления посторонней микрофлоры, в зависимости от особенностей изучаемого штамма.

3.3. Отбор проб проводится с концентрированном воздуха на чашке Петри с посевной средой.

Примечание.

1. Выбор питательной среды является важным фактором Базовой средой для бактерий является среда № 1 (по ГФ, изд. XI, вып. 2., с 200*) и среда № 2 (агар Сабуро) для дрожжей и грибов. Посевы на среде № I инкубируются при температуре от 30 до 35 °С в течение 48 ч, на агаре Сабуро – от 20 до 25 °С в течение 72 ч.

2. Перед исследованием разлитые на чашки Петри или на пластины питательные среды необходимо выдержать в термостате при температуре от 30 до 35 °С в течение 24 ч для подтверждения их стерильности. Проросшие чашки бракуют.

3. Ростовые свойства питательных сред должны быть проверены соответствующими тест-штаммами (для среды № I и среды № 2 по ГФ, изд. XI, вып 2, с. 208 «Требования к ростовым свойствам питательных сред»).

3.4 Предел измерения от 0,5 до до 2–10⁶ КОЕ/м³.

3 5. Выявленные в процессе отбора пробы воздуха микроорганизмы подлежат обязательной макроскопической (форма, цвет, консистенция колоний) и микроскопической идентификации окрашенных по Грамму мазков Результаты исследований должны регистрироваться в документах, где указывают основные морфологические признаки: отношение к окраске по Грамму, наличие или отсутствие спорообразования, форма микроорганизмов (кокки, палочки, овоиды и т.п.).

В процессе идентификации микроорганизмов могут быть использованы биохимические тест-системы, идентификационные автоматизированные системы, а также любые современные методы идентификации микроорганизмов

4. Приборы и посуда

4 1. Для бактериологического анализа воздуха используют импактор воздуха микробиологический «Флора-100» (ТУ 64–098– 33–95)

Примечание. Современная отечественная модель – высокопроизводительный импактор «Флора 100» работает в автоматическом режиме, отбирает заданный объем воздуха и осаждает биологический аэрозоль на чашку Петри с плотной питательной средой. Импактор полностью заменяет широко используемый для контроля прибор Кротова и превосходит его по всем техническим характеристикам (точность определения, масса, габариты, скорость пробоотбора, автоматический контроль параметров пробоотбора и диагностики неисправностей).

Импактор «Флора-100» прошел государственные испытания и рекомендован Комитетом по новой технике (протокол № 7 от 26. 12. 95) к применению в медицинской практике.

4.2. Методику проведения контроля с использованием импактора «Флора-100» рекомендуется согласовывать с разработчиком импактора для уточнения времени аспирации в зависимости от особенностей контролируемой микрофлоры.

4.3. Прибор для бактериологического анализа воздуха, модель 818 ТУ 64–1–791 –77

4.4. Секундомер ГОСТ 9586–75

4.5. Чашки бактериологические, плоскодонные, стеклянные диаметром 100 мм ГОСТ 10937–75

4.6. Термостаты электрические суховоздушные, типа ТС, ТУ 64–1–1382–76

4.7. Пипетки мерные ГОСТ 1770–74

4.8. Колбы конические ГОСТ 1770–74

4.9. Весы аналитические ВЛА-200-М

4.10. Камера для стерильной сушки чашек Петри типа ЕМЗ 804–014СП

* Государственная Фармокопея СССР XI издания, вып. 2

5. Методика проведения контроля

5.1. Воздух аспирируют со скоростью от 20–30 до 150–200 л/мин на поверхность питательной (посевной) среды на чашках Петр.

5.2. Время аспирации 2–5 мин

5.3. Инкубирование отобранных из воздуха проб производится в зависимости от выделяемых микроорганизмов в диапазоне температур от 27–28 до 41–42 °С При оценке пигментообразования чашки Петри дополнительно (после инкубирования) выдерживают 48 ч при комнатной температуре.

5.4. Метод предполагает учет количества типичных по морфологическим признакам колоний, выросших на 3–4 сут. и более, в зависимости от штамма после посева воздуха.

5.5. Прямой метод позволяет учитывать на чашке до 150—200 колоний Результаты расчета концентрации дают в колониеобразующих единицах (КОЕ) в 1 м³ воздуха.

5.6. Расчет концентрации (колониеобразующих единиц), содержащихся в 1 м³ воздуха, производится по формуле:

К = П· l000/С·t кл/м³, где

К – концентрации искомой культуры в воздухе, КОЕ/м³;

П – количество изотипов бактерий, сходных по морфологии колоний и клеток;

1000 – коэффициент пересчета на 1 м³ воздуха;

С – скорость аспирации;

t – время аспирации.

5.7. Результаты замеров вносят в протокол.

ПРОТОКОЛ

оценки содержания промышленных штаммов микроорганизмов в воздухе рабочей зоны

Дата____________

1. Ф. И. О. работающего (рабочее место) _________________________

2. Профессия_________________________________________________

3. Производство______________________________________________

4. Участок (технологическая стадия, операция) ____________________

5. Точка отбора (наименование оборудования, у которого производится отбор) ________________________________________________________

6. Вид пробоотборника _____________________________________

7. Дата последней метрологической поверки оборудования для отбора проб _________________________________________________________

8. Микроорганизм, содержание которого контролируется (род, вид, штамм) _______________________________________________________

9. Питательная среда, оптимум роста, время инкубации ______________________________________________________________

10. Количественная и качественная характеристика выросших колоний (морфологические признаки – форма, цвет, консистенция; окраска по Граму; количество типичных колоний) ____________________________________

11. Результаты идентификации микроорганизмов с указанием метода

_____________________________________________________________

12. Результаты расчета концентрации микроорганизма (КОЕ/м³)

_____________________________________________________________

13. Соотношение полученных результатов с уровнем ПДКр.з.

_____________________________________________________________

14. Отбор пробы произведен

____________________ (Ф. И. О., должность) ___________________ (подпись, дата)

Идентификация штамма и расчет концентрации произведен:

____________________ (Ф. И. О., должность) ___________________ (подпись, дата)

Приложение 11 (Справочное)

Примеры расчета пылевой нагрузки (ПН), определения класса условий труда и допустимого стажа работы в контакте с аэрозолями преимущественно фиброгенного действия

Пример 1.

Дробильщик проработал 7 лет в условиях воздействия пыли гранита, содержащей 60 % Si0₂. CCK за этот период составляла 3 мг/м³. Категория работ – II б (объем легочной вентиляции равен 7 м³). Среднесменная ПДК данной пыли – 2 мг/м³. Среднее количество рабочих смен в год – 248.

Определить:

а) пылевую нагрузку (ПН),

б) контрольную пылевую нагрузку (КПН) за этот период,

в) класс условий труда,

г) контрольную пылевую нагрузку за период 25-летнего контакта с фактором (КПН₂₅),

д) допустимый стаж работы в таких условиях.

Решение

а) Определяем фактическую пылевую нагрузку за рассматриваемый период:

ПН = К N T Q, где

К – фактическая среднесменная концентрация пыли в зоне дыхания работника, мг/м³;

N – количество рабочих смен в календарном году;

Т – количество лет контакта с АПФД;

Q – объем легочной вентиляции за смену, м³.

Соответственно: ПН = 3 мг/м³ · 248 смен · 7 лет · 7 м³ = 36 456 мг.

б) Определяем контрольную пылевую нагрузку за тот же период работы:

КПН = ПДК_СС N T Q, где

ПДК_СС – предельно допустимая среднесменная концентрация пыли, мг/м³;

N – число рабочих смен в календарном году;

Т – количество лет контакта с АПФД;

Q – объем легочной вентиляции за смену, м³;

Соответственно: КПН = 2 · 248 · 7 · 7 = 24304 мг.

в) Рассчитываем величину превышения КПН:

ПН /КПН = 36456 / 24340 = 1,5 т. е. фактическая ПН превышает КПН за тот же период работы в 1,5 раза.

Соответственно, согласно таблице 4.11.3 настоящего руководства, класс условий труда дробильщика – вредный, 3.1.

г) Определяем КПН за средний рабочий стаж, который принимаем равным 25 годам:

КПН₂₅ = 2 ·248 ·7 25 = 86800 мг

д) Определяем допустимый стаж работы в данных условиях:

(раздел 2 приложения 1 настоящего руководства)

Таким образом, в данных условиях труда дробильщик может проработать не более 17 лет.

Пример 2.

Рабочий работал в контакте с асбестсодержащей пылью (содержание асбеста более 20 % по массе). ПДК_СС пыли – 0,5 мг/м³. Общий стаж работы – 15 лет. Первые 5 лет фактическая Среднесменная концентрация пыли составляла 10 мг/м³, категория работ – III (объем легочной вентиляции – 10 мЭв смену). Следующие 6 лет фактическая CCK была равна 3 мг/м³, категория работ – IIа (объем легочной вентиляции за смену – 7 м³) и последние 4 года CCK составляла 0,9 мг/м³, категория работ – IIа. Среднее количество рабочих смен в году – 248.

Определить:

а) ПН,

б) КПН за этот период,

в) класс условий труда,

г) КПН₂₅,

д) допустимый стаж работы в таких условиях.

Решение

а) Определяем фактическую пылевую нагрузку за все периоды работы:

Характеристики

Список файлов ответов (шпаргалок)