Диссертация (1174274), страница 10
Текст из файла (страница 10)
Сравнение двух выборочных долей проводили с помощью z-критерия,взаимосвязь между параметрами оценивали методом корреляционного анализаСпирмена. Различия считали статистически значимыми при p ˂ 0,05.Первый этап работы представлен исследованием пациенток, поступившихв ГБУЗ «Городской клинической больницы № 31 ДЗМ» – 239 пациенток за периодс 2010 по 2017 годы в возрасте от 21 до 43 лет (средний возраст 32,6 лет). Из них впервую группу исследования было включено 93 пациентки, которые поступилина обследование по поводу аномальных маточных кровотечений (Таблица 1).В анамнезе у 66 пациенток (71%) были проведены от 1 до 6 медицинскихабортов, у 37 (39,8%) в анамнезе было диагностировано невынашивание беременности и вторичное бесплодие, у других 17 (18,3%) пациенток – первичное бесплодие.
Общее число женщин с бесплодием составило 54 из 93 обследованных (58%).Во вторую группу вошли 105 пациенток с бесплодием, которые были обследованы по поводу предстоящего экстракорпорального оплодотворения (ЭКО). Упациенток этой группы патоморфологическое исследование эндометрия проводилось в течение всего менструального цикла: фазы пролиферации (ранней, средней,поздней) и фазы секреции (ранней, средней, поздней), позволившее выделить дваважных периода (7–10-й день менструального цикла менструального цикла с целью47верификации наличия ХЭ с окраской гематоксилином и эозином, а также по Маллори; 18–24-й день менструального цикла – окно имплантации – с оценкой состояния зрелости пиноподий) (Таблица 1).Третья группа исследования (группа сравнения) включила 41 пациентку с нормальным менструальным циклом и репродуктивной функцией, которым была выполнена надвлагалищная ампутация матки по поводу миомы тела матки (Таблица 1).Всем пациенткам проводилось комплексное обследование, включая сбор жалоб, анамнеза, трансвагинальное ультразвуковое исследование органов малого тазасо световым допплеровским картированием сосудов матки, проведение лабораторных методов как общих, так и специальных (оценка инфекционного статуса женщин путем проведения бактериоскопического и бактериологического исследования материала из влагалища, цервикального канала, а также ПЦР возбудителей иИППП в отделяемом канала шейка матки и эндометрия), патогистологическое исследование материала, полученного при гистероскопии при раздельно диагностическом выскабливании, с окраской срезов толщиной 4–5 микрон гематоксилиноми эозином, а также по Маллори.
Для иммуноокрашивания использовали системувизуализации (Ultra Vision TL-015-HD Lab Vision), с целью изучения местного иммунитета использовали антитела к CD 4 (Т-лимфоциты – хелперы) – клон SP35,CD8 (Т-лимфоциты – супрессоры) – клон SP57, CD20 (зрелые В-лимфоциты) –клон L26 фирмы DAKO, Дания, СD 138 –на плазмоциты клон MI15, DAKO. Дляиммуногистохимических реакций ставили положительные и отрицательные контроли. Оценка результатов иммуногистохимических реакций проводилась полуколичественным и количественными методами. Статистическая обработка данныхпроводилась с помощью программы Statistica 10.0 (StatSoft, USA), уровень статистической значимости р < 0,05.Во втором этапе работы были включены 19 женщин с беременностью малого срока от 3 до 12 недель по дате последней менструации, в возрасте от 21 годадо 40 лет, которые добровольно пожелали отказаться от наступившей беременности.
При тщательном анализе медицинской документации с учетом клинико-лабораторных данных женщины были разделены на две группы (Таблица 1). Первая48группа была с наличием акушерско-гинекологической патологии (11 женщин в возрасте от 25 до 40 лет) в виде перенесенной инфекции, передающейся половых путей(цитомегаловирусная инфекция, уреаплазмоз, хламидиоз, вирус простого герпеса).Всем женщинам проводилось лечение, однако, у всех был диагностирован хронический эндометрит (100%) в сочетании с хроническим сальпингитом (данныеанамнеза).
У восьми пациенток (73%) выявлены многочисленные перенесенныеаборты в анамнезе (от 4 до 10). У двух пациенток (18,2%) в анамнезе по две беременности, закончившиеся спонтанными преждевременными родами на сроке 32недели гестации. Вторая группа была представлена восемью женщинами в возрастеот 21 до 37 лет со сроком гестации 3–9 недель без отягощенного акушерско-гинекологического анамнеза (Таблица 2). Полученный материал от каждой женщиныразделили на две части.Первая – была фиксирована в 10%-м нейтральном растворе формалина с последующей гистологической проводкой и заливкой материала в парафин. Гистологические срезы толщиной в 4–5 мкм были окрашены гематоксилином и эозином, атакже комбинированной окраской по ван Гизону.
Другая часть материала былафиксирована в 2,5%-м растворе глютаральдегида на фосфатном буфере (рн 7,2–7,4)с последующей дофиксацией в 1%-м растворе четырехокиси осмия, последовательно обезвоживая в 50-, 70-, 96- и 100-процентном этиловом спирте. Затем материал заливали в смесь эпон-аралдита. Полутонкие срезы для светооптической микроскопии окрашивали метиленовым синим-азуром II – основным фуксином. Ультратонкие срезы констрастировали уранилацентатом на 70-процентном спирте ираствором Рейнольдса, просматривали в электронном трансмиссионном микроскопе Libra 120 (Karl Zeiss).Третий этап работы, посвящен значению урогенитальной инфекции в развитии спонтанных преждевременных родов (ПР). С этой целью мы определили частоту инфицирования влагалища и полости матки у пациенток со спонтаннымипреждевременными родами.Критериями включения пациентов в исследование явилось: согласие женщины на проведение исследования, наличие спонтанных преждевременных родов49в сроке гестации от 22 до 36,6 недель и своевременных родов в сроке гестации от38 до 41 недели.Критериями исключения пациентов в исследование явилось: индуцированные преждевременные роды, хронические аутоиммунные заболевания, экстрагенитальная патология в стадии декомпенсации.В исследование были включены 102 беременные женщины в возрасте 22–45лет, поступившие на роды в ГБУЗ «Центр планирования семьи и репродукцииДЗМ» в период с 2016 по 2017 гг., 90 из которых были родоразрешены в сроке 22,0–36,6 недель гестации (группа преждевременных спонтанных родов).
Остальные 12пациенток, со своевременными родами в сроке гестации 38–41-я неделя, составилигруппу сравнения (Таблица 3).В зависимости от срока беременности были распределены три подгруппы ПР(очень ранние ПР в сроке 22,0–27,6 недель, ранние ПР в сроке 28,0–30,6 недель, ПРв сроке 31,0–33,6 недель и поздние ПР в сроке гестации 34,0–36,6 недель). У пациенток проводился сбор жалоб и анамнестических данных, определение соматического и гинекологического статуса, клинико-лабораторное, ультразвуковое исследование органов малого таза, гистологическое исследование последов.У 24 (произвольно взятых) женщин из группы преждевременных оперативных родов дополнительно был проведен забор отделяемого влагалища (сразу послепреждевременного излития вод) и матки (интраоперационно во время операции кесарева сечения) для проведения ПЦР в режиме реального времени с помощью теста«Флороценоз – бактериальный вагиноз» и «Флороценоз микоплазмы» с определением процента лактобактерий от всей бактериальной нагрузки на 10000 клеток, атакже выявление условно-патогенной микрофлоры, цитомегаловируса и вирусапростого герпеса (CMV и HSV1|2).
С целью проведения сравнительного анализаанамнестических, клинико-лабораторных данных, соматического и гинекологического статусов, гистологического исследования последов, а также оценки микрофлоры урогенитального тракта с помощью ПЦР, была включена группа сравнения– 12 пациенток со своевременными родами в сроке гестации от 38-й до 41-й недели.50Статистическая обработка данных проводилась с помощью применения программы Statistica 10.0 (StatSoft, USA). Использовались методы для оценки непарамметрических данных – U критерий Манна – Уитни и коэффициент ранговой корреляции Спирмена, уровень значимости р < 0,05).В зависимости от срока гестации беременные женщины с ПР (90 человек)были распределены на четыре подгруппы: очень ранние ПР в сроке гестации 22,0–27,6 недель – 18 (20,0%), ранние ПР в сроке гестации 28,0–30,6 недель – 8 (8,9%),ПР в сроке 31,0–33,6 недель – 39 (43,3%) и поздние ПР в сроке гестации 34,0–36,6недель – 25 (27,8%) (Таблица 4).Таблица 4 – Срок гестации и возраст пациенток с преждевременными родамиВозраст пациентокСрок гестациидо 27,6 недельСрок гестации28,0–30,6 недельСрок гестации31,0–33,6 недельСрок гестации34,0–36,6 недель22–29 лет4011930–39 лет128241340 и старше2043Всего1883925На этом этапе работы у тех же 24 женщин со спонтанными ПР, у которыхбыл произведен забор отделяемого влагалища (сразу после преждевременного излития вод) и матки (интраоперационно во время операции кесарева сечения) дляпроведения ПЦР в режиме реального времени, также были получены индивидуальные образцы амниотической жидкости, венозной материнской и пуповинной кровиво время операции кесарева сечения.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
