Диссертация (1174258), страница 6
Текст из файла (страница 6)
Структура тромбоцитарного ВМФВ также отличается от фактораВиллебранда плазмы крови. Фактор Виллебранда, подвергающийся фоновойсекреции, в значительном количестве содержит связанные с группой кровиантигены A, B и H, тромбоцитарный ВМФВ лишен A и B антигенов и имееттолько Н-антиген, а его структура подвергается сиалированию в значительноменьшей степени, что в совокупности частично защищает тромбоцитарныйВМФВ от механизмов ограничения его активности [71, 148].1.3.2 Регуляция активности и пути выведенияМеханизмырегуляцииактивностифактораВиллебранданеограничиваются сложной многоступенчатой системой синтеза и секреции,контролирующей его тромбогенность за счет изменения длины мультимеров.
Вплазме также существует несколько физических и химических механизмовобратной связи, меняющих его активность в зависимости физиологическихусловий.Первым механизмом, влияющим на функциональную активность фактораВиллебранда в плазме, является воздействие гемодинамических параметров наего конформацию. Кровь представляет собой неньютоновскую жидкость спеременной вязкостью, текущую в виде ламинарного потока с минимальнойскоростью около сосудистой стенки и максимальной в середине просветасосуда; при этом в области бифуркаций, физиологических сужений, а такжеатеросклеротических бляшек и стенозов возникают различные изменениягемодинамики [125]. Градиент скорости между слоями жидкости описывается спомощью скорости сдвига, а взаимодействие слоев ламинарного потока крови исосудистой стенки – с помощью напряжения сдвига, оказывающего важноевлияние на состояние сосудистой стенки, но при этом зависящего от калибрасосуда [143].
При низкой скорости сдвига фактор Виллебранда находится в32малоактивнойглобулярной(нативной) форме,ипроцессысосудисто-тромбоцитарного гемостаза могут протекать без его участия [195]. Скоростьсдвига в артериолах калибра до 50 мкм колеблется в диапазоне 470-4700 с-1(медиана около 1700 с-1), и в таких условиях фактор Виллебранда способенвытягиваться и принимать нитевидную конформацию, из-за чего ранее«скрытые» домены становятся способны взаимодействовать с сосудистойстенкой и тромбоцитами [195].
В областях с резко повышенным напряжениемсдвига, развивающимся, например, в области атеросклеротической бляшки(скорость сдвига до 11000 с-1) или при нарушении целостности сосудистойстенки [125, 195], возникают предпосылки для значительного повышениятромбогенной активности фактора Виллебранда [206]. Кроме того, сам уровеньсекреции фактора Виллебранда эндотелием прямо пропорционален степенинапряжения сдвига [77], что является дополнительным механизмом регуляцииего физиологических свойств.Вторым механизмом регуляции активности фактора Виллебрандаявляется протеолитическое расщепление в плазме крови, укорачивающее егодлину и ограничивающее его участие в процессах тромбообразования [197].Такими свойствами обладает синтезируемая звездчатыми клетками печенипротеазаADAMTS13(дезинтегриниметаллопротеиназасмотивамитромбоспондина-1, тип 13) [276], разрушающая пептидную связь Tyr1605–Met1606 в домене A2 фактора Виллебранда [65]. ADAMTS13 циркулирует вплазме крови свободно [75, 233] или в комплексе с глобулярным факторомВиллебранда[65]ивфизиологическихусловияхнепроявляетпротеолитическую активность вследствие аутоингибирования[79, 156].Последние экспериментальные данные свидетельствуют о потенциальнойспособности ADAMTS13 напрямую вызывать «раскрытие» домена А2 споследующим спонтанным расщеплением связи Tyr1605–Met1606 [54], однако,более общепринятой на данный момент является точка зрения, что дляклинически значимого влияния на активность фактора Виллебранда он долженсначала принять нитевидную конформацию [21, 198].
Далее его «распознает»33ADAMTS13, и происходит аллостерическая активация с последующимпротеолизом мультимеров фактора Виллебранда [65, 156]. На эффективностьего протеолиза также влияет степень его сиалирования [71]. СпособностьADAMTS13 циркулировать в комплексе с фактором Виллебранда безактивации протеолитической активности важна для локального ограниченияего тромбогенности, так как таким образом ADAMTS13 может попадатьнепосредственновнутрьформирующегосятромбаиоказыватьсвоевоздействие локально [206].Дополнительныммеханизмом,ограничивающимдлинумолекулыфактора Виллебранда после его секреции, является регуляция количествадисульфидных связей между его мономерами. Тромбоспондин-1 секретируетсяфибробластами, гладкими миоцитами сосудистой стенки, эндотелиоцитами ивключается в состав субэндотелиального матрикса, кроме того, тромбоспондин1 содержится в α-гранулах тромбоцитов и участвует в процессах их активации[255].
В экспериментах с лабораторными животными было показано, чтомолекулы тромбоспондина-1 способны связываться с фактором Виллебранда(преимущественно с ВМФВ) в области домена А3 и разрушать дисульфидныесвязи между его мономерами, тем самым укорачивая длину его молекул,снижая их активность [257].Взаимодействие ADAMTS13 с фактором Виллебранда зависит от такихнемодифицируемых факторов, как группа крови, возраст, пол и расоваяпринадлежность, кроме этого, оно в определенной степени связано с индексоммассы тела, курением, артериальной гипертензией и сахарным диабетом [14,212]. Влияние группы крови на активность фактора Виллебранда объясняютзащитным воздействием A и B антигенов на его структуру, частичноограничивающим его протеолиз [71].
Наибольшая активность фактораВиллебранда наблюдается у пациентов с B и AB группой, наименьшая – упациентов с O группой, разница в его активности между этими группамисоставляет до 31,7% [212]. Кроме того, у пациентов с O группой крови ибомбейским фенотипом отмечается повышенная активность ADAMTS13 [71].34Не менее значимым фактором, влияющим на активность фактора Виллебранда,является возраст: его уровень в плазме крови повышается на 1-2% каждый год[122], а активность ADAMTS13, напротив, с возрастом снижается [120].В связи с тем, что находящийся в плазме крови фактор Виллебранданепрерывно подвергается воздействию значительного количества химическихсоединений, постепенно меняющих его структуру, существует необходимостьвыведения его «старых» молекул [133].
В настоящее время известно несколькотипов клеток, имеющих на своей поверхности рецепторы, связывающиемолекулы фактора Виллебранда. Основными органами, участвующими в еговыведении, являются селезенка, печень и почки [204]. Наиболее значимым ихорошоизученнымрецептором,участвующимввыведениифактораВиллебранда, является липопротеиновый рецептор LRP1, обнаруженный наповерхности гепатоцитов и тканевых макрофагов, в том числе, и купферовскихклеток печени [43, 133]. Фактор Виллебранда, находящийся в глобулярнойформе, недостаточно эффективно взаимодействует с этим рецептором, иглавным условием эффективного LRP1-опосредованного выведения являетсядостаточный уровень напряжения сдвига [43]. Кроме того, на поверхностигепатоцитов и макрофагов существует рецептор ASGPR (рецептор ЭшвеллаМорелла), участвующий в элиминации десиалированных форм фактораВиллебранда [85, 133].
Также на поверхности макрофагов имеется рецепторSIGLEC5, напротив, взаимодействующий исключительно с остатками сиаловойкислоты в составе молекул фактора Виллебранда [170]. На поверхностисинусоидальных эндотелиальных клеток печени был обнаружен рецепторCLEC4M, также потенциально участвующий в процессе выведения фактораВиллебранда [193]. У здорового человека время полувыведения фактораВиллебранда из плазмы крови в среднем составляет около 12 часов [34].Согласно экспериментальным данным, непосредственное влияние ADAMTS13на его выведение минимально [134].
В определенной степени наличие A и Bантигенов может частично препятствовать механизмам его выведения [14].351.3.3 Участие в тромбообразованииПри церебральных инсультах немаловажной является роль фактораВиллебранда как соединения, участвующего в сосудисто-тромбоцитарном икоагуляционном гемостазе и влияющего на баланс между тромбозом икровотечением.ВфизиологическихусловияхфакторВиллебранда,находящийся в плазме, не вызывает тромбообразования, но при нарушениицелостностисосудистойстенкионобеспечиваетбыстрое ипрочноевзаимодействие тромбоцитов и эндотелия для формирования тромбоцитарноготромба [181]. В области поврежденной сосудистой стенки в просвет сосудавыступают различные компоненты субэндотелиального матрикса, в том числе,коллаген, с которым могут взаимодействовать рецептор тромбоцитов GpVIFcRγ и интегрин α2β1 [181], а также ламинин, с которым могут связыватьсярецепторGpVI-FcRγ иинтегрин α6β1[105], однако, скорость этихвзаимодействий может быть недостаточной.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
