Диссертация (1174258), страница 5
Текст из файла (страница 5)
Важностьэтого механизма подтверждается нейропротективным эффектом от введенияхелаторовионовжелеза,такихкакдефероксамин[113]ипентагидроксиэтилнафтохинон [11].1.3 Роль фактора Виллебранда и системы гемостаза пригеморрагическом инсультеПервичный гемостатический эффект при геморрагическом инсультеможет достигаться за счет механической тампонады поврежденного сосуда26гематомой [178], однако, без активации сосудисто-тромбоцитарного икоагуляционного гемостаза полноценная остановка кровотечения невозможна,а эффекты активации системы гемостаза можно зарегистрировать не тольколокально в месте формирования внутримозговой гематомы, но и системно. Висследовании S.V.
Lauridsen, включившем 41 пациента с геморрагическиминсультом,неполучавшегопредшествующейантикоагулянтнойилиантиагрегантной терапии, было показано, что в течение 24 часов послепоявления симптомов возникает системная активация коагуляции по даннымтромбоэластографии и теста генерации тромбина [130]. При распространениикрови в субарахноидальное пространство или в желудочковую системуувеличиваютсяконцентрациитромбин-антитромбиновыхиплазмин-антиплазминовых комплексов, D-димера, что свидетельствует об активации каксвертывающей, так и противосвертывающей систем, у таких пациентовповышается риск возникновения коагулопатий, в том числе и синдромадиссеминированного внутрисосудистого свертывания [73].
У пациентов свнутримозговымикровоизлияниями,вособенности,привысокихконцентрациях D-димера, имеется высокий риск развития тромбоза глубокихвен нижних конечностей [164].Вследствие того, что при внутримозговых кровоизлияниях, возникших нафоне артериальной гипертензии и церебральной амилоидной ангиопатии,происходит поражение сосудов малого калибра, остановка кровотечения втакихслучаяхпреимущественнопроисходитвбольшейфункционирующихстепенинауровнеза счетартериол.механизмов,Активациякоагуляции более значима для остановки кровотечения из крупных артерий, вартериолах же за счет гемодинамических особенностей и размера повреждениясосудистойстенкиболеевесомымиявляютсяпроцессысосудисто-тромбоцитарного гемостаза, начальным этапом которого является адгезиятромбоцитов к сосудистой стенке, опосредуемая молекулами фактораВиллебранда [195]. В исследовании состояния сосудисто-тромбоцитарногогемостаза у 34 пациентов И.А.
Щукин выявил увеличение показателей как27спонтанной, так и адреналин-индуцированной агрегации тромбоцитов убольных геморрагическим инсультом [11]. При исследовании 37 пациентов сгеморрагическиминсультомагрегациятромбоцитовсразличнымииндукторами (коллаген, АДФ, ристоцетин) была усиленной в сравнении сконтрольной группой условно здоровых добровольцев [4].Фактор Виллебранда – мультимерный гликопротеин плазмы крови, нетолько являющийся соединением, важным для инициации процессов остановкикровотечения в артериолах за счет обеспечения адгезии тромбоцитов, он такжеучаствует в регуляции коагуляционного гемостаза, секреции и транспортировкецелого ряда веществ, влияет на процессы воспаления, ангиогенеза, апоптоза[132]. Изначально резкие изменения его активности изучались при патологиисистемыгемостаза:различныхподтипахболезниВиллебранда[241],тромботической тромбоцитопенической пурпуре [153], однако, с открытием впоследние десятилетия новых его функций, было показано, что колебания егоактивности даже в пределах значений, определенных в гематологии какнормальные, могут влиять на многие осложнения при целом спектре различныхзаболеваний [196].1.3.1 Структура, синтез и секрецияСинтез фактора Виллебранда обеспечивается клетками эндотелия имегакариоцитами и является сложным многоэтапным процессом [195].Образующаяся в результате трансляции пептидная цепочка очень богатацистеином, формирующим впоследствии многочисленные дисульфидныесвязи, необходимые для дальнейших процессов фолдинга, секреции [205] ирегуляции активности фактора Виллебранда в плазме крови [136].
В структуре«незрелого» фактора Виллебранда было выделено несколько доменов начинаяот N-конца: D1-D2-D’-D3-A1-A2-A3-D4-C1-C2-C3-C4-C5-C6-CK [133]. ФакторВиллебранда в клетке последовательно подвергается посттрансляционноймодификации,всиалированию [195].томчислегликозилированию,сульфатированию,28В эндоплазматическом ретикулуме мономеры фактора Виллебрандапопарно взаимодействуют друг с другом, образуя ковалентные связи междуцистеиновыми остатками соответствующих доменов, при этом особенноважным является формирование прочных дисульфидных мостиков междудоменами CK, в результате которого образуются димеры фактора Виллебранда[195].
Далее они транспортируются в комплекс Гольджи, где под действиемфурина от них отщепляется пропептид фактора Виллебранда, содержащийдомены D1-D2, и происходит мультимеризация димеров за счет образованиядисульфидных мостиков между доменами D3 [133, 195]. После отщепления ивплоть до секреции в кровоток пропептид фактора Виллебранда остаетсячастично ассоциированным с молекулами фактора Виллебранда, активноучаствуя в их конформационных изменениях [195]. Из-за кислой среды ивысоких концентраций ионов Ca2+ в комплексе Гольджи формируетсячетвертичная структура фактора Виллебранда в виде сложных спиралей, вкоторых домены D’-D3 направлены внутрь, образуя внутреннюю вытянутуюполость, а домены CK радиально вытянуты кнаружи [133]. В процессеконформационныхизмененийсфакторомВиллебрандасвязываютсясоединения, для которых он служит белком-переносчиком [181].
В транс-сетиГольджи формируются гранулы, включающие в себя плотно упакованный«зрелый» фактор Виллебранда, которые далее направляются в цитоскелет, а ихформа и содержимое зависит от типа вырабатывающей их клетки [133].Дальнейший путь фактора Виллебранда значительно отличается вэндотелииимегакариоцитах.ВэндотелиоцитахфакторВиллебрандасодержится в палочковидных тельцах Вейбеля-Паладе [244, 249], которые вцитоскелете клетки медленно случайным образом перемещаются вдольмикротрубочек с помощью динеинов и кинезинов, в итоге попадая в сетьмикрофиламентов, откуда посредством экзоцитоза их содержимое постепеннопоступает в кровоток [161]. Такую секрецию фактора Виллебранда эндотелиемобозначают как фоновую (иногда также называемую конституциональной илибазальной), ей подвергается большая часть синтезированного фактора29Виллебранда, а выделяемые таким образом мультимеры имеют меньшую длинуи не обладают высокой активностью [195].
Средняя концентрация фактораВиллебранда в плазме здорового человека обычно составляет около 10 мкг/мл[195]. В пересчете на международные единицы биологической активности егонормальная активность составляет от 50 до 200 МЕ/дл, иногда этот показательвыражается в процентах [196]. Среднее значение активности фактораВиллебранда в общей популяции составляет приблизительно 100 МЕ/дл илипроцентов [267]. Так как секреция фактора Виллебранда в значительнойстепени обеспечивается именно эндотелиоцитами, фактор Виллебрандаявляется одним из специфических биомаркеров эндотелиальной дисфункции[240].При стимуляции эндотелиоцитов тельца Вейбеля-Паладе с высокойскоростью сливаются в крупные гранулы, в которых происходит дальнейшаямультимеризация фактора Виллебранда с образованием высокотромбогенноговысокомолекулярного фактора Виллебранда (ВМФВ), а затем происходитэкзоцитоз этих гранул [186].
Самые крупные молекулы ВМФВ по своей длинесопоставимы с диаметром тромбоцита [257]. Одним из важных отличий ВМФВот ФВ является конформация с иным положением тиоловых групп: в ВМФВони «скрыты» внутри четвертичной структуры, в ФВ – находятся наповерхности;Виллебрандаэторазличиепозволяетвзаимодействоватьдругдвумсразновидностямдругомвфактораподходящихгемодинамических условиях посредством тиол-дисульфидного обмена [136].Кроме фактора Виллебранда в тельцах Вейбеля-Паладе по результатампротеомного анализа было обнаружено более 200 соединений, однако,физиологическая роль их взаимодействий друг с другом изучена лишь у малойих части [39].Стимуляция экзоцитоза телец Вейбеля-Паладе различными соединениямиможет происходить через два механизма: Ca2+-зависимый (тромбин, гистамин,пептидолейкотриены, компоненты системы комплемента, супероксид-анион,VEGF, cфингозин-1-фосфат, церамиды, пуриновые нуклеотиды) и цАМФ-30зависимый (серотонин, эпинефрин, вазопрессин, пуриновые нуклеотиды), приэтом после активации посредством цАМФ отмечается миграция телец ВейбеляПаладе в перинуклеарную область, что, вероятно, ограничивает их излишнююсекрецию [186, 187].
Кроме того, в процессе цАМФ-зависимого экзоцитозателец Вейбеля-Паладе может усиливаться прочность контактов междуэндотелиоцитамии,соответственно,уменьшатьсяпроницаемостьгематоэнцефалического барьера, при Ca2+-зависимом экзоцитозе, напротив,проницаемость гематоэнцефалического барьера усиливается [187]. Особуюроль экцозитоз фактора Виллебранда под действием тромбина и супероксиданиона с повышением проницаемости гематоэнцефалического барьера можетиграть в формировании вазогенного отека мозга при геморрагическоминсульте.Имеютсясведения,чтооксидазота(NO),вызывающийвазодилатацию и обладающий потенциальным нейропротекторным действием[226], напротив, уменьшает экзоцитоз телец Вейбеля-Паладе, ограничиваясекрецию как фактора Виллебранда, так и совместно локализованных с нимсоединений, обладающих провоспалительным эффектом [145].Особым типом экзоцитоза телец Вейбеля-Паладе является секреция потипу «долгого поцелуя».
Во время данного процесса тельца Вейбеля-Паладеприкрепляютсякклеточноймембранеэндотелиоцитов,коллапсируют,принимая сферическую форму, и образуют пору диаметром до 12 нм, черезкоторуювкровьвыборочновыделяетсялишьчастьсодержимого,преимущественно малой молекулярной массы, при этом фактор Виллебранда,пропептидфактораВиллебранда,идругиекрупныемолекулынесекретируются [20, 117].
Физиологическая роль данного типа экзоцитоза внастоящий момент изучена не полностью, однако, предполагается, что емуподвергается до 25% всех телец Вейбеля-Паладе [20].Мегакариоциты не участвуют в фоновой секреции фактора Виллебранда,и в них синтезируется только высокотромбогенный ВМФВ, который совместнос молекулами адгезии, митогенами, некоторыми факторами свертывания,ингибиторами протеаз направляется в α-гранулы, имеющие округлую форму31[94, 238]. В процессе тромбоцитопоэза α-гранулы перемещаются к перифериитромбоцитов, а при активации их содержимое попадает в плазму крови иактивно участвует во многих процессах, в том числе, в тромбообразовании[133].
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
