Диссертация (1140892), страница 5
Текст из файла (страница 5)
В процессе сплайсинга KIT возможнообразование 2изоформ,характеризующихсяналичиемилиотсутствиемтетрапептидной последовательности глицин-аспарагин-аспарагин-лизин (GNNK),24в части ECD KIT (нуклеотиды 509-513) [96]. При СМ происходит сдвиг в сторонуGNNR – отрицательной изоформы, что ведет к усилению активирующегопотенциала KIT D816V мутации [118].Мутациивгенах,кодирующихбелки,которыеучаствуютвтранскрипцииРоль факторов транскрипции (TF) в развитии ТК описана в исследованияхна мышах или экспериментах in vitro [119].
GATA-1 имеет важное значение вдифференцировке ТК человека и участвует в транскрипции генов FcεRIα и FcεRIα[120, 121]. Однако повышенная экспрессия GATA-1 может привести к нарушениюсозревания ТК [122]. GATA-2 является одним из наиболее распространенных TF вТК кожи [122] и способствует транскрипции KIT, совместно с PU.1. Другиефакторы, такие как GATA-3, SCL (Tal-1), Elf-1 и c-fos, также активноэкспрессируются зрелыми ТК кожи [122]. ТК экспрессируют ген MITF-A(альтернативная изоформа MITF) который регулирует транскрипцию генатриптазы в ТК [123].
Суммируя полученные данные можно сделать следующиевыводы. Зрелые ТК кожи экспрессируют низкие уровни c-fos, PU.1 и C/EBP, новысокие уровни MITF, SCL, GATA-1 и GATA-2. Эти факторы, за исключением cfos, практически отсутствуют в других зрелых миелоидных клетках (то естьмоноцитах и гранулоцитах), что говорит об их специфичности в отношении ТК.Мутации RUNX1, ETV6 и SETBP1выявлены у 23%, 2,5% и 2,5% больных СМ,соответственно [124].Таким образом, в настоящее время роль генетических мутаций примастоцитозе не до конца ясна. Мутации, участвующие в сплайсинге РНК иметилированииДНК,по-видимому,связанысначальнойклеточнойпролиферацией, тогда как другие участвуют в эволюции субклона.
Наличиемутаций SRSF2, ASXL1 и RUNX1 ассоциировано с тяжелым течениеммастоцитоза и высокой смертностью [90]. В будущем необходимо выяснить рольмутаций TET2 и SRSF2 в развитии СМ, поскольку они в ряде исследованийпредшествовали мутациям KIT [113].25Таблица 2 - Генетические мутации при мастоцитозе [125] (адаптирована)ПутьГенПримечаниеСсылкаСигнальныйпутьKIT[96, 126]ETV6Результатом мутации является димеризация рецептора и передачасигнала в отсутствии SCFJAK2 является белковой тирозинкиназой.
Мутация JAK2 V617Fприводиткконститутивнойактивациитирозинкиназы,фосфорилированиюSTAT5ифактор-независимомуростугемопоэтических клетокГен NRAS кодирует мембранный белок (GTP-аза), которыйперемещается между аппаратом Гольджи и плазматическоймембранойЭтот ген кодирует убиквитинлигазу, содержащую RING-домен,необходимую для активации протеосом и деградации белкаЭтот ген кодирует IL-13, иммунорегуляторный цитокин.Полиморфизмпромотора-интерлейкина-13-1112C/Tсвязанссистемным мастоцитозомЛица, несущие полиморфизм Q576R, в результате чего происходитусиление функции в цитоплазматическом домене α-субъединицырецептора IL-4, могут быть относительно устойчивы к мутации/ям,усиливающим функционирование KITГен FIP1L1-PDGFRA кодирует конститутивно активированнуютирозинкиназу, которая соединяет первые 233 аминокислоты FIP1L1с последними 523 аминокислотами PDGFRA тирозинкиназыБелок,кодируемыйэтимгеном,представляетсобойметилцитозиндиоксигеназу, которая катализирует превращениеметилцитозина в 5-гидроксиметилцитозинЭтот ген кодирует эпигенетически модифицирующую ДНКметилтрансферазуИзоцитратдегидрогеназа1катализируетокислительноедекарбоксилирование изоцитрата до 2-оксоглутаратаИзоцитратдегидрогеназа2катализируетокислительноедекарбоксилирование изоцитрата до 2-оксоглутаратаЭтот ген кодирует хроматинсвязывающий белок, необходимый длянормального определения идентичности сегмента в развивающемсяэмбрионеЭтот ген кодирует фермент, участвующий в метилировании гистонови, в конечном счете, подавлению транскрипцииБелок, кодируемый этим геном, является членом семейства сплайсингфакторов, богатых серином/аргинином, которые составляют частьсплайсомыЭтот ген кодирует субъединицу 1 сплайсинг фактора 3b.
Совместно сфактором сплайсинга 3a и 12S РНК образует комплекс малыхядерных рибонуклеопротеинов U2Этот ген кодирует небольшую субъединицу, которая играеткритическую роль, как в конститутивном, так и в энхансер-зависимомсплайсинге РНК путемвзаимодействия между большойсубъединицей и белками, связанными с энхансерамиБелок, кодируемый этим геном, представляет собой гетеродимерныйфактор транскрипции, который связывается с основным элементоммногих энхансеров и промоторовЭтот ген кодирует фактор транскрипции семейства ETSSETBP1SET связывающий белок 1[113]JAK2NRASCBLIL13IL4МетилированиеДНКFIP1L1PDGFRATET2DNMT3IDH1IDH2МодификациихроматинаASXL1EZH2Сплайсинг РНКSRSF2SF3B1U2AF1ТранскрипцияRUNX1[90][127][113][128][129][130,131][113,116][114][114][113,114][113,114][113,114][113][132][132][113][113]261.4.2.2.
Регуляция апоптоза ТК при мастоцитозеДисрегуляция апоптоза ТК играет важную роль в патогенезе мастоцитоза.При АСМ отмечается повышение активности антиапоптотического белка Bcl-2, апри ИСМ – антиапоптотического белка Bcl-X [133].При иммуногистохимическом исследовании биоптатов кожи больныхмастоцитозом выявлено увеличение экспрессии PD-L1 ТК [134]. PD-1 –ингибирующий рецептор, который содержит ITIM.
Мембранный белок PD-1(CD279) экспрессируется T- и B-лимфоцитами, тогда как его лиганд (PD-L1)экспрессируется опухолевыми клетками. PD-L1 также экспрессируют ТК идендритные клетки. Более ранние исследования продемонстрировали, чтоопухолевые клетки уклоняются от иммунного ответа путем блокировки этогосигнального пути [134, 135]. PD-1 активирует нерецепторные фосфатазы, такиекак SHP-1 или SHP-2, которые в свою очередь приводят к снижениюфосфорилирования AKT, способствуя аномальному развитию ТК (LAD2) [135].1.4.2.3. Роль ТК в иммунитетеТК – это эффекторные клетки иммунной системы, расположенные в тканях;в наибольшем количестве в коже, дыхательной системе, желудочно-кишечномтракте и мочеполовых путях; вблизи кровеносных и лимфатических сосудов, атакже периферических нервов [136].Благодаря экспрессии широкого спектра рецепторов и высвобождениюразличных медиаторов, ТК играют ключевую роль в реакциях врожденного иприобретенного иммунитета [137].
ТК экспрессируют на своей поверхностимногочисленные рецепторы, включая рецептор к ФСК (c-KIT), рецепторы киммуноглобулинам (FcRI, FcRI, FcRII), рецепторы комплемента, Tollподобныерецепторы,паттерн-распознающиерецепторы,специфическиерецепторы к нейропептидам, цитокинам и другим воспалительным медиаторам[139, 140]. При активации одного или нескольких рецепторов ТК могут выделятьширокий спектр биологически активных веществ [141, 142].27ТК являются важными клетками в осуществлении защиты противнекоторых бактериальных инфекций. ТК могут инициировать и контролироватьврожденный иммунный ответ на инвазивные возбудители посредством Тоllподобных и паттерн-распознающих рецепторов.
Кроме того, ТК могут выступатьв качестве инициаторов приобретенного иммунитета к патогенам с помощьюмиграции,созреванияи/илифункционированиядендритныхклетокивзаимодействия с T- и B-клетками [138].Самая известная роль ТК – это, несомненно, их эффекторная функция приаллергических реакциях. При реакциях гиперчувствительности немедленного I-готипа, ТК активируются при перекрестном связывании аллергеном близрасположенныхаллерген-специфическихIgE,ассоциированныхсвысокоаффинным IgE рецептором (FcεR1) на поверхности ТК. В результате, усенсибилизированных лиц под воздействием аллергена происходит IgE-зависимаяактивацияТКспреформированныхпоследующимивновьвысвобождениемсинтезированныхбольшегомедиаторов,количествацитокиновихемокинов [143].
Кроме того, возможна IgE-независимая активация ТКразличными триггерами, включая физические факторы, фрагменты комплемента,фактор стволовых клеток, нейропептиды, цитокины, бактериальные продукты(липополисахариды), некоторые яды и токсины и фармакологические препараты[144].Таким образом, при мастоцитозе ТК могут быть активированы IgEзависимыми (аллергены) и IgE-независимыми механизмами, что ведет квысвобождению медиаторов воспаления и цитокинов под воздействием какаллергенов, так и многих других факторов, включая опиаты, миорелаксанты ифизические триггеры.281.4.2.4.
Медиаторы ТКДеятельность ТК опосредована экскрецией медиаторов. Часть из нихсодержится в гранулах, а часть синтезируются в ответ на действие триггерныхфакторов. Стресс является одним из наиболее распространенных провоцирующихфакторов возникновения симптомов у больных СМ [58]. Механизм не до концаясен, хотя некоторые данные свидетельствуют о том, что высвобождение гормонакортикотропин, выделяемого при стрессе, активирует ТК [145].При стимуляции поверхностных рецепторов ТК высвобождают большоеколичество секреторных гранул, содержащих гистамин, серотонин и другиевоспалительныемедиаторы,которыеиграютцентральнуюроль,каквнемедленной, так и в поздней фазе воспалительной реакции [146]. ТК производяттри типа эффекторных клеток: (1) медиаторы гранул ТК (гистамин, гепарин,триптаза и химаза); (2) медиаторы синтезированные de novo, преимущественнолипиды (фактор активации тромбоцитов / PAF), простогландин D2 (PGD2),простогландин E2 (PGE2), лейкотриен C4 (LTC4), лейкотриен B4 (LTB4),лейкотриен D4 (LTD4)); (3) цитокины/факторы роста и хемокины (ИЛ-1, ИЛ-3,ИЛ-5, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-10, ИЛ-13, ИЛ-16, ИЛ-18, M-CSF, гранулоцитарномакрофагальный колониестимулирующий фактор (GM-CSF), фактор некрозаопухолей альфа (TNF-α), TGF-β, фактор роста эндотелия сосудов (VEGF),основной фактор роста фибробластов (bFGF) и другие) [147].
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
