Диссертация (1140892), страница 12
Текст из файла (страница 12)
Клинические методы исследованияКлинические методы исследования включали в себя сбор анамнеза; оценкуклинических проявлений, качества жизни и наличия психосоматическихрасстройств. Во время сбора анамнеза выявляли жалобы; сопутствующуюпатологию, в том числе аутоиммуные заболевания; дебют и продолжительностьболезни; аллергоанамнез; лекарственную непереносимость; наличие приступованафилаксии и их провоцирующий фактор; семейный анамнез и тяжестьсимптомов, опосредованных высвобождением медиаторов ТК.2.2.1. Оценка симптомов, опосредованных медиаторами тучных клетокВ первую очередь оценивались различные симптомы, свидетельствующие опоражении органов и систем:– кожные, в частности зуд, внезапное покраснение лица и/или всегокожного покрова;– опосредованные поражением ЖКТ, такие как диарея и боли вэпигастрии;– психосоматическиерасстройства,аименноголовныеболи,утомляемость, нарушение концентрации, бессонница;– костно-мышечные, в частности боли в мышцах и/или суставах.Тяжесть симптомов оценивалась по 4-балльной шкале, где 0 – совершенноне беспокоит; 1 – незначительно (умеренно, редко); 2 – в средней мере (умеренно,часто); 3 – сильно (тяжело, редко); 4 – очень сильно (тяжело, часто).2.2.2.
Оценка степени поражения кожного покрова у больныхмастоцитозомПоражение кожи документально подтверждено фотографией каждогопациента. Оценивали распространенность, средний и максимальный диаметрвысыпаний, плотность расположения элементов относитеьно друг друга [184].Распространенность поражений определяли при помощи правила «ладони», гдеплощадь ладони составляла около 1% поверхности тела, и правила «девяток», где67площадь поверхности каждой части тела составляла 9% или кратное этому числу(голова и шея – 9%, каждая верхняя конечность – 9%, грудь – 9%, живот – 9%,задняя поверхность туловища – 18%, каждое бедро – 9%, каждая голень со стопой– 9%, промежность и наружные половые органы – 1%). Плотность расположениясыпи вычисляли с помощью определения отношения площади, занимаемой всемиэлементами сыпи, к общей площади данного участка (в наиболее пораженномучастке размером с ладонь) (Рисунок 7).Распространенность поражения кожи была сопоставлена с возрастомбольного при дебюте заболевания и его длительностью, тяжестью симптомов,вовлечением в патологический процесс внутренних органов, уровнем триптазы всыворотке крови и степенью поражения костного мозга.Рисунок 7 – Определение плотности расположения сыпи на примере пациентов,вошедших в исследование: a) 1%; b) 25%; c) 50%; d) 97%682.2.3.
Опросник для оценки качества жизни больных мастоцитозом(MC-QoL) [285]MC-QoL (Mastocytosis Quality of Life Questionnaire, опросник для оценкикачества жизни больных мастоцитозом; Siebenhaar и соавт., 2016, Колхир иПятилова, 2017, Приложение А [285]) является специфическим опросником дляоценки качества жизни больных мастоцитозом. Это краткий, валидизированный инадежный метод определения нарушения качества жизни у таких пациентов.Опросниксостоитиз27вопросови4доменов(симптомы,функционирование/социальная жизнь, эмоции, кожа). Общая сумма баллов 100.Пациентам было рекомендовано внимательно прочесть каждый вопрос и отметитьодин наиболее подходящий из пяти вариантов ответа.
Возможна оценка суммыбаллов каждого из четырех доменов (Таблица 11), а также общей суммы.Каждый вопрос, на который отвечает пациент, оценивается от 0 до 4 балловв зависимости от выбранного варианта ответа. I-й вариант ответа получает 0баллов, II-й вариант – 1 балл, III-й вариант – 2 балла, IV-й – 3 балла и V-й вариант– 4 балла. Минимальная и наибольшая сумма баллов составляют 0 и 100; чемвыше показатель, тем ниже качество жизни.
Сумма баллов, как общая, так икаждого домена, вычисляются по следующей формуле (Рисунок 8):Рисунок 8 – Формула для расчета процентного показателя качества жизнибольных мастоцитозом по шкале MC-QoLОценка суммы баллов домена не должна рассчитываться, если в этомдомене более одного вопроса остались без ответа. Оценка общей суммы баллов нерассчитывается при отсутствии ответов более, чем на 6 вопросов (25% от общегоколичества вопросов).69Таблица 11 – Структура опросника MC-QoL [285] (адаптирована)ДоменВопросыСимптомы4. Диарея5. Утомляемость или вялость6.
Головные боли7. Боли в мышцах или суставах8. Нарушение концентрации внимания11. Сон15. Усталость в течение дня17. Понижение работоспособности24. АпатичностьСоциальная жизнь /функционирование9. Школа/университет/работа10. Спорт/физическая активность12. Половая жизнь13. Организация досуга14. Межличностные отношения16. Еда и напитки18. Обременяли ли вас симптомы19. Выбор одежды22. Дискомфорт в обществеЭмоции20. Страх пережить анафилактический шок21. Страх подвергнуться неправильному лечению23. Страх перед дальнейшим течением заболевания25. Чувство покинутости наедине со своим заболеванием26. Беспокойство27.
ГрустьКожа1. Зуд2. Покраснение3. Приливы702.2.4. Дерматологический индекс качества жизни (DLQI) [286]Оценку качества жизни проводили также с помощью валидизированногоопросника DLQI (Dermatology Life Quality Index, ДИКЖ, дерматологическийиндекс качества жизни; Finlay и Khan, 1994, Кочергин, 2001, Приложение Б [3,286]), являющегося эффективным инструментом оценки качества жизни у всехпациентов с дерматологическим заболеванием.Каждый вопрос оценивается по шкале от 0 до 3 баллов, где 3 – оченьсильно, 2 – достаточно сильно, 1 – незначительно и 0 – нет.
При ответе на VII-йвопрос «да» – 3 балла, «нет» – 0 баллов.Индекс рассчитывался путем суммирования баллов по каждому вопросу.Результат варьировался от 0 до 30 баллов. Чем больше сумма баллов, тем болееснижено качество жизни пациента вследствие заболевания (Таблица 12).
Дляопределения процентного соотношения необходимо полученную сумму балловразделить на 30.Таблица 12 – Трактовка значения индекса DLQI [286]Значение индексаТрактовка0-1заболевание не влияет на жизнь пациента2-5заболевание оказывает незначительное влияние на жизньпациентазаболевание оказывает умеренное влияние на жизнь пациента6-1011-2021-30заболевание оказывает очень сильное влияние на жизньпациентазаболевание оказывает чрезвычайно сильное влияние на жизньпациента2.2.5.
Шкала депрессии Бека (BDI) [287]Уровень депрессии оценивался с помощью определения индекса депрессииБека (Beck Depression Inventory, BDI, Beck, 1961, Тарабрина, 2001, Приложение В[4, 287]). Больному было рекомендовано выбрать наиболее подходящее71утверждение для каждой из 21 группы. Каждый ответ оценивался по шкале от 0до 3 баллов.
Сумма баллов может варьироваться от 0 до 63 (Таблица 13).Таблица 13 – Трактовка значения индекса BDI [287]Значение индексаТрактовка0-9отсутствие депрессивных симптомов10-15легкая депрессия (субдепрессия)16-19умеренная депрессия20-29выраженная депрессия (средней тяжести)30-63тяжелая депрессия2.2.6. Госпитальная шкала тревоги и депрессии (HADS) для оценкипсихосоматического статуса [288]С помощью госпитальной шкалы тревоги и депрессии HADS (HospitalAnxiety and Depression Scale, HADS, Snaith и Zigmond, 1983, Сыропятов исоавт., 2003, Приложение Г [5, 288]) был определен уровень тревоги и депрессиибольного. Шкала включает 14 утверждений (7 для оценки тревоги и 7 для оценкидепрессии) с 4 вариантами ответов.
Больному необходимо выбрать наиболееподходящий вариант ответа, соответствующий от 0 до 3 баллов. По результатамзаключительной суммы баллов, а именно 8 и выше (Таблица 14), по каждой части(тревога/депрессия) принималось решение о необходимости консультацииневролога или психотерапевта.Таблица 14 – Трактовка значения шкалы HADS [288]Значение шкалыТрактовка0-78-10отсутствие достоверно выраженных признаков тревоги илидепрессиисубклинически выраженная тревога или депрессия11 и болееклинически выраженная тревога или депрессия722.3. Лабораторные методы исследованияЛабораторные методы включали в себя общий анализ крови, развернутыйбиохимический анализ крови и исследование сывороточной триптазы.ДляобщегоИсследованиеклиническогопроводилианализаавтоматическимиспользоваливенознуюметодомгематологическомнакровь.анализаторе «JENSKulter» (США) в межклинической лаборатории ФГАОУ ВОПервый МГМУ им. И.М.
Сеченова Минздрава России (Сеченовский Унивеситет).Определяликоличестволейкоцитов,эритроцитов,тромбоцитов,уровеньгемоглобина, гематокрит, лейкоцитарную формулу и СОЭ.Для биохимического анализа также использовали венозную кровь.Исследование проводили в межклинической биохимической лаборатории ФГАОУВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (СеченовскийУнивеситет) с использованием автоанализатора «Konelab 30i» (Thermoelectron,Швейцария).
Определяли показатели состояния работы внутренних органов,такие как общий билирубин, АСТ, АЛТ, ГГТ, глюкоза, креатинин, щелочнаяфосфатаза, электрофорез белков, холестерин, триглицериды, ЛДГ.Другие исследования, включая коагулограмму, IgA, IgM, IgG, общий IgE,ревматоидный фактор, С-реактивный белок, проводили по показаниям вмежклинической коагулологической и иммунологической лабораториях ФГАОУВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (СеченовскийУнивеситет).2.3.1. Исследование триптазы кровиУровеньконсультации.триптазыДанноеопределялсяисследованиеувсехпациентов припроводилосьнабазепервичноймедицинскойлаборатории "Гемотест".
Концентрацию триптазы в крови определяли методомиммунофлюоресценции на трехмерной пористой твердой фазе (технологияImmunoCAP, «Pharmacia Diagnostics AB»), являющимся золотым стандартомдиагностики, принятым ВОЗ и FDA.По результату исследования все пациенты были разделены на 3 группы:73I-я – уровень триптазы менее 11 нг/мл, что соответствует норме;II-я – уровень триптазы 11-20 нг/мл (умеренно повышен);III-я – уровень триптазы более 20 нг/мл (высокий, малый критерий СМ).2.4. Молекулярно-генетическое исследование мутации KIT D816VВзятие крови для последующего молекулярного исследования проводилсятакже при первичном обращении. Анализ всех образцов осуществлялся методомпрямого секвенирования.У части пациентов было проведено исследование мутации D816V спомощью высокочувствительного аллель-специфического количественного ПЦРанализа (ASOqPCR, Allele-specific quantitative PCR), одобренного ECNM [28].Образцы периферической крови собирали в 9 мл пробирки с ЭДТА.
ДалееэкстрагировалиДНКизнефракционированныхлейкоцитов(стандартныйпротокол гемолиза NH4Cl) в объеме 100 мкл буфера для элюирования сиспользованием прибора MagNA Pure LC с изоляцией ДНК MANA Pure LC Kit I(Roche Applied Science, Мангейм, Германия). Негативным признавался тест призначении порогового цикла Ct ниже 44. Долю мутантной фракции выражали в %,рассчитывая по формуле (Рисунок 9): (количество мутантного аллеля/общееколичество аллелей гена KIT) х 100, где количество мутантного аллеля KITD816V рассчитывается как 10((D816VspecificassayCt-43)/(-3.47)) и общее количество аллелейгена KIT 10((TotalalleleassayCt-41)/(-3.32)).Рисунок 9– Формула для расчета доли мутантной фракции [289] (Адапирована)Далее проводился сравнительный анализ этих двух методов с целью оценкичувствительности и прогностической ценности исследования.742.5.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
