Диссертация (1140869), страница 6
Текст из файла (страница 6)
На 1-е сутки ЭГИ у неустойчивых крыссосуды коры деформируются, имеют колбовидные расширения, стенка истончена,частично разрушена, отмечается периваскулярный отек. У устойчивых крыссосуды коры сужены, лишены просвета, периваскулярный отек нерезко выражен,имеются гиперхромные и ишемически измененные нейроны.
На 3-и сутки унеустойчивых крыс выраженность периваскулярного и перицеллюлярного отекаувеличивалась, погибала часть корковых нейронов. У устойчивых крыс отмечалисьгипоксические изменения сосудов и нейронов с элементами компенсаторноприспособительной реакции: расширение просвета сосудов, полнокровие,частичная агглютинация эритроцитов. Изменения наиболее значимы на 3-и суткиЭГИ. На 7-е сутки у неустойчивых крыс в коре выявлены дистоническиизмененные микрососуды с зональными повреждениями, пристеночными стазами,гиалиновыми отложениями. У устойчивых крыс на 7-е сутки обнаруженымикрососуды с неравномерным уменьшением просвета и пристеночным стазом,полиморфные, в том числе нормохромные нейроны.Описаны изменения печени в условиях ЭГИ [79]: на 1-е сутки в синусоидахпечени обнаружены единичные клетки лимфоидного ряда.
В центральных венах скопления форменных элементов крови. В портальных трактах наблюдаласьмононуклеарная инфильтрация. На 3-и сутки в периферических отделах дольки26печени отмечены признаки регенерации гепатоцитов, появлялись двухядерныегепатоциты. В синусоидах увеличивалось число мононуклеарных клеток. На 7-есутки признаки регенерации были отмечены в 2/3 гепатоцитов, выявлялсямелкокапельный стеатоз.В печеночных лимфатических узлах при ЭГИ картинаизменений гемомикроциркуляции также выходит на первый план [39]. Вкапиллярах коркового и мозгового вещества узлов наблюдается сепарацияэритроцитов от плазмы крови, образование «монетных столбиков», диапедезныекровоизлияния.
Площади синусов мозгового вещества печеночных лимфоузловувеличивается. Подобные изменения гемомикроциркуляции описаны при ЭГИ и втимусе [133, 138]. В условиях моделирования ГИ участки тимуса, занимаемыесосудами, увеличиваются (особенно у устойчивых крыс). Отмечено утолщениекапсулы тимуса, инфильтрация междольковых перегородок лимфоцитами.Уменьшение массы тимуса при ЭГИ в большей степени выражено у неустойчивыхкрыс.В условиях ЭГИ меняется и клеточный состав лимфоидных органов.
Приизучении реакции печеночных лимфатических узлов на ЭГИ у устойчивых крыс на1-е сутки площадь печеночных лимфатических узлов увеличивается в 1,4 раза, на3-е сутки - остается на уровне значений 1-х суток, а на 7-е сутки - уменьшается в1,2 раза, не достигая нормы [40]. На 1-е сутки плотность распределения клеток вцентрах размножения, мантии лимфоидных узелков и паракортикальной зонеувеличивалась. В мантии узелков и мякотных тяжах - за счет малых лимфоцитов, вцентрах размножения - за счет малодифференцированных клеток, клеток скартинами митоза. Растет число макрофагов, деструктивно измененных клеток.Такие же процессы отмечаются в паракортикальной зоне. На 3-и сутки здесьпродолжается накопление малых лимфоцитов. Плазматические клетки единичны вмозговых синусах, в остальных зонах их число выше нормы.
Бласты и большиелимфоциты почти исчезают. На 7-е сутки ЭГИ в центрах размножения, мантииузелков, паракортикальной зоне общее число клеток уменьшается до нормы. Число27плазматических клеток в паракортикальной зоне ниже нормы. В центрахразмножения узелков накапливаются макрофаги.При исследовании тимуса в условиях ЭГИ обнаружено уменьшение корковомозгового индекса, в некоторых случаях стирание границ между корковым имозговым веществом [136, 137]. На 1-е, 3 и 7-е сутки ЭГИ число лимфоцитов втимусе меньше контрольного.
Число деструктивно измененных клеток в корковомвеществе возрастало. Уменьшение числа малых лимфоцитов автор связал сускорением дифференцировки малых кортикальных тимоцитов в медуллярные,усилением их миграции. В корковом веществе увеличивалось количество бластови больших лимфоцитов [133].Отмечено, что реализация адаптационных механизмов при инсультеприводит к относительному дефициту супрессорных влияний [133], о чем говоритуменьшениесодержаниялимфоцитоввкровипациентов,увеличениеотносительного содержания активированных СПЗ-НЬА БШ- лимфоцитов,повышение иммунорегуляторного индекса на 1-е сутки инсульта. При развитииаутоаллергии сначала разворачивается иммунный ответ по клеточному, затем погуморальному типу (увеличение концентрации ИЛ-1Р, ФНО-а, ФНО-Р, ИНФ-у вкрови на 1-е сутки, увеличение концентрации ИЛ-10 и снижение показателейклеточного иммунитета на 21-е сутки).
Концентрация нейроспецифического белка8-100вкровиповышена,зависитоттяжестинарушениямозговогокровообращения и коррелирует с уровнем антимитохондриальных антител [134,135]. Выраженность неврологической симптоматики в условиях ЭГИ не одинаковау крыс с различной стрессоустойчивостью [57, 68]. Устойчивые крысыхарактеризуются более высокой скоростью восстановления неврологическогостатуса. На 1-е сутки ЭГИ у крыс наблюдали выраженные фокальныеневрологические симптомы: парез передней лапы, противоположной очагупоражения у устойчивых крыс по шкале Menzies оценивали в 1,4, а у неустойчивых- в 1,9 балла.
На 3 сутки выраженность неврологического дефицита уменьшалась у28крыс обеих групп (до 1,2 и 1,6 баллов). К 7-м суткам неврологические симптомы уустойчивых крыс регрессировали, а у неустойчивых нарастали (до 1,7 баллов).Таким образом, научные данные дают основание полагать, что лимфоидныеструктуры стенки трахеи активно реагируют на моделирование инсульта, иукрепить гипотезу о неодинаковой реакции лимфоидной ткани стенки трахеи укрыс с различной устойчивостью к стрессу в условиях эксперимента. Изучениеморфологии лимфоидной ткани стенки трахеи при ЭГИ является актуальным всвете отсутствия данных по этому вопросу, а также ввиду клинической значимоститаких данных для формирования новых алгоритмов терапии и профилактикибронхолегочных осложнений инсульта.29ГЛАВА 2.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ2.1 Материал и объект исследованияМатериалом для исследования служила трахея 98 крыс-самцов Wistar весом250 - 300 г в возрасте 4-6 месяцев. Животные были взяты из питомника РАМН«Столбовая». Исследования проводились на базе кафедры анатомии человека икафедры нормальной физиологии ФГАОУ ВО ПМГМУ им. И.М.
Сеченова ввесеннеевремягода,чтобыисключитьвлияниесезонныхколебанийгормонального статуса. Перед опытом крысы содержались 10 дней в карантине, по10 особей в каждой клетке, при свободном доступе к воде и пище, в условияхестественногоосвещения.Приработесживотнымируководствовалисьположениями приказов Минвуза СССР № 742 от 13.11.84 «Об утверждении правилпроведения работ с использованием экспериментальных животных» и № 48 от23.01.85 «О контроле за проведением работ с использованием экспериментальныхживотных», требованиями Европейской конвенции по защите экспериментальныхпозвоночных животных (от 18 марта 1986 г.).2.2 Методы исследованияТестирование в «открытом поле»Для оценки прогностической устойчивости крыс к эмоциональному стрессупроводили предварительное тестирование животных в «открытом поле». Открытоеполе - освещенная (100Вт) круглая арена (диаметр 90 см, стенка 40 см), пол которойразделен радиальными и круговыми линиями на 37 секторов.
С помощьюпрограммы «Open Field» («Открытое поле») регистрировали латентные периодыпервого перемещения и выхода крысы в центр поля, горизонтальные амбуляции(количество пересеченных животным периферических и центральных секторовполя), вертикальную активность (количество периферических и центральныхстоек), исследовательскую активность (заглядывание в норы), время грумминга,количество дефекаций [67]. Всех крыс тестировали в «открытом поле» в течение 3минут, в одно и то же время с 10-00 до 13-00 часов (для устранения влияниясуточных ритмов на активность). Устойчивость крыс к стрессу оценивали по30величине индекса активности [67], для вычисления которого сумму числапересеченных периферических и центральных секторов, периферических ицентральных стоек, а также исследованных объектов делили на сумму латентныхпериодов 1-го движения и выхода животного в центр открытого поля.
Из 150 крысдля эксперимента было отобрано 49 устойчивых к стрессу крыс (ИА от 2,25 до 5,8)и 49 неустойчивых к стрессу крыс (ИА от 0,25 до 0,79), амбивалентные крысы изэксперимента исключались. Как устойчивых к стрессу крыс (УСК), так инеустойчивых к стрессу крыс(НСК) разделили на группы: интактная (норма),контрольная (ложная операция) и экспериментальная (ЭГИ).
В контрольных иэкспериментальных группах выделили 3 подгруппы в соответствии со срокамивыведения из эксперимента (1,3,7-е сутки после ложной операции или ЭГИ.Дизайн исследованиястрессоустойчивостьгруппаустойчивые к стрессунормаподгруппа7контрольЭГИнеустойчивые к стрессуКоличество крыс1 сутки73 сутки77 сутки71 сутки73 сутки77 сутки7норма7контрольЭГИ311 сутки73 сутки77 сутки71 сутки73 сутки77 сутки7Моделирование геморрагического инсультаНаркотизированныхкрыс(хлоралгидратиз расчета по400мг/кгвнутрибрюшинно) помещали в стереотаксический аппарат в целях иммобилизациии более точного введения крови в головной мозг.















