Диссертация (1140866), страница 6
Текст из файла (страница 6)
Вместе с тем, отмечается достоверное преобладание кокковой(Streptococcusspp,Staphylococcusspp.),анаэробной(Neisseriaspp,Klebsiella spp) и грибковой (Candida spp) флоры [35-37, 66].Наличие Candida albicans, в частности, расценивают как маркернедостаточности местного иммунитета слизистой полости рта у наркоманов.В связи с развитием вторичной иммунной недостаточности для наркомановхарактерны также частые рецидивы герпетической инфекции [118, 119,121, 132].Микрофлора пародонта у наркоманов с большим стажем приеманаркотиков по своему составу также значительно отличается от выявляемойу здоровых лиц.
В 30% случаев обнаруживаются пиогенные кокки –St. Pyogenes и Staph. aureus. Условно-патогенная микрофлора у наркомановпредставлена в основном Candida albicans, Escherichia coli, родом Klebsiella иProteus, Pseudomonas aeruginosa. В зависимости от стажа приема наркотиковтакже определяются различия в микробном пейзаже полости рта. Так, убольных с небольшим стажем наркозависимости среди условно-патогенныхмикроорганизмов появляются представители рода Proteus, тогда как унаркоманов со стажем выявляются микроорганизмы рода Klebsiella иEscherichia coli [112, 119, 121, 159].30Для определения микрофлоры полости рта в нaстоящее времяприменяется целый ряд методов – микробиологические, иммунологические,биохимические и цитологические. Так, для изучения качественного составамикрофлоры определяют микроколонии или микробные клетки примикроскопировании.
Путем посева на селективные и неселективные среды споследующим подсчетом колоний микроорганизмов дают количественнуюоценку микрофлоры и также при выборе метода лечения оценивaютчувствительностьмикрофлорыклекaрственнымпрепаратам.На сегодняшний момент были разработаны и внедрены в лабораторнуюпрактику много новых методов изучения микробной среды, такие какпроточнаяцитометрия,серологическиеисследования,анализбелков,сравнение ДНК-последовательностей и др. Однако многие эти методытребуют приготовления бактериальных культур, а это значительно удлиняетвремя анализа (проточная цитометрия), к тому же после культивированияневозможно определить начальную концентрацию микроорганизма в образце,определить соотношение живых и неживых микробов.
Биохимическиеметоды, которые основаны на определении специфических для каждого типаклеток соединений (ферментов, витаминов, кислот и пр.), также нeльзясчитать полностью пригодными дляидентификaции, из-за сходствахарактеристик многих микроорганизмов между собой. Относительно новымметодомдляидентификацииМасс-спектрометрсoртируетбактериймoлекулыявляетсяклеткимасс-спектроскопия.посоотношениюмолекулярная масса/заряд и сoставляет характеристические наборы значенийдля каждoго типа клетoк. Этот метoд также ограниченнo гoден длядиагностики, поскoльку клетки разных видов микроорганизмов частообладают очень сходными мoлекулами, а кoличество этих молекул можетсильнoварьироватьсяВысокоспецифичныминаразныхметодамистадияхопределенияклетoчногомикрoбныхцикла.антигеновявляются иммуноблoттинг и полимеразная цепная реaкция, но и они имеютсвои недостатки.
При иммуноблоттинге антигены возбудителя разделяют с31помощью электрофореза в полиакриламидном геле, а потом переносят их изгеля на специальную мембрану и проявляют с помощью иммуноферментногометода анализа. Многие фирмы выпускают эти полоски с уже нанесеннымиантигенами. На эти полоски наносят исследуемый материал.
Затем, послеинкубации, очищают от несвязавшихся антител больного и добавляютсыворотку против иммуноглобулинов человека, меченную ферментом.Образовавшийся на полоске комплекс выявляют добавлением хрoмогенногосубстрата, изменяющего oкраску под действием фермента.Полимеразнаяцепнаядиагностики,высокаяпозволяютбольшойсреакция(ПЦР)чувствительностьдолейивероятности–методмолекулярнойспецифичностьобнаруживатькоторогоединичныевозбудители в биологическом материале на основе их генетическойинформации.
Сущность метода заключается в том, чтобы с помощьюспециальногоферментаДНК-полимеразывискусственныхусловияхувеличить в объеме определенную микробную среду. Для этого многократнопреумножают имеющийся ДНК-материал. Таким образом, при наличиипатогенного микроорганизма в образце его количество будет увеличено засчет биохимических лабораторных манипуляций, и бактерию не составиттруда обнаружить в микроскоп [44, 116].Таким образом, можно отметить, что у наркозависимых пациентовотмечается местное и общее, специфическое и неспецифическое подавлениеиммунного статуса организма на фоне дисбиотических проявлений в полостирта, выраженность которых напрямую зависит от сроков применениянаркосодержащих препаратов.1.7.
Особенности состояния слюнных желез у наркозависимыхпациентов. КристаллографияГипосаливацияиксеростомияпризнаныобычнымиявлениями,сопутствующими хронической наркотизации и увеличивающимися по мере32нарастания продолжительности срока употребления наркотиков [106, 146].Особеннаявыраженностьэтихявленийотмеченаприупотреблениигероина [169].Гипосаливацияпервоначальновызываетсяпрямымиопосредствованным действием наркотиков на адренергические рецепторы, чтовызывает сосудистый спазм и уменьшение секреции. При этом, несмотря на то,что визуальные изменения желез при небольшом сроке употребления опиоидовотсутствуют, структура слюнной железы меняется патогистологически [35, 50,66, 134, 142].
При более продолжительном сроке употребления этипервоначальные признаки интерстициального отека, дистрофии, десквамациии регенерации эпителиальных клеток на фоне очагов продуктивноговоспаления, сменяются нарастающими процессами атрофии эпителия, склерозаилипоматоза,соотношениядистрофииислизеобразующихсекреторногоидисбаланса(нарушениембелковопродуцирующихклеток)спереходом воспалительного инфильтрата на капсулу железы и окружающуюжировую ткань [98, 106].Патогистологические изменения сопровождаются соответственныминарушениями функции слюнных желез: снижается скорость секреции и рНслюны, уровень неорганического фосфора, коэффициент поверхностногонатяжения, увеличиваются вязкость и количество осадка, повышаются уровенькальция, Са/Р коэффициента и количества белка [106].
Снижение рН, атакже изменениебиохимическогосоставаспособствуют нарушениюзащитной, бактерицидной, минерализирующей, транспортной и прочихфункций слюнного секрета. Объем секрета околоушных слюнных желез, вчастности, снижается в среднем в 2 раза, по сравнению с нормой [13, 41, 84,106, 138].Изменение состава слюны, выделяемой слюнными железами, снижениеее количества способствует снижению гигиены, а также развитию в полостиртаразличныхпатологическихсостояний.Всовокупностисэтим,несоблюдение элементарных требований гигиены полости рта, а также общая и33местная иммунная недостаточность, характерные для опиоидзависимыхнаркоманов, ведут к существенным изменениям микробиоценоза полости рта,что демонстрируется увеличением представительства условно-патогенной ипатогенной флоры на фоне уменьшения или отсутствия нормальныхсапрофитов слизистой оболочки полости рта [35, 66, 84, 121].Теориякристаллизацииперенасыщенныхминеральныхрастворовхорошо разработана в физической химии и используется для решения многихприкладных задач, чего, сожалению, нельзя констатировать относительнокристаллообразования в крови, лимфе и разнообразных секретах и выделенияхчеловеческого организма как in vivo, так и in vitro.
Между тем использованиеэтого перспективного направления исследований для медицины, в том числеприменительно наркозависимым пациентам в доступной нам литературе мы невыявили [15, 59].Между тем диапазон информативности показателей слюны очень широк.В первую очередь биохимический анaлиз слюны поможет выявить у человекaдисбактериоз полости рта, кoтоpый присутствует при таких заболеваниях, каккариес, стоматит, гингивит, болезни желудочно-кишечного тракта. Возможнаэкспресс-диагностика таких заболеваний, как ВИЧ или гепатит, болезнилегких. Помимо этого, в слюне находятся специфические белки, которыеявляются индикаторами риска возникновения онкологических заболеваний,болезней Альцгеймера, Паркинсона, различных генетических поражениях итакже маркируют наличие сахарного диабета.Состав слюны практически идентичен составу плазмы крови. Однакосдать ее намного проще, чем кровь.
Современные методы анализа слюны,популярные в настоящее время: биохимический, анализ на ДНК, анализ наПЦР, на туберкулез, на содержание различных инфекций, ВИЧ.В связи с высокой чувствительностью и специфичностью, анализкристалло- и тезиограмм в последние десятилетия находит всё большееприменение в качестве нового, перспективного метода объективной оценкиэффективности проводимого лечения, экологии среды обитания, для уточнения34патогенетическойсущностизаболеванийчеловека,животныхирастений [68, 78].Метод исследования, привлекающий простотой своего исполнения инадёжностьюрезультатов,заключаетсявсравнительномизучениикристаллических структур той или иной биологической жидкости у здоровыхлюдей и страдающих той или иной патологией.
При этом могут использоватьсясредства свето- и электронно-оптической, поляризационной, люминесцентной,флуоресцентной микроскопии и др. В общем случае определяют наличие,протяжённость и характер зон кристаллизации, число кристаллизационныхцентров и характер кристаллического рисунка, фиксируют также форму иориентацию кристаллов. В результате, проведённый сравнительный анализпозволяет выявлять определённые морфотипы кристаллизации, которыеспецифичны для различных заболеваний и могут быть использованы вдифференциальной диагностике последних.Дегидратация любой биологической жидкости имеет своим результатомдальнейшее «упорядочивание» системы, изначально обладающей основнымисвойствами жидких кристаллов [54], что существенным образом повышаетвозможности анализа, позволяя замечать даже незначительные отклонения еёсвойств, не регистрируемые биохимическим путём [82, 110].В научном употреблении в настоящее время имеются два основныхспособаполучениякристаллическихструктур:методвысушиваниябиологической жидкости на подложке [97, 102] и метод тезиографии,основанный на изучении форм кристаллов кристаллообразующего вещества(NaCl, спиртовой раствор яичного лецитина и др.) при добавлении к немубиологического субстрата [78, 101].При наличии того или иного заболевания изменения морфотипакристаллизациибиологическойжидкостиобычнохарактеризуетсянарушениями ориентировки кристаллических структур, что проявляетсяразнообразием вторичных форм кристаллов (ромбовидные, игольчатые,кустовидные, дендровидные, атипичные).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
