Диссертация (1140795), страница 9
Текст из файла (страница 9)
У пациентов с неразвивающейся беременностью, также как ипри стимулировании ФМА был отмечен самый низкий ответ.55Таблица 6Описательная статистика для коэффициентов праймирования,активации и затухания респираторного взрываМежквартильныйКоэфициентыМедианаKd УПБ0,530,38-0,75Kd К10,420,33-0,53Kd К20,350,27-0,43Kd К30,120,08-0,39Kd НБ0,370,32-0,52Какт УПБ2112,45-37,05Какт К114,99-23,5Какт К210,97-12,2Какт К31,50,65-4,5Какт НБ10,37,4-28,5Кпрайм УПБ5,32,5-9,6Кпрайм К14,92,6-11,3Кпрайм К22,82-4,4Кпрайм К31511,3-20,4Кпрайм НБ5,33,6-11,7размахКоэффициент затухания респираторного взрыва нейтрофилов оказалсястатистически значимо выше у больных с УПБ по сравнению с группамиконтроля К1, К2, К3 (рис.10) (p < 0,01), у К1 по отношению к К3 (р < 0.02)5632*#1**янанвныермееррпезабаомгррУонНУПБ1Кареиеыеыннемеребен2КК3звиПвоасюлещавяысякибдеырш-таь0Рис. 10. Сравнительная характеристика коэффициента затухания респираторноговзрыва по группам.
Значения представлены в виде медиана ± межквартильный размах.ДляоценкиразличениймеждугруппамииспользовалитестМанна-Уитни.*относительно УПБ критерий Манна-Уитни, p < 0,01; # К1 vs К3 (р<0,01);Таким образом, достоверные различия были у беременных с угрозойпрерывания и физиологическим течением беременности, что указывает наповышенную радикал-продуцирующую способность нейтрофилов во времябеременности.Коэффициент активации был достоверно выше в группе УПБ посравнению с К3 и К2 (p < 0,0001). У группы контроля К2, К1 и НБдостоверно значимые различия были выше по отношению к К3 (р < 0,002)(рис .11).57**##*Рис. 11.
Сравнительная характеристика коэффициента активации нейтрофилов погруппам. Значения представлены в виде медиана ± межквартильный размах. Для оценкиразличений между группами использовали тест Манна-Уитни. *относительно К3критерий Манна-Уитни, p < 0,01; К1 vs К2 (р<0,01); НБ относительно К2 (р<0,003).Таким образом, коэффициент активации респираторного взрыва былдостоверно ниже у пациентов после выкидыша, что говорит об истощениирадикал - продуцирующей способности нейтрофилов.Коэффициент праймирования был достоверно выше во всех группахбеременных женщин относительно К2.
Самые высокие показатели Кпраймбыли у пациентов после выкидыша (рис.12).58К п р а й м = A ф М А /A с п о н т2520*15***105янанвныермееррпезабаомгррУонБ1НУПКреиеыеыннемеребен2К3КазвиПвоасюлещавяысякибдеырш-таь0Рис.12.Сравнительнаяхарактеристикакоэффициентапраймированиянейтрофилов по группам. Значения представлены в виде медиана ± межквартильныйразмах. Для оценки различений между группами использовали тест Манна-Уитни.*относительно К3 критерий Манна-Уитни, p < 0,01; К1 vs К2 (р<0,01); НБотносительно К2 (р<0,003).На основании анализа ХЛ кривых можно предположить, что во времябеременности, как физиологической, так и протекающей на фоне угрозыпрерывания, нейтрофилы находятся в состоянии прайминга.
Во всех группахКпрайм был достоверно выше, по сравнению с небеременными женщинами.Вгруппепациентокпослесамопроизвольноговыкидышаинтенсивность спонтанной ХЛ выше, а Какт ниже по сравнению с группамиК1 и К2 (критерий Манна-Уитни, p < 0,001), что говорит о высокойактивности нейтрофильного звена иммунной системы у женщин перед исразу после выкидышем.
В результате стимуляции фМЛФ у данной группезаметноснижениеответа,чтоуказываетнаистощениерадикал-продуцирующей способности нейтрофила после выкидыша. Коэффициентзатухания респираторного взрыва нейтрофилов, а также ответ на стимулы,59оказался статистически значимо выше у беременных с угрозой прерывания.У пациентов после самопроизвольного аборта Кd достоверно ниже, чем вгруппе с физиологической беременностью. Эти данные свидетельствуют онапряженности иммунитета у женщин, беременность которых протекает нафоневыраженнойугрозы,иявляютсявозможнымипредикторамипреждевременной родовой деятельности. Снижение коэффициента затуханияу пациентов после выкидыша, вероятно, указывают на функциональнуюнедостаточность и истощение нейтрофилов.В группе женщин с неразвивающейся беременности показателиудельной,интегральнойспонтаннойистимулированнойактивностинейтрофилов были достоверно ниже, чем в остальных группах, что указываетнаиммуносупрессивноесостояние,препятствующеесократительнойактивности матки.
Также у 2 пациенток из группы УПБ с низким ответом настимулы в последующем происходило замирание плода. Таким образом,являетсянеоспоримымвкладактивированныхнейтрофиловвпатофизиологические процессы, приводящие к прерыванию беременности.Клинический пример (рис.13)Пациентка 38 лет, поступила в гинекологическое отделение сдиагнозом:беременностьневынашивание.5-6нед.НаследственнаяДвойня.тромбофилия.ОАГА.МиомаПривычноематки.Припоступлении предъявляла жалобы на тянущие боли внизу живота, скудныесукровичные выделения из половых путей.
Проводилась сохраняющая,гормональная, гемостатическая терапия. По данным ультразвуковогоисследованиявсроке9-10недельбеременностидиагностировананеразвивающаяся беременность 9-10 нед, анэмбриония во втором плодномяйце.Произведеновыскабливаниеполостиантибактериальной, противовоспалительной терапии.60маткинафонеТаблица 7Описательная статистика в динамикеДанные при первичном Динамика через 1 месяцанализеУдельная спонтанная2,991,8312,36,8203,543,9удельная 219,133,9активность нейтрофилаУдельная пиковаяактивность нейтрофилана стимул ФМАУдельная пиковаяактивность нейтрофилана стимул ФМЛФСуммарнаяактивность нейтрофилаИнтегральнаяспонтанная0,470,171,920,6331,73,9активностьнейтрофилаИнтегральнаяактивностьответ настимул ФМАИнтегральнаяактивность ответ настимул ФМЛФСуммарная интегральная 341673153активность нейтрофилаКоэфициент активации16,66,2Коэфициент4,13,7праймированияКоэфициентзатухания 0,4180,21061респираторного взрываАнтиоксидантная3535963425активностьДоля окисленногоIхл •10^3, имп/сальбумина2017.09.283020Вторая вспышка102017.10.210050100150200Время, минРис 13 Кривая хемилюминесценции нейтрофилов при ответе на два стимула ФМА иФМЛФ.При анализе кривых ХЛ отмечено присутствие 2 волны генерациисвободных радикалов в ответ на стимулы.
Это указывает на повышеннуюактивностьнейтрофиловинапряженностьиммунитетаиможетсвидетельствовать о наличии в организме беременной хронического очагаинфекции. Также обращает на себя внимание повышенная интенсивность ХЛответа во время беременности на фоне угрозы прерывания. После замиранияплода, интенсивность ХЛ снизилась, а антиоксидантная активность наоборотповысилась.
Это данные свидетельствуют о существенной роли иммуннойсистемы в патогенезе сократительной активности матки. Возможно высокие62дозы гормональных препаратов, опосредованно влияют на тонус матки ипрепятствуют выкидышу при неразвивающейся беременности.4.2 Анализ кривых методом деконволюцииКинетическая кривая ХЛ при двухстадийной стимуляции имеетсложный характер и может быть математически обработана с цельюразложения на составляющие контуры методом деконволюции.
Любаякриваяможетбытьразложенанатрисоставляющие:1)ФМА-индуцированная продукция АФК, 2) «быстрая» фМЛФ-индуцированнаявспышка, обусловленная внеклеточной продукцией АФК через рецепторныйпуть, 3) «медленная» фМЛФ-индуцированная вспышка, обусловленнаявнутриклеточной продукцией АФК. Результаты деконволюции для ХЛответа нейтрофилов представлены на клинических примерах:Клинический пример (рис.14)Пациентка 26 лет с диагнозом: беременность 18 недель. Угрозасамопроизвольного выкидыша. Поступила в гинекологическое отделение сжалобами на скудные кровянистые выделения из половых путей, тянущиеболи внизу живота. Клинико-лабораторные данные: в общем анализе крови:лейкоцитоз 19·1012/л, СОЭ = 56. С-реактивный белок 48,2 мг/л.
Быланазначена токолитическая, гемостатическая, антибактериальная терапия.Через 48 часов после проведения ХЛ анализа, у пациентки произошелсамопроизвольный аборт. Произведено выскабливание полости матки вэкстренном порядке. Кинетическая кривая ХЛ представлена на рис. 5(скриншот программного модуля). Из рисунка видно, что интенсивностьпроцесса внутриклеточной генерации АФК (кривая 3) высока, чтосвидетельствует о развивающемся иммунном ответе.63Экспериментальнаякривая231Рис. 14. Скриншот программного модуля обработки кинетических кривых ХЛ: 1 —ФМА- индуцированная ХЛ, 2 — «быстрая» фМЛФ-стимулированная вспышка, 3 —«медленная» фМЛФ-индуцированная вспышка.Клинический пример (рис.15)Пациентка поступила в гинекологическое отделение по направлениюврача женской консультации с диагнозом: неразвивающаяся беременность всроке 6 недель.
При поступлении жалоб не предъявляла. Клиниколабораторные данные: в общем анализе крови: лейкоциты 9·1012/л, СОЭ = 11.Произведено выскабливание полости матки в плановом порядке.Полученнаякинетическаякривая(рис. 6) аналогичнакривымпрактически здоровых доноров — в ней присутствуют три составляющие,причем эти составляющие характерны для отсутствия ответа со сторонынейтрофильного звена иммунной системы.
В частности, кривая 3 —внутриклеточная продукция АФК — выражена даже слабее, чем у здоровогодонора.64213Рис. 15. Скриншот программного модуля обработки кинетических кривых ХЛ: 1 —ФМА-индуцированная ХЛ, 2 — «быстрая» фМЛФ-стимулированная вспышка, 3 —«медленная» фМЛФ-индуцированная вспышка.Клинический пример (рис.16)Пациентка 25 лет поступила в гинекологическое отделение сдиагнозом: беременность 20 нед. Угроза прерывания. Краевое предлежаниеплаценты. Кольпит. При поступлении предъявляла жалобы на выраженныеболи внизу живота, обильные слизисто-кровянистые выделении из половыхпутей. В ОАК при поступлении: лейкоциты 17·1012/л, СОЭ = 47.
Назначенаантибактериальная терапия без эффекта, развился хориоамнионит. Через 4дня после ХЛ анализа у пациентки произошла преждевременная отслойканизко расположенной плаценты, произведено малое кесарево сечение вэкстренном порядке. Их кривой, представленной на рисунке 7 видно, чтоповышенная продукция радикалов происходит и за счет быстрой и за счетмедленной вспышки. Эти данные указывают о постепенной готовностиорганизма к родовой деятельности за счет повышенного потенциаланейтрофилов к генерации АФК.65Рис.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
