Автореферат (1140794), страница 2
Текст из файла (страница 2)
Автор подготовил обзор данных отечественных изарубежных источников литературы по теме исследования, сформулированы цель изадачи диссертационной работы. Автором составлена компьютерная база данных 125беременных, проведена аналитическая и статистическая обработки, даны научноеобоснование и обобщение полученных результатов, сформулированы выводы и даныпрактическиерекомендации.Авторсамостоятельнопроводилалабораторныеисследования функциональной активности нейтрофилов; антиоксидантной емкостиплазмы, определение доли окисленного альбумина. Вклад автора является определяющими заключается в непосредственном участии на всех этапах исследования: от постановкизадач, их практической и клинико-лабораторной реализации до обсуждения результатов внаучных публикациях и докладах и их внедрения в практику.Внедрение результатов диссертации в практикуПолученные результаты используются в педагогическом процессе, в лекциях ипрактических занятиях по подготовке ординаторов и слушателей на кафедрах акушерстваи гинекологии №1 и патологии человека лечебного факультета ФГАОУ ВО ПервыйМГМУ им.
И.М. Сеченова МЗ РФ.Соответствие диссертации паспорту научной специальностиНаучные положения диссертации соответствуют: паспорту специальности 14.03.03 –патологическая физиология. Результаты проведенного исследования соответствуютобласти исследования специальности, конкретно – пунктам 1,2 и 9, паспортуспециальности.14.01.01–акушерствоигинекология.Результатыпроведенногоисследования соответствуют области исследования специальности, конкретно пунктам 1 и4 паспорта специальности.ПубликацииПо теме диссертации опубликовано 7 работ, из них 3 в научных рецензируемыхизданиях,рекомендованныхВысшейаттестационнойкомиссиейМинистерстваобразования РФ для публикаций основных результатов диссертаций на соискание ученойстепени кандидата медицинских наук.6Объем и структура диссертацииДиссертация изложена на 99 страницах машинописного текста, состоит извведения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатовисследования и их обсуждения, заключения и списка литературы, включающегоисточников, из них 54 отечественных и 112 зарубежных.
Работа иллюстрирована 19рисунками и 8 таблицами.СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫМатериалы и методы исследованияКлиническая часть исследования была выполнена в гинекологическом иакушерском отделении ГБУЗ «Дмитровская городская больница» в период с 2013 по 2016год. Экспериментальная часть проводилась на базе кафедры медицинской биофизикиФФМ МГУ имени М.В. Ломоносова (зав. кафедрой академик РАН Владимиров Ю.А.).Для решения поставленных задач было выполнено комплексное клинико-лабораторноеобследование 125 пациентов.
Из них 28 беременных с угрозой прерывания (УПБ), изкоторых у 19 был установлен диагноз привычное невынашивание, Средний срокбеременности составил 19,3±7,6 нед. Угроза прерывания проявлялась тянущими болямивнизу живота, скудными кровянистыми выделения из половых путей. У 2 женщинпроизошла гибель эмбриона на сроке беременности 8-9 недель. У остальных пациентокбеременность завершилась самопроизвольным выкидышем или преждевременнымиродами. Группа пациенток с неразвивающейся беременностью (n = 9). Средний срокбеременности составил 6,1±1,5 нед.
Группу К1 составили 61 пациентка, беременностькоторых закончилась срочными родами. Средний срок беременности составил 15,6 ±8,3нед. Небеременные здоровые женщины (К2). Средний возраст составил 29,6 лет. Группаженщин после самопроизвольного выкидыша (n = 5). Давность выкидыша от 4,5 до 48часов.9 женщин с неразвивающейся беременностью (НБ). Группу контроля 1 (К1)составили 61 женщина с физиологическим течением беременности. Группа контроля 2(К2) — 22 небеременные женщины, 5 женщин после самопроизвольного выкидыша до 22нед. (К3). Критериями включения пациентов в исследование были: возраст от 18 лет,женский пол, давность выкидыша для группы К3 не более 48 часов, желание испособность пациента принять участие в исследовании и выполнять требованияисследования, наличие подписанной формы информированного согласия на участие висследовании.
Критериями исключения: маточная патология (пороки развития матки,миома матки и т.д.), острые инфекционные и воспалительные заболевания, отказподписыватьдобровольноеинформированноесогласие.Клиническиеметодыисследования пациенток включали: сбор анамнестических данных, общий осмотр,7специальноегинекологическоеисследование.Всемпациенткампроводилисьобщепринятые лабораторно-инструментальные методы исследования клинический ибиохимический анализы крови, общий анализ мочи, исследование системы гемостаза,электрокардиография,обследованиенаВИЧ,гепатитыВиС,антителакбактериоскопическое исследование мазков из влагалища, ультразвуковое исследование(УЗИ) органов малого таза.Методики определения оксидативного стресса: Регистрацию хемилюминисценцииосуществляли на одно (Lum100) на 12-ти кюветном (Lum1200) хемилюминометре(ДИСофт, Россия).
Использовали люминол (в качестве ХЛ зонда) (Sigma, США). Спектрыфлуоресценции регистрировали на спектрофлуориметре RF-5301PC (SHIMADZU,Япония) в кварцевых кюветах с длиной оптического пути 1,00 см.Оценка функциональной активности нейтрофильного звена лейкоцитов методомхемилюминесценции с двойной последовательной стимуляцией: в кювету, содержащуюраствор Хенкса и люминол в конечной концентрации 45 мкМ, помещали цельную кровь,отобранную в вакутейнеры с гепарином, в конечной концентрации 4,5% (45 мкл на 1,000мл раствора в кювете) и регистрировали спонтанную хемилюминесценцию (ХЛ) в течение12 минут, затем вносили ФМА (конечная концентрация в кювете 50 нг/мл). После 20минут инкубации проводили стимуляцию фМЛФ (конечная концентрация 10 мкМ) ирегистрировали индуцированный ХЛ ответ в течение не менее 60 мин.Математическое моделирование хемилюминограмм кривых нейтрофилов методомдеконволюции: ХЛ кривая имеет сложный характер иможет быть математическисмоделирована и разложена на три составляющие: 1) ФМА-индуцированная продукцияАФК, 2) «быстрая» фМЛФ-индуцированная вспышка, обусловленная внеклеточнойпродукцией АФК через рецепторный путь, 3) «медленная» фМЛФ-индуцированнаявспышка, обусловленная внутриклеточной продукцией АФК.Определение антиоксидантной активности плазмы крови методом кинетическойхемилюминесценции:амидинопропан)Объем50,0дигидрохлорид)имкл20,050мМмкл0,1растворамМАБАПлюминола(2’-азо-бис(2предварительноинкубировали в течении 20 минут при комнатной температуре в темноте.
Реакциютерморазложения источника радикалов инициировали добавлением необходимого объемапредварительно нагретого фосфатного буферного раствора (37˚С). Регистрировалисвечение до достижения стационарного уровня (I0) при 37°С, затем добавляли 10 мклразбавленную в 10 раз фосфатным буферным раствором плазму крови,Оценкафлуоресценции:окислительнойдолюмодификацииокисленного8альбуминаальбуминапо(ДОА)триптофановойопределялиспектрофлуориметрическим способом. Метод основан на измерении флуоресценцииальбумина в плазме, расчете его концентрации по градуировочной зависимости ивычислении ДОА, исходя из общей концентрации белка, определенной биохимическимспособом.Статистическая обработка материалаСтатистическую обработку данных проводили, используя программный пакетGraphPad Prisma 6.0.
Результаты представлены в виде медианы и интерквартильногоразмаха. Для проверки гипотезы о нормальности распределения данных использоваликритерий Шапиро–Уилка (p > 0,05). Достоверность различия между группами определялис помощью критерия Манна–Уитни.
Различия признавали статистически достовернымипри уровне значимости p < 0,05.РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕНовый метод ХЛ оценки функциональной активности нейтрофилов, основанный напоследовательной стимуляции в образце цельной крови двумя стимулами, позволяетоценить максимальный радикал-продуцирующий потенциал нейтрофилов. Стимулы ФМАи ФМЛФ имеют разный механизм действия. ФМА (внутриклеточный механизм)проникает в клетку путем пассивной диффузии и активирует протеинкиназу С. ФМЛФхарактеризуется внеклеточным рецепторным механизмом, причем стимуляция фМЛФобусловлена последовательной сменой внеклеточного и внутриклеточного синтеза АФК.Взаимодействие фМЛФ со специфическими рецепторами приводит к немедленнойвыработкеАФКвовнеклеточнуюсредуНАДФ-Ноксидазнымикомплексами,находящимися на плазматической мембране.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
