Диссертация (1140740), страница 10
Текст из файла (страница 10)
Прибор позволяет оценить массу жировой ткани, активнуюклеточную массу, количество общей и внеклеточной жидкости организмапациента и сравнить их с показателями нормы.За сутки до исследования пациентам рекомендовали воздержаться отупотребления алкоголя, а за 1,5-2 часа - исключить прием пищи и воды.Перед биомпедансным анализом измеряли и фиксировали в протоколебазовые данные: возраст, рост, вес, окружности талии и бедер. Обследованиепроводили в положении пациентов лежа на спине по стандартной схеме,предупреждаяпациентаонеобходимостисохранениянеподвижногоположения во время измерительной процедуры. Использовали одночастотноеинтегральное отведение при частоте зондирующего тока 50 кГц, электродынакладывали в области лучезапястного и голеностопного суставов с правойстороны (рис.4).
Измерения выполняли в течение 20-40 с.Рисунок 4 - Схема расположения электродов для проведения одночастотногобиоимпедансного исследования.Дляанализарезультатовбиоимпедансметриииспользоваликомпьютерную программу, которая специально разработана для данногоприбора. Программное обеспечение не только рассчитывает параметрысостава тела, но и проводит их сравнение с референсными значениями извстроенной базы данных, в которую вошли показатели нормы для детей ивзрослых, полученные при обследовании жителей Европы и России.61Биоимпедансный анализ наряду с расчетами антропометрическихиндексов ИМТ и ИТБ позволяет оценить следующие параметры: фазовый угол; жировую массу тела, нормированную по росту и ее долю в %; тощую (безжировую) массу и ее долю в %; активную клеточную массу и ее долю в %; скелетно-мышечную массу и ее долю в %; основной обмен (ккал/сут); удельный основной обмен (ккал/кв.м/сут); массу общей жидкости, кг; массу внеклеточной жидкости, кг.Обработкаианализданныхзанимаютвсреднем15 мин.,окончательные результаты формируются в виде протокола биоимпедансногоанализа, который содержит таблицу антропометрических параметровпациента,гистограммыкомпонентовсоставатела,таблицуоценоккомпонентов состава тела с численными значениями соответствующихпопуляционных норм (рис.5).Рисунок 5 - Протокол биоимпедансного анализа состава тела.Фазовый угол62Особый интерес в ряду показателей биоимпедансметрии представляетфазовый угол (ФУ), который определяется как арктангенс отношенияреактивного и активного сопротивлений тканей тела, измеренных на частоте50 кГц.
Этот показатель характеризует состояние клеточных мембран иявляется чувствительным индикатором состояния здоровья человека. Внорме фазовый угол составляет ≥6 для мужчин и ≥5 - для женщин. Снижениевеличины фазового угла может быть вызвано любой клеточной гибелью илиразрушением клеточных мембран. Высокие значения фазового угласоответствуют целостности клеточных мембран и большой клеточной массетела. Фазовый угол увеличивается при повышении массы тела, поэтому приожирении его величина может быть высокой.Жировая масса тела (ЖМТ)Жировая ткань представляет собой важнейшее депо энергии ворганизме и участвует в регуляции физиологических и обменных процессов.Она является наиболее лабильным компонентом состава тела человека,который зависит от возраста и пола. Нормальное содержание жировой ткани(9,7–16,2 кг) необходимо для поддержания хорошего самочувствия иработоспособности.
Слишком низкое содержание жира может привести кнарушению выработки важных гормонов, а избыточное количество являетсяфактором риска развития сердечно-сосудистых и других заболеваний.Доля жировой массы (%ЖМТ)Процентное содержание жировой массы (%ЖМТ) в организмепациента наиболее адекватно позволяет судить о степени жироотложения.Норма составляет 10,0-19,9% для мужчин и 20,0-29,9% - для женщин.Одновременноепревышениенормы%ЖМТиИТБявляетсяпрогностическим признаком метаболического синдрома, что подразумеваетвысокую вероятность развития АГ, СД второго типа, желчекаменной болезнии ряда других заболеваний.Тощая (безжировая) масса (ТМ)63Тощая масса (норма 33,5–53,0 кг) определяется как разность междумассой тела и жировой массой. В состав ТМ входят и метаболическиактивные (например, скелетно-мышечная масса), и сравнительно инертныеткани (соединительная ткань).
Отклонения значений тощей массы отсреднего свидетельствует об особенностях конституции человека: влево ближе к астеническому, вправо - к гиперстеническому типу.Активная клеточная масса тела (АКМ)Активная клеточная масса (норма 17,6–27,8 кг) представляет собойсовокупность клеток организма, активно участвующих в обмене веществ.Данный показатель характеризует содержание в организме метаболическиактивных тканей.
Очень важно в процедурах коррекции массы тела снижатьжировую массу и сохранять неизменной активную клеточную массу за счётповышеннойфизическойактивностиисбалансированногопитания.Отклонение АКМ в сторону меньших значений от среднего указывает нанедостаточность белковой составляющей рациона.Доля АКМ в тощей массе (%АКМ)Величина процентной доли АКМ в ТМ показывает, какую часть тощей(безжировой) массы тела составляет активная клеточная масса. В нормесоставляет50,0–56,0%.Используетсякакпоказательфизическойработоспособности, а при значениях ниже среднего отражает степеньвыраженности гиподинамии.Скелетно-мышечная масса (СММ)Величина СММ используется для оценки физического развитиячеловека.
Норма составляет 18,9 – 23,5 кг.Основной обмен (ОО) и удельный основной обмен (УОО)Величина ОО характеризует общий уровень метаболических процессовв организме, показывая количество производимой энергии. Расчет величиныосновного обмена в аппаратно-программном комплексе «ABC-01 Медасс»осуществляется по формуле: ОО (ккал/сут) = 31,6 × АКМ (кг) + 615,7, гдеАКМ – активная клеточная масса. У людей атлетического телосложения ОО64на 10-15% выше, чем у лиц с избыточным содержанием жира в организме стеми же параметрами массы тела и роста. Значения оценок основного обменаиспользуют для расчета калорийности диеты, так как если количествокалорий в потребляемой пище выше уровня основного обмена, лишниекалории будут преобразованы в жир.Удельный основной объем вычисляется путём нормировки значенияосновного обмена на площадь поверхности тела (в м2), что позволяетпровести сравнение интенсивности обменных процессов у различныхиндивидов.Общая вода организма (ОВО)Общая жидкость организма представляет собой наибольший по массекомпонент состава тела и обеспечивает процессы транспорта веществ ворганизме.
Суточное потребление воды, необходимое для нормальнойжизнедеятельности взрослого человека, составляет 30-40 г на 1 кг массытела. В норме ОВО составляет около 73% тощей массы и колеблется впределах 24,6-38,9 кг. Низкий показатель ОВО свидетельствует обобезвоживании, а высокий – о задержке воды в организме.Внеклеточная жидкость организма (ВКЖ)Внеклеточная жидкость организма представляет собой наиболеемобильные компоненты жидких фракций организма, циркулирующих внеклеток по всему телу: плазму крови, лимфу, межклеточную жидкость.Наиболее распространенные виды отеков носят межклеточный характер.Следует отметить, что доставка кислорода к клеткам заметно снижается,когда есть избыток внеклеточной воды (отек).2.7. Иммунологические методы исследованияВ качестве биоматериала дляиммунологических исследованийместного цитокинового профиля полости рта использовали содержимоепародонтальных карманов у пациентов с ХГП и МС.65Получение экссудата из ПКДля получения содержимого из пародонтальных карманов у пациентовс ХГП и МС использовали стерильные, стандартные по размеру полоскифильтровальной бумаги, которые вводили в пародонтальный карман на 30 с,затем помещали в пробирку эппендорф со стерильным физиологическимраствором (1 мл) на 40 мин.
Спустя указанное время, с помощью пинцетаполоскибумагивынимали,содержимоеэппендорфаанализировали,определяя концентрацию цитокинов.Методы определения цитокиновой активностиОпределение уровней цитокинов (ИЛ-1β, ИЛ-6, ИЛ-4, ФНО-α) висследуемыхтвердофазногообразцахсодержимогоиммуноферментногоизПКпроводилианализасметодомиспользованиемсоответствующих тест-систем фирмы BIOSOURCE (Europe S.A.) (рис.6).Учетрезультатовиммуноферментногоанализаосуществлялисиспользованием фотометра для микропланшетов при длине волны 450 нм.Концентрацию цитокинов определяли по калибровочной кривой в пг/мл.Рисунок 6 - Ферменты, реактивы и микропланшеты для количественногоопределения содержания цитокинов в биологических образцах методомтвердофазного иммуноферментного анализа (BIOSOURCE, Europe S.A.).66Метод иммуноферментного анализа (ИФА) основан на специфическомсвязывании антитела с антигеном, при этом один из компонентовконъюгирован с ферментом.
В результате реакции с соответствующимхромогенным субстратом образовывается окрашенный продукт, количествокоторого можно определить спектрофотометрическим способом.Основные принципы твердофазного ИФА заключались в следующем.1. На первом этапе реакции адсорбировали антигены или антитела натвердой фазе. При этом не связавшиеся с твердой фазой реагенты легкоудалялись отмыванием.2. В сенсибилизированных ячейках инкубировали исследуемыйобразец. В ячейках с положительным контролем – стандартные реагенты.При этом на поверхности твердой фазы формировали иммунные комплексы.Несвязавшиеся компоненты удаляли отмыванием.3. При добавлении конъюгата антитело-фермент или антиген-ферменти связывании его с иммобилизованным иммунным комплексом активныйцентр фермента остается доступным для последующего взаимодействия ссубстратом.Инкубациясубстратавячейкахсиммобилизованнымконъюгатом приводила к развитию цветной реакции, которую можноостановить на нужной стадии с помощью стоп-реагента.
Выраженностьокрашивания можно оценить как визуально, так и по оптической плотности спомощью спектрофотометра.ПриметодаиспользованииИФА(подвысокоаффинныхчувствительностьюантителчувствительностьподразумеваютминимальноевыявляемое количество антител или антигена) очень высока и теоретическипозволяет выявить единичные молекулы вещества, но на практикечувствительность ограничивается рядом факторов: активностью фермента,интенсивностью сигнала и методами учета сигнала. В связи с этим, припроведении ИФА используют конъюгаты ферментов с биотином и добавляют67биотинсвязывающий белок - стрептавидин, обнаруженный в бактерияхStreptomyces avidinii.















