Диссертация (1140693), страница 8
Текст из файла (страница 8)
После 2-го сеанса ФДТ кокковая флора с поверхности ран практическине высевалась: число КОЕ/мл было <1,0 ± 0,05E∙10 (lg КОЕ/мл = 1). Высеваемостьграмотрицательных палочек уменьшилась вдвое: до обработки число КОЕ/мл дообработки составляло 1,80±0,05Е∙104 (lg КОЕ/мл = 4,2552),а после обработки –1,30±0,05Е∙102 (lg КОЕ/мл = 2,1139) соответственно. Возможно, обнаруженнаяэффективность системы «Фотодитазин» ― хитозан обусловлена повышеннойфотогенерацией синглетного кислорода (1О2) при иммобилизации комплексовФД-АП на хитозане [70-71].Наименеезначимыерезультатыизученияантибактериальнойэффективности получены в группе IV, где для фотохимического воздействияиспользована система«Фотодитазин» ― плюроник в комплексе с наночастицамизолота и КМЦ.
При данном воздействии не было выявлено достоверногоснижения бактериальной обсеменённости ран как в отношении кокковой, так и вотношении грамотрицательной флоры (см. рисунок 18 и таблица 2).Следует отметить важный факт достаточно высокого уровня летальности –33,3%, сравнимого с контрольной группой, где использована традиционнаяобработка ран раствором хлоргексидина. Весьма вероятно, что высокий уровеньсмертностиуживотныхданнойгруппыобусловленсочетаниемобщетоксического влияния развивающейся инфекции с фотоцитотоксическойактивностью «Фотодитазина»,хотя недавними исследованиями было показаномодулирующее воздействие плюроника на «Фотодитазин», снижающее егофототоксичность [179].
Возможно, взаимодействие системы «Фотодитазин» ―плюроникс наночастицами золота угнетает модулирующую активность56полимера. Таким образом, к настоящему времени вопрос о применениинаночастиц золота в качестве лечебного материала остается открытым.Таблица 2 ― Изменение бактериальной обсеменённости ран в процесселеченияСрокпроведенияисследованияДо3,10 ± 0,05 E∙106ГрамотрицательныепалочкиlglgКОЕ/мл (M ± m)КОЕ/мКОЕ/млл66,49135,00 ± 0,05 Е∙106,6989После3,00 ± 0,05 Е∙1066,47714,20 ± 0,05 Е∙1044,6232До3,10 ± 0,05 E∙1066,49135,00 ± 0,05 Е∙1066,6989После2,40 ± 0,05 Е∙1033,38022,40 ± 0,05 Е∙1033,3802До3,10 ± 0,05 E∙1066,49135,00 ± 0,05 Е∙1066,6989После1,90 ± 0,05 Е∙1033,2787<1,0 E∙101До3,30 ± 0,05 Е∙1066,51852,80 ± 0,05 Е∙1066,4471После4,3 ± 0,05 Е∙1044,63843,20 ± 0,05 Е∙1044,5051До3,80 ± 0,05 Е∙1066,57973,30 ± 0,05 Е∙1066,51853СтафилококкиГруппаIIIЧерез 24 часапосле операциииIIIинфицированияIVVIIIЧерез 72 часапосле операцииIIIиинфицированияIVVМоментобработкиКОЕ/мл (M ± m)3,30 ± 0,05 Е∙1033,51853,50 ± 0,05 Е∙10До5,00 ± 0,05 Е∙1033,69893,9 ± 0,05 Е∙103После3,00 ± 0,05 Е∙1033,47713,7 ± 0,05 Е∙1033,5682До3,60 ± 0,05 Е∙1044,55633,50 ± 0,05 Е∙1033,544После4,2 ± 0,05 Е∙1033,62323,8 ± 0,05 Е∙1022,5797До5,60 ± 0,05 Е∙1044,74812,20 ± 0,05 Е∙1044,3424После2,9 ± 0,05 Е∙1022,4623<1,0 ± 0,05 E∙101До3,30 ± 0,05 Е∙104,4,51853,70 ± 0,05 Е∙1044,56824,34242,90 ± 0,05 Е∙1044,46231,80 ± 0,05 Е∙1044,25521,30 ± 0,05 Е∙1022,1139ПослеПослеДоПосле2,20 ± 0,05 Е∙1041,60 ± 0,05 Е∙103<1,0 ± 0,05 E∙103,204113,5443,591573.2.2.
Макроскопическая оценка клинической картины состояния ранНа следующие сутки после моделирования ран и их заражения общеесостояние животных можно оценить как среднетяжелое. Животные вялые,малоподвижные, у части из них отмечаются сукровичные выделения из носа.Раны у всех животных имеют признаки развивающегося нагноения. Вполости кольцаотмечается скопление жидкого фибринозно-геморрагическогоэкссудата, у некоторых животных экссудат отсутствовал.Дно раны по всейплоскости выстлано тонким слоем фибрина, утолщающегося у краёв раны постенкам кольца.
Подлежащие ткани отечны и имеют синюшный оттенок.Перифокальная реакция выражена умеренно: кожные края незначительно отечны,плотная инфильтрация не наблюдается, гиперемия незначительна.В этот срок в четырёх опытных группах (II-V) проведен 1-й сеанс ФДтерапии по описанной выше методике, в контрольной группе (I) раны обработаныраствором хлоргексидина. Во всех группах у каждого животного отбирали мазкираневого экссудата для микробиологического исследования в описанном вышепорядке. Обращало на себя внимание, что в процессе фотоактивации (засветки) уряда животных в мягких тканях на дне ран появлялись очаги петехиальныхкровоизлияний.
Особенно выраженным (у 4 животных из 6) это явление было вIV группе, где использован комплекс «“Фотодитазин”―плюроникF127 снаночастицамизолота».Вменьшейстепенипоявлениемелкоочаговыхкровоизлияний наблюдалось при использовании чистого «Фотодитазина» (группаII) – у 2 животных и комплекса «Фотодитазин» ― плюроникF127 (III группа) – у1 животного. В V группе при использовании комплекса «”Фотодитазин“―плюроник ― хитозан» тоже лишь у 1 животного появились единичныемелкоточечные петехии.На следующие сутки после первого сеанса ФДТ (2-е сутки после операции иинфицирования) у животных групп I (контрольной) и IV («“Фотодитазин” ―58плюроник ― Au») отмечалось ухудшение общего состояния. В обеих этихгруппах пало по одной крысе.На 3-и сутки общее состояние животных II, III и V групп можно оцениватькак удовлетворительное: они стали более активными.
Лишь у 3 животных (по 1 вкаждой группе) оставались выделения из носа. В I (контрольной) группе общеесостояние животных оставалось среднетяжелым. Пала ещё 1 крыса, у которойотмечались проявления диареи. В IV группе («“Фотодитазин” ― плюроник ―наночастицы золота, КМЦ») общее состояние животных по-прежнему тяжелое,животныевялые,непоедаюткорм,имеютсявыраженныепризнакиобезвоживания. В этой группе пало ещё 2 крысы, также с явлениями диареи.В этот срок стали заметными и местные отличия в состоянии ран. Уживотных II, III и V групп уменьшилось количество экссудата. У животных Vгруппы (комплекс «“Фотодитазин” ― хитозан») лишь у 3 в полости кольцажидкий мутноватый серозный экссудат присутствовал в небольшом количестве(около 0,5 мл), у остальных его было ещё меньше. Дно раны было покрыто слоемфибрина, более толстого и рыхлого по краям раны, у стенок кольца.
В группах II(«Фотодитазин») и III (комплекс «“Фотодитазин ― плюроник») в ранах всехживотных обнаруживалось умеренное количество (≈ 0,8 мл) жидкого серозногеморрагического экссудата. Приэтом в группе с водным раствором«Фотодитазина» (гр. II) геморрагический характер экссудата был более выражен,чем в группе III (комплекс «“Фотодитазин ― плюроник»), где он обнаруживалсялишь у 2 животных, у остальных 4 животных этой группы в ранах присутствовалмутный экссудат желтовато-розового цвета. Отечность кожных краев ран заметноуменьшалась, гиперемия исчезла. В IV группе («“Фотодитазин” ― плюроник ―наночастицы золота, КМЦ») раны у оставшихся в живых животных имели«сухой» вид.
Возможно, это связано с общим обезвоживанием. На их поверхностиприсутствовало незначительное количество (менее 0,5 мл) густого мутногоэкссудата с геморрагическим прокрашиванием. Дно ран покрыто тонкойкрасновато-бурой пленкой плотного фибрина. Перифокальный отёк отсутствует,кожа бледная, холодная наощупь.В I (контрольной) группе во всех ранах еще59присутствовал экссудат в достаточном количестве, более 0,5 мл, причем у 2животных он имел явно гнойный характер: был мутный слизеподобный, снеприятным запахом; у 3 остальных экссудат был более жидкий, фибринозногеморрагический.
Отечность кожи вокруг ран несколько увеличилась.В этот срок в 4 опытных группах (II-V) проведен 2-й сеанс ФДТ. Вконтрольной группе (I) раны обработаны раствором хлоргексидина. Во всехгруппах у каждого животного до и после засветки были взяты мазки раневогоэкссудата для микробиологического исследования.На 4-е сутки после операции и 2 сеансов ФДТ общее состояние животныхII, III и V групп заметно улучшилось. В I (контрольной) группе оно близко кудовлетворительному, а в IV группе (комплекс «“Фотодитазин” ― плюроник ―наночастицы золота, КМЦ») продолжает оставаться тяжелым.В этот срок животные выведены из эксперимента.
Изъятые ткани ранотправлены для гистологического изучения.3.2.3. Статистическая оценка данных, полученных путем планиметрииЦелью проведения статистического анализа были критическая оценка иинтеграция данных, полученных во всех экспериментальных группах, а такжевыявление статистических параметров данных планиметрии и сроков полногозаживления ран в зависимости от используемого варианта модернизации«Фотодитазина».Статистический анализ производили с учетом показателей, полученных припроведении планиметрического исследования ран. Изначально с целью выявлениядостоверности проведенного исследования был использован одновыборочныйтест Колмогорова-Смирнова, по результатам которого показатель«площадьраны» подчиняется закону нормального распределения (KS = 0,996,p=0,274).Учитывая полученные результаты, дальнейшую оценку производили при помощипланиметрических критериев.60На 10-е сутки после удаления колец из раны была отмечена разница вразмере экспериментальных гнойных ран:в контрольной группе средний размер раны составил 176,70 +3,54в группе, где для ФДТ применяли водный раствор «Фотодитазина»мм2;164,85 +2,80 мм2;в третьей группе 167,10 + 3,77 мм2;в группе с применением «Фотодитазина», комплексированным сКМЦ, плюроником F127 и наночастицами золота, 190,20 + 5,35мм2;в пятой, контрольной группе средний размер раны составил 163,50 +3,43 мм2.На 14-е сутки производили повторное измерение площади раны.















