Диссертация (1140693), страница 4
Текст из файла (страница 4)
Под влиянием ФДТ происходит сокращение всех фазраневогопроцесса:гидратации,дегидратации,пролиферациииэпителизации;2)применение нового комплекса приводит к сокращению сроковочищения, заживления ран и к стимулированию эпителизации за счетувеличения фагоцитарной активности, уменьшения бактериальной нагрузкив ране, ускорения организации лейкоцитарного вала, ускорения фазыпролиферации;3) разработанный метод позволяет сократить количество койко-дней,затрачиваемых для лечения гнойных патологий.Таким образом, в ходе проведения экспериментов было доказано, чтоФДТ гнойных ран мягких тканей является перспективной разработкой. Приправильном подходе к использованию данной методики значительноповышается успех лечения гнойных процессов мягких тканей.Главнойособенностью является патогенетическая и экономическая обоснованность,а также сокращение срокапребывания пациента в лечебном учреждении.Другим значительным плюсом является простота использования указанного23метода и отсутствие необходимости применения значительных физическихусилий при проведении методики ФДТ.РазличиевоздействияФДТнамикрофлоруположительнуюилиотрицательную по Граму в настоящее время изучено недостаточно.
Отдельныеработы, публикующиеся в мировой литературе, приводят результаты, в которыхотмечаетсяразличиефотосенсибилизатороввэффективностивторогопоколения,применениявключенныхФДТвнаосновекомплексысразличными соединениями на микрофлору, различную по Граму. Но все онидают оценку одному или двум комплексам на основе фотосенсибилизатороввторого поколения, не давая общего вывода по всей проблеме.В НИИ химической физики имени Н.Н. Семенова разработан целый рядпрепаратов на основе фотосенсибилизатора второго поколения «Фотодитазин».Данныекомплексыобладаютразличнымифизическими,химическимисвойствами, но их объединяет одно свойство ― все они повышаютэффективность препарата «Фотодитазин» при лечении гнойных процессов. В ходеэкспериментов, проводимых на базе НИИ физической химии РАН, былопоказано,чторазличныефотосенсибилизаторыоказываютнеодинаковоевоздействие на бактерии, положительные или отрицательные по Граму.В экспериментах с использованием фотосенсибилизаторов, формирующихкомплексысамфифильнымиполимерамиразличнойприроды–полиоксиэтиленом, поливинилпирролидоном, плюрониками, поливиниловымспиртом, также отмечались положительные биологические эффекты.
Так, прииспользовании комплекса хлорина Е6 с поливинилпирролидоном наблюдалосьувеличение селективности накопления данного комплекса в опухолевых тканях иускоренное выведение его из нормальных тканей [14, 16, 155, 194]. Кроме того,связывание фотосенсибилизаторов с полимерами часто позволяет существенноулучшить фотофизические свойства получаемых комплексов по сравнению сисходными фотосенсибилизаторами [31, 33, 36,42].
Особый интерес вызываетвозможностьиспользованиятри-блоксополимеровэтиленаи24пропиленоксида(называемых также плюрониками) в ФДТ.Ранее было показано,что плюроники, являющиеся биологически совместимыми эмульгаторами [98],обладают свойствами иммуноадъювантов[108], антитромботической активностью[112] и способностью модифицировать активность нейтрофильных лейкоцитов[114].По проведенным ранее исследованиям было показано, что наиболееперспективными в плане дальнейшего исследования можно считать следующиекомплексы: Амфифильные полимеры:- поливинилпирролидон (ПВП) (молекулярная масса 40000 Да, SigmaAldrich, Германия);- плюроник F127 (молекулярная масса 12600 Да, BASF, США) – тройнойблок-сополимер этиленоксида и пропиленоксида;Комплекс«Фотодитазина»сПВП(концентрацияфотосенсибилизатора – 1 ∙10-4 М, концентрация ПВП – 1 ∙ 10-4 М (в расчете намолекулу);Комплекс «Фотодитазина» с плюроником F127 (концентрацияфотосенсибилизатора – 1 ∙10-4 М, концентрация F127 – 4∙10-4 М (в расчете намолекулу));«Фотодитазин», комплексированный с плюроником F127,а такженаноразмерными частицами различного диаметра, но в диапазоне от 30 до 160 нм.Исходя из этого, возможно сделать предположение, о возможностиувеличения фотокаталитической активности порфириновых водорастворимыхфотосенсибилизаторов за счет присоединения к ним различныхамфифильныхполимеров, таких как плюроник F127, ПЭО, ПВП иПВС.
Данные полимеры необладают собственной фотодинамической активностью, однако способныувеличивать фотокаталитическую активность водорастворимых порфириновыхфотосенсибилизаторов, вследствие диссоциации агрегатов молекул порфиринов.При оценке реакции окисления молекулы триптофана в ходе проведения25эксперимента ФДТinvitro было выявлено повышение фотокаталитическойактивности порфиринового фотосенсибилизатора в присутствии различныхамфифильных полимеров в процессе генерации синглетного кислорода. Вероятно,данный эффект может являться одним из компонентов обнаруженного ранее входе клинической практики целого каскада реакций, приводящего к повышениюактивности комплексов АП-ПФС в ходе процедуры ФДТ при лечении опухолей,гнойных и огнестрельных ран.Выявленные в настоящем экспериментальном исследовании клиникоморфологические особенности течения ранней стадии раневого процессаподдействием ФДТ с использованием комплексов «Фотодитазина» с амфифильнымиполимерами позволяют сделать вывод о том, что плюроник F127 способенослабить (возможно, и снять) негативное воздействие «Фотодитазина» намикрососуды и предотвратить развитие местной геморрагической реакции,осложняющей заживление раны.
Важно также и то, что лазерное облучение всочетании с комплексом «Фотодитазин»-плюроник способствует ослаблениювоспалительных и усилению репаративных процессов, по сравнению скомплексом«Фотодитазин» ―Поливинилпиролидон (ПВП). В этой связикомплекс «Фотодитазина» с плюроником F127 может быть использован вкачестве фотосенсибилизатора для ФДТ.Определениемеханизмоввзаимовлияниякомпонентовкомплекса«Фотодитазин» ― плюроник и регуляция этих реакций в процессе световоговоздействия, а также изучение в динамике эффектов, развивающихся при ФДТ сиспользованием этого комплекса, требует дальнейших исследований, в частности,на грамположительную и грамотрицательную микрофлору.26ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯДля достижения искомой цели и решения поставленных задач в настоящемисследовании выполнено 3 серии экспериментов invitro и invivo, в которыхизучалиэффективностьантибактериальноговоздействиякомплексовфотосенсибилизаторов и амфифильных полимеров с разной химическойструктурой компонентов в условиях фотовозбуждения.В 1-йсерии экспериментов invitroизучали фотокаталитическуюактивность комплексов ПФС-АП, используя модельную реакцию фотоокислениятриптофана в воде.Во2-й серии экспериментов на животных(105 белых лабораторных крыс) наэкспериментальной модели инфицированной полнослойной плоскостной раныкожи проведено сравнительное изучение особенностей течения I фазы раневогопроцесса и сравнительное изучение динамики заживления гнойных ран приместной ФДТ с использованием комплексов ПФС-АП с различной химическойструктурой компонентов.2.1.Общая характеристика исследуемых фотосенсибилизатора и веществ,применяемых для его модернизации«Фотодитазин»Первым из применяемых фотосенсибилизаторов является «Фотодитазин».Он является препаратом следующей генерации.
Данный препарат был создан наоснове производных хлорофилла «А».Уникальность указанного препаратазаключается в том, что он прекрасно поглощает излучение как в красной областисветового спектра с максимальным эффектом при 661 нм, так и в полосе Соре спиком на 400 нм.Максимальная флуоресценция данного препарата находится в27диапазоне от 660 до 680 нм. Наиболее оптимальным временем проведения ФДТпри применении данного препарата является 1,5-2 часа от момента внутривенноговведения; в данном временном отрезке в организме достигается максимальныйфлуоресцентный контраст.
Препарат перестает обнаруживаться в организме всрок 28 часов. Кроме этого, указанный препарат является препаратом анионноготипа. Молекула «Фотодитазина» представлена на рисунке 1.CH2CH3CH3CH3NHNNHNCH3CH3OHO+H2N-OO-OO+H2NHOHOCH3CH3OHOHOOHOOHOHOHРисунок 1 ―N-метил-ди-D-глюкаминовая соль хлорина Е6 («Фотодитазин»)«Фотодитазин»какфотосенсибилизатортканейполностьюсертифицирован и допущен для применения у пациентов. Отличительнойчертой «Фотодитазина» является высокая селективность и способностьнакапливаться в клетках опухоли, а также в бактериальных клетках.
Другимотличительным качеством являетсянизкое накопление в здоровых тканях,низкая токсичность и быстрое выведение из организма. «Фотодитазин»обладает высокой степенью люминесценции в очаге накопления, что,несомненно, позитивно влияет на проведение диагностики.
К другимхарактеристикам «Фотодитазина» можно отнести высокий квантовый выходсинглетного кислорода; максимум поглощения света в области 661 нм;развитие фотодинамического эффекта может достигать в тканях глубины до1,7-2 см.28Блок-сополимер полиоксиэтилена и полиокипропилена ПлюроникF127В конце 80-х годов в ходе экспериментально исследования было доказано,что блоксополимеры полиоксиэтилена и полиокипропилена (далее плюроники)обладают относительно низкой токсичностью. Это открыло широкие перспективыиспользования этих полимеров в качестве биосовместимых поверхностноактивных веществ. [93].
Дальнейшие лабораторные исследования взаимодействияплюроников и биологического окружения показали, что при определенныхусловиях они способны влиять на метаболизм холестерина, усиливать иммунныйответ,ингибировать белковые насосы, обусловливающие множественнуюлекарственную устойчивость раковых клеток [192, 197].Физиологические эффекты плюроников в основном определяются ихвзаимодействием с липидными компонентами биологических мембран. В нашемэксперименте применялся плюроник F127 производства фирмы BASF (США),выбранныйнамипорезультатамэкспериментов,выполнявшихсяНИИфизической химии им. Н.Н.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
