Диссертация (1140693), страница 3
Текст из файла (страница 3)
Сморфологической точки зрения апоптоз можно охарактеризовать сморщиваниемклетки, конденсацией ядерного хроматина, фрагментацией ядра и сегрегациейклетки в апоптотическое тело, которое опознается фагоцитами и подвергаетсяфаголизису. Все это смело можно назвать отличительными признаками апоптоза.Апоптоз является контролируемым и требующим энергии процессом,следовательно, он является полной противоположностью некрозу.
В различныхмодельных системах было наглядно показано, что ФДТ эффективно индуцируетапоптоз. Именно способность ФДТ возбуждать апоптотический каскад в любыхклетках, насыщенных фотосенсибилизатором, даже в тех клетках, которые17невосприимчивы к химио- и лучевой терапии, делают эту методику наиболееподходящей для лечения онкологических процессов. Было наглядно показано, чтосигнал для запуска процесса апоптоза вне зависимости от его поступления снаружной или с внутренней стороны клетки воспринимаются в митохондриях.Запуск каскада, приводящего к апаптозу клетки, при ФДТ связан с тем, что ROS(реактивные формы кислорода), образующиеся в результате фотодинамическоговоздействия, могут непосредственно повреждать митохондрии, которые, какописывалось выше, являются стартерами активной гибели клеток. Другаязначимая роль митохондрии заключается в том, что после поступления сигналаначалаапоптозавключаетсявыделениепротеиновизмежмембранногопространства в цитоплазму.
Данный процесс часто сопровождается открытиемпор на внутренней или наружной мембране митохондрии [69,78,151,152,157], нодетальный механизм этого процесса все еще остается неясным.ФДТ позволяет достичь оптимального соотношения некроз – апоптоз идобиться максимальной очистки гнойной раны.ФДТ может быть представлена в виде следующей схемы:ФС---hv----ФС-тфс+ О2-----ФС+1О2.Фотосенсибилизатор, расположенный внутри мембраны и/или вцитоплазме клеток, поглощает квант лазерного излучения, переходит ввозбужденное состояние, в синглетное.
Под действием энергии лазерасинглетныйкислородприводиткразрушениюмембранклеток,внутриклеточных структур и бактериальных агентов, вызывая тем самым гибельклеток [30, 31,35].Сразу необходимо отметить, что для проведенияФДТсуществует рядпротивопоказаний, таких как наличие у пациента декомпенсации или острогонарушениядеятельностисердечно-сосудистойсистемы,наличиеострогонарушения мозгового кровообращения, наличие аутоиммунных заболеваний,18острые инфекционные заболевания, а также наличие других острых состояний,угрожающихжизнипациентаитребующихнемедленноголечения.Котносительным противопоказаниям для проведения ФДТ можно отнестипроживание пациента в других регионах от места проведенияФДТ, а такженевозможность пациента прийти на контрольный осмотр в указанные временныесроки.В клинической практике положительный эффект от светового воздействияпри лечении гнойных ран мягких тканей достигается при использовании двухосновных типов лазеров ― гелий-неоновых с длиной волны 0,63 мкм илиинфракрасный лазер с длиной волны 0,85-0,89 мкм, однако существует рядпубликаций, в которых экспериментально доказывают, что для лечения могутбыть применены лазеры с другим спектром излучения[20,21,35,36].При анализе публикаций, посвященных лечению гнойных ран мягкихтканей с использованием лазеров, можно сделать вывод, что положительныеэффекты при использовании лазеров в непрерывном режиме излучениядостигались при средней падающей мощности 50 мВт.Также можно отметить тот факт, что для достижения лечебного эффектаможно применять различные способы «транспортировки» лазерного излучения.Наиболее распространенными способамипринято считатьвнутривенноелазерное облучение крови и непосредственное облучение поверхности ран.Входе экспериментальных и клинических исследований было доказано, чтоприменениенизкоинтенсивноголазерногоизлучения(НИЛИ)оказываетблаготворное влияние на все стадии процесса заживления раны.Однако необходимо отметить факт наличия в литературе описанияэкспериментальных работ, в которых показано, что при применении НИЛИмощностью более 1 мин и мощностью излучения более 50 мВт провоцируетсязначительная задержка сроков заживления ран.В отношении действия НИЛИ на организм существует несколько гипотез.
Вотношении течения раневого процесса наиболее целесообразно рассматриватьконцепцию, в основе которой лежит фотодинамический механизм воздействия19НИЛИ. В качестве основных положений данной концепции считают:1. В красной области спектра поглощения лазерного излучения эндогенныепорфиринысчитаютсяхромофорамииихтакженазываютфотосенсибилизаторами (ФС).2. При проведении НИЛИ происходит поглощении световой энергиипорфиринами и, как следствие, индуцирование фотосенсибилизированныхсвободнорадикальных реакций. Это, в свою очередь, приводит к увеличениюионной проницаемости клеточных мембран, в первую очередь, для ионов Са2.3. При увеличении количества ионов Са2 в процессе цитолиза лейкоцитовпроисходит запуск Са-зависимых процессов.
При активации данного происходитповышение уровня функциональной активности клеток за счет праймингалейкоцитов. Кроме этого процесса также происходит повышение продукцииразличных биологических соединений, таких как гипохлорит-ион, оксид азота идр. Некоторые из этих биологически активных обладают способностью влиять намикроциркуляторное русло, другие обладают выраженной бактерициднойактивностью. Оксид азота обладает расслабляющим эндотелий сосудов свойствомза счет того, что является предшественником так называемого EDRF(EndoteliumDerivedRelaxingFaktor).
За счет этого свойства достигается целый рядэффектов, которые применяются в клинике при проведении лазерной терапии.В процессе исследования ФДТбыло разработано несколько поколенийфотосенсибилизаторов, применяемых в клинической практике.Наиболее известным препаратом первого поколения является Фотофрин. Всоставеэтого препарата присутствуют олигомеры и активные димеры впроцентном соотношении к общей концентрации препарата не менее 80%,оставшиеся 20% представлены неактивными мономерами. Успех данногопрепарата был обусловлен тем, что его эффективность при выполнении ФДТбыла всесторонне изучена, доказана и широко внедрена в клиническую практику;кроме этого, для его изготовления не требовалось использование сверхсложных исверхдорогих химических веществ.Коммерческий успех препарата привел ктому, что на рынке появлялись его дженерики, такие какФотокарцинорин,20Фотосан, Фотогем иГематодрекс.Однако, как позже выяснилось, фотосенсибилизаторы первого поколения(Фотофрин, Фотогем и др.) обладали рядом недостатков:1.Их фотохимическая активность не значительна;2.Препаратынедостаточноселективны,афотосенсибилизациянормальной кожи продолжается в течение нескольких недель;3.Они хуже, чем в других областях спектра, поглощают в красномдиапазоне (примерно при 630 нм)[87].Второе поколение фотосенсибилизаторов представлено рядом разработок, воснове которых лежат различные комплексы на основе Хлорина Е6, например,«Фотодитазин»[113].
«Фотодитазин» фактически нетоксичен (LDGO-168 мг/кгпри терапевтической дозе 0,7-1,4 мг/кг), имеет полосу поглощения 662 нм (приэтом фотодинамический эффект может развиваться в тканях на глубине до 1,7-2см) с достаточно высоким квантовым выходом синглентного кислорода, обладаетвысокой тумаротропностью превышения содержания по отношению к здоровойткани, в 8-19 раз.«Фотодитазин» в отличие от фотосенсибилизаторов первого поколениядоказанно вызывает минимальное повреждение окружающих тканей при ФДТ.Другимнемаловажнымфотосенсибилизациякожи,преимуществомчтопрактическиявляетсяисключаетминимальнаявероятностьвозникновения ожогов, вызванных солнечным светом.По данным П.И.
Толстых препарат «Фотодитазин» выводится из организмаза период не более чем 26 часов, что также является немаловажным аспектом вФДТ [118]. Данный фактор влияет на качество жизни пациента. Чем дольшефотосенсибилизатор находится в организме пациента, тем дольше пациентвынужден соблюдать ограничения, направленные на исключение возникновенияпобочных эффектов после проведения ФДТ. Необходимо сказать, что, по мнениюнекоторыхавторов, применение «Фотодитазина» в лечении злокачественных21заболеваний эффективно в 62-83 % в зависимости от стадии и вида заболевания[40]. Подобные исследования фармакокинетики «Фотодитазина» и другихизвестных фотосенсибилизаторов второго поколения для лечения гнойныхпроцессов не проводились.
В литературе описаны единичные случаи примененияпри лечении ожоговых ран [42, 58, 66, 92, 107,108].invivo.В ходе данногоПроцедура проведения ФДТ была исследованаисследования был установлен тот факт, что, помимо прямого повреждениявнутриклеточныхструктуриклеточныхмембран,происходитпродуцированиемедиаторов воспаления и медиаторов, стимулирующихиммунныйответ.Методомиммуногистохимическогоанализабылиобнаружены наличие интерлейкинов 2 и 6, цитокинов, фактор некрозаопухолей, вазоактивные субстанции, а также колониестимулирующийфактор, фактор роста, компоненты коскадокомплемента, и множестводругих иммунорегуляторов, запускающих апоптоз.Воспалительный процесс в окружающих тканях может способствоватьформированиюиммунногоэффективногоответамогутиммунногоответа.присутствоватьСредивариантовпротивовирусный,противомикробный, противоопухолевый.Стоит отметить, что выраженное положительное влияние на течениегнойных процессов при применениифотосенсибилизаторов первогопоколения отмечено не было.
С появлением фотосенсибилизаторов второгопоколения ситуация с лечением воспалительных процессов несколькоизменилась, однако отдельное, целенаправленное исследование влиянияФДТс использованием фотосенсибилизаторов второго поколениянагнойные процессы в мягких тканях долгое время не проводилось. Влитературе существовали отдельные разрозненные публикации, в которыхвысказывалось, что постулаты, на которых основана ФДТ злокачественныхновообразований, может быть примененаи при лечении гнойно-22воспалительных поражений мягких тканей.Фотохимическаятерапиясприменением«Фотодитазина»способствует сокращению сроков очищения ран от гнойно-некротическогодетрита, появлению грануляций и начала эпителизации в 1,5-2 раза быстреепо сравнению с традиционным лечением [31,33]. Сроки полного заживлениягнойных ран сократились на 5-7 дней по сравнению с традиционнымлечением.В результате исследований было показано следующее:1)применениекомплексированныйносителенавФДТскомплексомводорастворимомкристаллах―«Фотодитазин»,амфифильномгидроксиапатита,ввидегеляполимерномповышаетэффективность ФДТ.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
