Автореферат (1140692), страница 3
Текст из файла (страница 3)
Отечность кожи вокруг ран несколькоувеличилась.В этот срок в четырёх опытных группах (II-V) проведен 2-ой сеансФДТ. В контрольной группе (I) раны обработаны раствором хлоргексидина.Во всех группах у каждого животного до и после засветки были взяты мазкираневого экссудата для микробиологического исследования.16На 4-е сутки после операции и 2-х сеансов ФДТ общее состояние животныхIIIII и V групп заметно улучшилось.
В I (контрольной) группе оно близко кудовлетворительному, а в IV группе (комплекс «фотодитазин-плюроник наночастицы золота, КМЦ») продолжает оставаться тяжелым.В этот срок животные выведены из эксперимента. Изъятые ткани ранотправлены для гистологического изучения.Статистическая оценка данных полученных путем планиметрииСтатистический анализ производили с учетом показателей полученныхпри проведении планиметрического исследования ран.
Изначально с цельювыявления достоверности проведенного исследования был использованодновыборочный тест Колмогорова-Смирнова по результатам которогопоказатель "площадь раны" подчиняется закону нормального распределения(KS = 0,996 p=0,274). Учитывая полученные результаты дальнейшую оценкупроизводили при помощи планиметрических критериев.На 10 сутки после удаления колец из раны была отмечена разница вразмере экспериментальных гнойных ран:В контрольной группе средний размер раны составил 176,70 +3,54 мм2В группе, где для ФДТ применяли водный раствор фотодитазина 164,85+2,80 мм2В третьей группе 167,10 + 3,77 мм2в группе с применением фотодитазина комплексированным с КМЦ,плюроником F127 и наночастицами золота 190,20 + 5,35мм2В пятой контрольной группе средний размер раны составил 163,50+3,43мм2На 14е сутки производили повторное измерение площади раны.Результаты произведенных исследований так же выявили наличие различий вплощади раны у крыс, получавших традиционное лечения и крыс, лечениекоторых производили с применением ФДТ.в контрольной группе средний размер раны составил 82,73 + 4,07 мм2,17во второй экспериментальной группе 72,87 + 3,48 мм2,в третьей 72,10 + 5,35 мм2,в четвертой 163,70 +5,32 мм2,в пятой экспериментальной группе размер раны был 67,85 + 3,47 мм2.На 17е сутки после удаления кольца из раны был произведенпоследний замер площади раневой поверхности.В контрольной группе размер раны составлял 38,65 +1,80 мм2во второй экспериментальной группе 27,09 + 2,12 мм2в третьей 24,50 + 2,51 мм2в четвертой 70,80 + 70,3 мм2в пятой 22,15+2,00 мм2Для выявления статистически значимых различий между контрольнойиэкспериментальнымигруппамибылвыполненоднофакторныйдисперсионный анализ ANOVAс применением поправки Бенферрони.Оценке подверглись все сроки проводимой планиметрии на 10е, 14е, и 17есутки.
В результате проверки были выявлены статистически значимыеразличия между всеми группами (n=70, p< 0,01).КорреляционныйкорреляциианализПирсонасприменениемвыявиллинейногозависимостьмеждукоэффициентапроявлениемпланиметрического признака и номером группы и является статистическизначимым.Статистические результаты клинических наблюденийПо результатам проведенных исследований средний срок эпителизации вовсех экспериментальных группах был различным.В контрольной группе эпителизация раны наступала на 24,5 + 1,3 сутки. Вовторой экспериментальной группе эпителизация раны завершилась на 22 +1,2 сутки, в третьей группе на 21+ 0,97 сутки, в четвертой на 29+1,4 сутки, впятой группе эпителизация заняла 19+ 1,3 сутки.18Результаты гистологического изученияГистологическое изучение биоптатов тканей ран проводилось на 4-е суткипосле операции нанесения ран и их инфицирования, поскольку в этот срок I(воспалительная) фаза раневого процесса переходит во II (пролиферативную)фазу.
Именно в этот срок, когда начинает формироваться грануляционнаяткань, определяется дальнейший темп заживления, заканчивающегосяполной эпителизацией ран (А.Б.Шехтер, 1995).В настоящем исследовании гистологическое изучение показало, что вконтрольной группе, при обработке инфицированных ран растворомхлоргексидина, в тканях дна раны, представленных жировой, мышечнойтканями и островками начинающейся развиваться грануляционной ткани,преобладали воспалительная инфильтрация, отёк и микроциркуляторныенарушения. В слое фибринозно-лейкоцитарного экссудата обнаруживалиськолонии кокковой микрофлоры. Наряду с данными макроскопическойклинической картины и результатами микробиологических исследований этосвидетельствует о недостаточности антибактериального воздействия даннойобработки, пролонгации I (воспалительной) фазы и заторможенностидальнейшего течения репаративно-регенераторных процессов (Рисунки 3,4)В группе II (ФДТ с водным раствором фотодитазина) грануляционнаяткань занимает уже большее пространство, в ней более выраженнеоангиогенез и пролиферация фибробластов.
Однако, ткань имеет незрелыйхарактер. Воспалительные изменения в ней, а также в подлежащей жировойи мышечной тканях выражены ещё достаточно сильно. Следует подчеркнутьтакжегеморрагическийхарактерэкссудатаиналичиедиапедезныхкровоизлияний в тканях. Подобные явления, связанные с увеличениемпроницаемости сосудов под влиянием фотодитазина, были обнаружены и вранеевыполненныхгистологическинеисследованияхвыявляются,[230].чтоМикробныесогласуетсясколонииданнымимикробиологических исследований, фотодитазин-плюроник. (Рисунки 5,6)19При ФДТ с использованием комплекса «фотодитазин-плюроник» (IIIгруппа экспериментов) у большинства животных геморрагический характерэкссудата резко уменьшается, либо исчезает совсем в связи с защитныммодулирующим действием плюроника.
Возрастает объём и, особенно,степеньзрелостивоспалительныегрануляционнойпроявления,антибактериальнойчтоактивностьткани.Значительнонесомненноуменьшаютсясвязанокомплекса,свысокойвыявленнойпримикробиологических исследованиях (рисунки 7,8).В IV группе (ФДТ с использованием комплекса «фотодитазинплюроник-наночастицызолота,КМЦ»),гдемикробиологическимисследованиями установлена самая низкая степень антибактериальнойактивности, гистологически в слое экссудата, как и в I (контрольной) группеобнаруживаютсямикробныеколонии.Усиливаетсягеморрагическийхарактер экссудата, воспалительные изменения близки к контрольнойгруппе,гдепроводиласьтрадиционнаяобработкаранрастворомхлоргексидина. Грануляционная ткань занимает большую площадь, чес вконтроле, однако степень её созревания уменьшена по сравнению со II и IIIгруппами.
По-видимому, включение в состав комплекс наночастиц золотаснижаетантибактериальнуюактивностьипротивовоспалительноевоздействие данного способа фотодинамической терапии, а также блокируетантигеморрагическое влияние плюроника. В этой связи ответ на вопрос оцелесообразностииспользованиякомплекса«фотодитазин-плюроник-наночастицы золота, КМЦ» для проведения антибактериальной ФДТ следуетпризнать отрицательным .В V группе, где в качестве фотосенсибилизатора использован комплекс«фотодитазин-хитозан»,даннымигистологическоемикробиологическихобъективизировалоблагоприятномрезультатытеченииизучениеисследованийклиническихраневогопроцесса.всовокупностиподтвердилонаблюденийНарядусосинаиболееотсутствиемгеморрагических проявлений наблюдалась наибольшая степень снижения20воспалительной реакции с одновременным усилением регенераторнорепаративных признаков (рост и созревание грануляционной ткани,неоангиогенез и коллагеногенез.
(рисунки 11,12)Это нашло подтверждение и при статистическом анализе такого важногоморфологического показателя, как толщина слоя грануляционной ткани, приеё морфометрии.Следуетдумать,чтопротивовоспалительныйихитозанусиливаетпрорегенераторныйантибактериальный,эффектывкомплексефотодитазином в условиях фотоактивации. Тем самым открываетсявозможностьперспективногоиспользованияэтогокомплексадляантибактериальной фотодинамической терапии как нового метода леченияинфекционно-воспалительных заболеваний кожи и мягких тканей.ВЫВОДЫ1. По результатам проведенного экспериментально исследования показано,что разработанный метод лечения экспериментальных гнойных ранмягких тканей с использованием лазерной фотодинамической терапии сфотосенсибилизаторомплюроникомF127«Фотодитазин»,илихитозаномприкомплексированнымучетеналичиявсранеграмположительной или грамотрицательной микрофлоры позволяетдобиться максимальной эффективности фотодинамической терапии.2.
ФДТ с комплексом «Фотодитазина», объединенного с плюроником F127,оказывает выраженное литическое воздействие на грамотрицательнуюмикрофлору.Эффективностькомплекса выше,литическоговоздействияуказанногочем у традиционной ФДТ с водным раствором«Фотодитазина», а такжедругими вариантамикомплексирования«Фотодитазина». После двух сеансов ФДТ с данным комплексоммикробная обсеменённость грамотрицательной флорой в ране снизиласьдо уровня <1,0 ± 0,05 E∙10 КОЕ/мл.213. ФДТ с комплексом водного раствора «Фотодитазина» с хитозаном имеетвысокую литическую активность на грамположительную микрофлору.Литическая активность данного комплекса выше, чем литическаяактивностьтрадиционнойФДТ,атакжедругихвариантовкомплексирования «Фотодитазина».
После проведенного курса ФДТ сприменениемданноймодификации«Фотодитазина»микробнаяобсемененность раны грамположительной флорой снизилось до уровня1,30 ± 0,05 Е∙102 КОЕ/мл.4. ФДТ с комплексом «Фотодитазина» с наноразмерными частицами золота,КМЦ и плюроником F127 не приводит к снижению уровня микробнойобсемененности раны, а в ряде случаев применение данного комплексаможет приводить к летальному исходу у подопытных крыс.5. ФДТ с водным раствором «Фотодитазина», комплексированным свариантами полимеров хитозан и плюроник F127, способствуетуменьшениюбактериальнойнагрузкивране,увеличениюфагоцитарной активности, ускорению организации лейкоцитарноговала и скорейшему созреванию грануляционной ткани.6.
ФДТ водным раствором «Фотодитазина», комплексированным свариантами полимеров хитозан и плюроник F127, сокращает срокочищения раны от гнойных и некротических масс, бактериальнойфлоры, стимулирует эпителизацию, приводит к ускорению сроковзаживления ран в 1,2-1,5 раза по сравнению с традиционнымлечением.ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ1.Результаты экспериментального исследования позволяютрекомендовать к клинической апробации метод фотодинамической терапиигнойных ран мягких тканей комплексами «Фотодитазин» ― плюроник F12720 мг/мл и «Фотодитазин» ― хитозан 2,7%.222. При наличии в ране грамположительной микрофлоры следует выбиратькомплекс «Фотодитазин» ― хитозан.3.
При выявлении в ране грамотрицательной микрофлоры следуетиспользовать комплекс «Фотодитазин» ― плюроник F127.4.Время экспозиции фотосенсибилизатора на раневую поверхностьдолжно составлять 45 минут.5.Рану необходимо облучать с помощью лазерного аппарата с длинойволны 661 ± 3 нм и выходной мощность 0,5-1 Вт.6.Поверхность раны следует облучать с расстояния 1-2 см отповерхности раны, облучение производить рассеянным лучом с диаметромпятна 0,3-0,8 см, с плотностью энергии 1 Вт/см2.7.Длительность лазерного воздействия должна зависеть от площадираневой поверхности при плотности энергии 25-30 Дж/см2.Список работ, опубликованных по теме диссертации1. Теоретические и практические аспекты фотодинамической терапии ранразличногогенеза.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
