Диссертация (1140686), страница 12
Текст из файла (страница 12)
Чем большеоказывалось метаболическое отношение 5-гидроксиомепразол/омепразол в моче,тем выше считалась активность изофермента CYP2C19.2.6 Статистическая обработка результатовСтатистическая обработка данных по клинической и популяционной частямработы проводилась с помощью пакета SPSS Statistics 22 (IBM, США).ДляоценкинормальностираспределенияприменялсякритерийКолмогорова-Смирнова. Среднее и стандартное отклонение использовались дляописания переменных с нормальным распределением.
Медиана и 25%-75%квартилииспользовалисьдляописанияпеременныхсненормальнымраспределением. Для оценки достоверности различий независимых переменныхпри ненормальном распределении признака использовались непараметрическиеметоды (критерии Манна-Уитни и Крускала-Уоллиса) Для оценки различийкачественных признаков использовался точный критерий Фишера. Соответствиераспределения частот генотипов равновесию Харди-Вайнберга проверялось сиспользованием точного критерия Фишера.
Критерий Уилкоксона использовался67для сравнения двух связанных выборок. Различия считались достоверными приуровне значимости p<0,05.Статистическая обработка для мета-анализа проводилась в программеReview Manager версии 5.3. Для каждой генетической группы была оцененагетерогенность между отобранными исследованиями с помощью параметра I2,который не зависит от количества исследований и показывает неоднородностьданных.
При I2≥50% гетерогенность принималась как значительная, требующаяпересмотра списка включенных в анализ исследований. Оценка отношенияшансов (OR) и 95% доверительного интервала (95% CI) для эффективностиэрадикации H. pylori осуществлялась с помощью модели постоянных эффектовпри отсутствии достоверной гетерогенности, в противном случае использоваласьмодель случайных эффектов. Для большинства исследований группа нормальныхметаболизаторов принималась как контрольная, в остальных случаях законтрольную принималась группа с предполагаемо более быстрым метаболизмомИПП.68ГЛАВА 3.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ3.1 Результаты генотипирования пациентов с язвенной болезньюжелудка и двенадцатиперстной кишки по CYP2C19 и ABCB1Среди 68 пациентов с язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстнойкишки,принимающихомепразол,30(44,1%)оказалисьнормальнымиметаболизаторами, 20 (29,4%) – быстрыми метаболизаторами, 16 (23,5%) –промежуточными метаболизаторами и 2 (3%) – медленными метаболизаторами.Результаты генотипирования пациентов представлены в Таблице 3.1 и Рисунке3.1.Таблица 3.1Распределение полиморфизмов по CYP2C19 среди российских пациентов сязвенной болезньюФенотип по CYP2C19Нормальные метаболизаторыПромежуточныеметаболизаторыМедленные метаболизаторыБыстрые метаболизаторыИтогоГенотип поКоличествоЧастота, %CYP2C19пациентов*1/*13044,1*1/*21217,6*2/*1734,4*3/*1711,5*2/*223,0*1/*171826,5*17/*1722,968100,0693%23,5%44,1%29,4%Нормальные метаболизаторыБыстрые метаболизаторыПромежуточные метаболизаторыМедленные метаболизаторыРисунок 3.1 – Распределение генотипов по CYP2C19 у пациентов с язвеннойболезнью желудка и двенадцатиперстной кишки.Обнаруженные частоты генотипов, представленные в Таблице 3.1,соответствовалиожидаемымпоуравнениюХарди-Вайнберга,p>0,05(CYP2C19*2: χ2=0,46, p=0,50; CYP2C19*3: χ2=0,004 p=0,95; CYP2C19*17:χ2=0,14 p=0,70), что свидетельствует о том, что распределение частоты генотиповв данной выборке пациентов отражает их распределение в популяции в целом.Таким образом, отсутствие статистически значимых различий между частотамиаллелей и генотипов выборки и расчетных ожидаемых показателей говорит осоответсвии закону Харди-Вайнберга о поддержании постоянства генотипов изпоколения в поколение.Результаты распределения генотипов пациентов представлены в Таблице3.2.70Таблица 3.2Распределение генотипов CYP2C19 по частоте у пациентов с язвеннойболезньюПолиморфизмCYP2C19*2CYP2C19*17CYP2C19*3ГенотипКоличествоЧастота,Равновесие Харди-пациентов%ВайнбергаGG5175GA1522,1AA22,9CC4464,7CT2232,4TT22,9GG6798,5GA11,5AA00p=0,50p=0,70p=0,95Частота встречаемости аллельного варианта CYP2C19*17 составила 19,1%.Распространённость медленных аллельных вариантов составила для CYP2C19*2 –14,0%, для CYP2C19*3 – 0,7%.
Распределение аллелей по частоте представлено вТаблице 3.3 и Рисунке 3.2.Таблица 3.3Распределение аллелей CYP2C19 по частоте у пациентовс язвенной болезньюПолиморфизмCYP2C19*2АллелиЧисло аллелейЧастота, %G11786,0A1914,071CYP2C19*17CYP2C19*3C11080,9T2619,1G13599,3A10,70,7%14%19,1%66,2%CYP2C19*1CYP2C19*17CYP2C19*2CYP2C19*3Рисунок 3.2 – Распределение аллельных вариантов по CYP2C19 у 68 пациентов сязвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки.Среди 68 пациентов с язвенной болезнью генотип CC по полиморфизмуC3435T ABCB1 был обнаружен у 15 (22,0%) пациентов, генотип CT – у 35(51,5%) пациентов, генотип TT – у 18 (26,5%) пациентов (Таблица 3.4).
Частотыгенотипов соответствовали равновесию Харди-Вайнберга (χ2=0,07, p=0,80) чтосвидетельствует о том, что распределение генотипов в данной выборке пациентовотражает их распределение в популяции в целом. Частота встречаемостиаллельного варианта T гена ABCB1 составила 52%.72Таблица 3.4Распределение по полиморфизму C3435T ABCB1 у пациентов с язвеннойболезньюПолиморфизмГенотипКоличествоЧастота, % Равновесие Харди-пациентовC3435T ABCB1ВайнбергаCC1522,0CT3551,5TT1826,5p=0,803.2 Оценка взаимосвязи между фенотипированием и генотипированиемCYP2C19 у пациентов с язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстнойкишкиМетаболическое отношение 5-гидроксиомепразол/омепразол в моче былоопределено у 59 пациентов.
Результаты фенотипирования CYP2C19 по 5гидроксиомепразол/омепразолвмочеубольныхязвеннойболезнью,генотипированных по CYP2C19, представлены на Рисунке 3.3.Рисунок 3.3 – Результаты фенотипирования пациентов с язвенной болезнью поCYP2C19 по отношению 5-гидроксиомепразол/омепразол в моче во взаимосвязи срезультатами генотипирования по CYP2C19.73Метаболическоеотношение5-гидроксиомепразол/омепразолвмочеоказалось набольшим у пациента с генотипом быстрого метаболизатораCYP2C19*1/*17 и составило 3,24. Наименьшее метаболическое отношениеобнаружено у пациента с генотипами нормального метаболизатора – 0,26.Описательнаястатистикадляметаболическогоотношения5-гидроксиомепразол/омепразол в моче у нормальных, быстрых, промежуточных имедленных метаболизаторов по CYP2C19 представлена в Таблице 3.5 и наРисунке 3.4.Таблица 3.5Метаболическое отношение (5-гидроксиомепразол/омепразол) в моче уносителей различных фенотипов, предсказанных по генотипу по CYP2C19Фенотип,Метаболическое отношение в мочепредсказанный Количество Медиана Квартили Максимум Минимумпо генотипупациентов25%–75%CYP2C19НормальныеметаболизаторыБыстрыеметаболизаторыПромежуточныеметаболизаторыМедленныеметаболизаторы271,030,69–1,362,770,26161,951,33–2,683,240,28141,400,92–2,042,500,3321,74–3,050,42161,400,78–2,133,050,42591,260,82–1,993,240,26Промежуточныеи медленныеметаболизаторыВсе пациенты74Медиана МО в моче32,521,951,51,401,0310,50НормальныеметаболизаторыБыстрыеметаболизаторыПромежуточные имедленныеметаболизаторыГруппы пациентов по генотипам CYP2C19Рисунок 3.4 – Медиана метаболического отношения5-гидроксиомепразол/омепразол в моче у пациентов сразличными генотипами по CYP2C19.Было обнаружено статистически достоверное различие по метаболическомуотношению (5-гидроксиомепразол/омепразол) в моче (тест Манна-Уитни) междунормальнымиибыстрымиметаболизаторами(p=0,001),атакжепримножественном сравнении в тесте Крускала-Уоллиса (p=0,005) (Таблица 3.6).Таблица 3.6Различия в метаболическом отношении(5-гидроксиомепразол/омепразол) в моче у носителей различных фенотипов,предсказанных по генотипу по CYP2C19Группы по фенотипу,Различия по метаболическомупредсказанному по генотипуотношению в мочеCYP2C19НМ vs БМp=0,001ПМ+ММ vs НМp=0,10575БМ vs ПМ+ММp=0,132НМ vs БМ vs ПМ+ММp=0,005Примечание: НМ – нормальные метаболизаторы, БМ – быстрые метаболизаторы,ПМ+ММ – объединенная группа промежуточных и медленных метаболизаторовНе было обнаружено связи между торговым названием препаратаомепразол, который принимали пациенты, и метаболическим отношением 5гидроксиомепразол/омепразол в моче (тест Крускала-Уоллиса: χ2=2,9, p=0,40)(Таблица 3.7).Таблица 3.7Торговое название препарата омепразол и метаболическое отношение(5-гидроксиомепразол/омепразол) в мочеТорговое названиеКоличествоМетаболическоеТест Крускала-омепразолапациентовотношение (медиана)УоллисаОмез111,51Омепразол Промед141,52Омепразол Синтез301,08Омепразол Тева41,37p=0,40Не было обнаружено связи между длительностью приема омепразола доотборапробмочииметаболическимотношением5-гидроксиомепразол/омепразол в моче (тест Манна-Уитни: U=239 p=0,70)(Таблица 3.8).76Таблица 3.8Длительность приема омепразола перед определением метаболическогоотношения (5-гидроксиомепразол/омепразол) в мочеДлительность приемаМетаболическоеомепразолаотношение (медиана)3 дня1,26Более 3 дней1,20Тест Манна-Уитниp=0,70Не было обнаружено связи между дозой омепразола и метаболическимотношением 5-гидроксиомепразол/омепразол в моче (тест Манна-Уитни: U=194p=0,17) (Таблица 3.9).Таблица 3.9Доза омепразола, назначенная пациентам, и метаболическое отношение(5-гидроксиомепразол/омепразол) в мочеДоза омепразолаМетаболическоеКоличествоТест Манна-отношениепациентовУитни(медиана)20 мг 2 раза в сутки20 мг 1 раз в сутки,40 мг 2 раза в сутки1,11481,4211p=0,17При разделении пациентов на группы по носительству полиморфизмаCYP2C19*2 (пациенты с генотипом GG – без полиморфизма и объединеннаягруппа пациентов с генотипами GA и AA – носители полиморфизма) не былополученодостоверныхразличийпометаболическомуотношению5-гидроксиомепразол/омепразол в моче в тесте Манна-Уитни (U=319, p=0,85)(Таблица 3.10 и Рисунок 3.5).77Таблица 3.10Различия в метаболическом отношении(5-гидроксиомепразол/омепразол) в моче у носителей генотиповпо аллельному варианту CYP2C19*2Генотип по CYP2C19*2Метаболическое отношение(медиана, квартили 25%-75%)GGGA+AA1,171,28(0,82–1,82)(0,71–2,17)4415Объём выборкиТест МаннаУитниp=0,85Рисунок 3.5 – Результаты фенотипирования пациентов с язвенной болезнью поCYP2C19 по отношению 5-гидроксиомепразол/омепразол в моче во взаимосвязи срезультатами генотипирования по CYP2C19*2.При разделении пациентов на группы по носительству полиморфизмаCYP2C19*17 (пациенты с генотипом CC – без полиморфизма и объединеннаягруппа пациентов с генотипами CT и TT – носители полиморфизма) былиполученыдостоверныеразличияпометаболическомуотношению5-78гидроксиомепразол/омепразол в моче в тесте Манна-Уитни (U=220, p=0,006)(Таблица 3.11 и Рисунок 3.6).Таблица 3.11Различия в метаболическом отношении(5-гидроксиомепразол/омепразол) в моче у носителей генотиповпо аллельному варианту CYP2C19*17Генотип по CYP2C19*17CCCT+TT1,051,60(0,69–1,68)(1,29–2,45)3920Метаболическое отношение(медиана, квартили 25%-75%)Объём выборкиТест МаннаУитниp=0,006Рисунок 3.6 – Результаты фенотипирования пациентов с язвенной болезнью поCYP2C19 по отношению 5-гидроксиомепразол/омепразол в моче во взаимосвязи срезультатами генотипирования по CYP2C19*17.РазделениепациентовнагруппыпоносительствуполиморфизмаCYP2C19*3 не проводилось в связи с низкой частотой данного полиморфизмасреди европеоидов (один пациент в нашей выборке).79Таким образом, получены достоверные различия по метаболическомуотношению (5-гидроксиомепразол/омепразол)в моче среди пациентов сфенотипами CYP2C19, предсказанными на основании генотипов CYP2C19.Получены достоверные различия по метаболическому отношению в моче уносителей и не-носителей аллельного варианта CYP2C19*17, что говорит означимости данного полиморфизма в метаболизме ингибиторов протоннойпомпы.
У носителей CYP2C19*17 получены достоверно более высокиепоказатели метаболического отношения 5-гидроксиомепразол/омепразол в моче,что свидетельствует об ускоренной биотрансформации ингибиторов протоннойпомпы.Тем не менее, методика фенотипирования изоферемента CYP2C19 пометаболическому отношению 5-гидроксиомепразол/омепразол в моче требуетдальнейшего совершенствования, поскольку не позволяет дифференцироватьпациентов по скорости биотрансформации омепразола.Методики фенотипирования, основанные на однократном заборе крови илимочи могут найти более широкое применение в клинической практике всравнении с методами отбора проб в нескольких точках.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
