Диссертация (1140488), страница 5
Текст из файла (страница 5)
Повреждение респираторного эпителия ицилиарная дисфункция приводит к нарушению мукоцилиарного клиренса,следствием чего является повышенная восприимчивость к инфекциям ивоспаление [158].Частота биения является важным фактором, определяющим эффективностьработы ресничек, однако не менее важным параметром является паттерн биения.Под паттерном биения ресничек понимают комплексную оценку, включающуюхарактер движения (ундулирующий, спастический, маятникообразный и др.),синхронность работы ресничек, степень сгибания ресничек, угол отклонения отоси при движении.
Нарушение паттерна при сохранении нормальной частотыбиения ресничек может приводить к неэффективной работе цилиарного аппарата[158]. Учитывая взаимосвязь и важную роль каждого из звеньев мукоцилиарнойсистемы, при оценке мукоцилиарного клиренса целесообразно определять нетолько двигательную активность ресничек эпителия, но также и свойства слизи[29, 32].Нарушение мукоцилиарного клиренса – одно из ведущих звеньев впатогенезе многих бронхолегочных заболеваний.Понимание механизмовразвития мукоцилиарной недостаточности и индивидуальный подход к пациентупозволят адекватно определить лечебную тактику и выбрать комплекснуютерапию, направленную на коррекцию мукоцилиарной недостаточности [13].Отмечено, что при воспалительных процессах восстановление мукоцилиарногоклиренса происходит позже, чем клиническое выздоровление [31].1.4 Оценка функционального состояния мукоцилиарной системы.Оценка назального мукоцилиарного клиренса.Транспортную функцию полости носа оценивают по скорости перемещенияразличных частиц-маркеров из передних отделов полости носа в носоглотку иротоглотку.В качестве маркеров используется угольная пыль, метиленовыйсиний, сахарин [24, 25].
При проведении сахаринового теста используют 1/5 часть22таблетки пищевого сахарина [18] или ¼ часть таблетки другого сахарозаменителя[32], которой придают округлую форму.Маркер помещают на переднюю поверхность нижней носовой раковины,отступив от ее переднего края 1 см. Оценку транспортной функциимерцательного эпителия проводят по времени, прошедшему до обнаружениямаркеров визуально в носоглотке или по ощущению сладкого вкуса [18].
Поданным различных исследователей время сахаринового теста у детей в нормесоставляет от 7 до 14 минут [32, 62].Определенную трудность представляет калибровка таких измерений в видуразличнойиндивидуальнойпротяженностиверхнихдыхательныхпутей,субъективности оценки, особенно у детей. Кроме того, данное исследованиетребует достаточного количества времени [3, 54].Также оценить назальный мукоцилиарный клиренс можно по определениюскорости перемещения сывороточного альбумина, меченного радиоактивнымизотопом технеция (99mTc) и нанесенного на слизистую оболочку полости носа.В норме скорость перемещения составляет >4 мм/мин [66].В связи с тем, что при оценке назального мукоцилиарного клиренса идвигательной активности ресничек эпителия исследуются разные звеньямукоцилиарной системы, корреляции между данными исследованиями может небыть. Эти методы являются взаимодополняющими [112].Оценка трахеобронхиального мукоцилиарного клиренса.Скорость трахеобронхиального мукоцилиарного клиренса можно оценить спомощью метода динамической ингаляционной пульмоносцинтиграфии смечеными99mTcмикросферамиальбумина.Спомощьюгамма-камерыоценивается скорость эвакуации радиофармпрепарата из просвета бронхов,параметры накопления его в легких [49].Радиоаэрозольный метод сопряжен с минимальной лучевой нагрузкой,неинвазивен, возможно его многократное повторение для динамическихисследований.
Метод позволяет судить о мукоцилиарном клиренсе по скорости23выведениярадиофармпрепарата,однакодиагностировать,какоезвеномукоцилиарной системы повреждено, невозможно [25].В рутинной клинической практике исследование трахеобронхиальногомукоцилиарного клиренса с помощью радиоаэрозольного метода не находитширокого применения в силу сложности и высокой стоимости исследования [49].Исследование двигательной активности цилиарного эпителия in vitro.Очевидно, что образец эпителия, изъятый из слизистой оболочки, не можетабсолютно точно воспроизводить двигательную активность, существующую invivo.
Процесс приготовления препарата и исследование его in vitro неизбежноприводит к его повреждению и вносит качественные искажения в изучаемыепараметры деятельности реснитчатого аппарата клеток [4, 101].Однако на данном этапе развития техники приходится мириться с этиминеустранимыми погрешностями, так как микроэндоскопические системы дляанализа деятельности цилиарного эпителия непосредственно в слизистойоболочке in vivo в настоящее время не доступны.Получение образцов эпителия.Для непосредственного изучения цилиарного эпителия in vitro нужнополучить образцы либо бронхиального эпителия, либо назального эпителия. Дляполучения бронхиального эпителия необходимо проведение бронхоскопии.Назальный эпителий получают при передней риноскопии с помощью брашбиопсии или соскоба специальной ложечкой. Это простой, недорогой инетравматичный метод получения образцов цилиарного эпителия, который нетребует применения местных анестетиков [63, 132].
Поэтому для исследованияреспираторного эпителия, особенно у детей, а также у пациентов, которым непоказано проведение бронхоскопии, чаще используют именно назальныйэпителий [122, 152].24Исследование назального эпителия целесообразно не только для оценкиврожденныхдефектовресничек(например,дискинезии), но и для косвенной оценкиприпервичнойцилиарнойсостояния эпителия нижнихдыхательных путей [127].
Была показана корреляция между ЧБР эпителияверхних и нижних дыхательный путей [123, 145, 147, 162]. Такая корреляциясохранялась и при патологических состояниях респираторной системы – примуковисцидозе [159] и у больных ХОБЛ [117].В качестве области для соскоба чаще выбирают слизистую оболочкунижней носовой раковины [71, 75, 142].
Также можно получить эпителий сосредней носовой раковины [30, 61, 67].Чаще всего для щеточной биопсии эпителия используют щеточки избронхоскопических наборов [154]. Однако, следует отметить, что они достаточнодороги, а процедура забора материала из носа доставляет существенныйдискомфорт пациенту.Альтернативой щеткам является использование специальных кюреток.Обладая малым диаметром рабочей поверхности (2 мм), они позволяютпрактически безболезненно получить образец эпителия из конкретного участкаслизистой [29, 67, 135].
Отмечено, что качество получаемых биоптатов увзрослых в среднем выше, чем у детей [135, 136].Кинематография.Движения объектов с частотой выше нескольких герц недоступны дляизученияневооруженнымглазомиз-заинерционностизрения[2,4].Кинематография была первым методом оценки частоты биения ресничек,позволяющим с помощью совмещения большого количества снимков, сделанныхс высокой частотой, добиться аналога видеосъемки. Метод был дорогим,трудоемким и не позволял проводить анализ в режиме реального времени [76].Фотометрия.До появления высокоскоростных видеокамер измерение ЧБР проводилиопосредованнос помощью фотометра, когда регистрировалиизменение25интенсивности света, проходящего через подвижные реснички.Фотометрпозволяет преобразовать световые импульсы в электрические сигналы, которыезатем обрабатываются с помощью быстрого преобразования Фурье.
Недостаткиданного метода очевидны – он не позволяет непосредственно наблюдать забиением ресничек в реальном времени и изучить характер биения ресничек [76,111, 147].Высокоскоростная цифровая видеомикроскопия.ИзмерениеЧБРограниченофизикойспектральногоанализа(преобразование Фурье): максимальная ЧБР, которая может быть измерена,составляет ½ от кадровой частоты видеокамеры. Учитывая, что в норме ЧБРможет достигать 22-25 Гц, минимальнаяприемлемаякадровая частотавидеокамеры, используемой для регистрации движения ресничек эпителия,составляет 50 кадров в секунду.До появления цифровых видеокамер были доступны только аналоговые.Аналоговая видеосъемка, которая проводится при скорости 25-30 кадров всекунду, не позволяет надежно измерять ЧБР более 15 Гц в силу указанных вышефизическихфакторов[153].КконцуXXвекакачествоцифровыхвысокоскоростных видеокамер достигло нового уровня, что позволило отказатьсяот кинематографии и фотометрических методик [76].
В настоящее времяиспользуют видеокамеры с частотой съемки 120-500 кадров в секунду [71, 101,154].Высокоскоростнаяцифроваявидеомикроскопияявляетсянаиболеесовременным методом исследования цилиарного эпителия [3, 101, 113]. Сутьметода заключается в видеосъемке движения ресничек эпителия с помощьювысокоскоростной цифровой видеокамеры, подсоединенной к микроскопу [1, 2].Последующее воспроизведение полученного видеоролика в замедленном режимепозволяет оценить двигательную активность ресничек, подсчитать ЧБР и оценитьхарактер движения ресничек. Также существует специальное программноеобеспечение, позволяющее произвести подсчет ЧБР в автоматическом режиме.26Однако стандартизированная методика оценки ресничек с помощью даннойтехники до настоящего времени отсутствует, и, фактически, каждое учреждениеиспользует свою модификацию оборудования, программного обеспечения иметодику оценки [119, 151].Золотым стандартом оценки ЧБР является подсчет биений ресничек заопределенный временной промежуток или определенное количество кадров призамедленном воспроизведении видеоролика [76, 157, 158].
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
