Диссертация (1140465), страница 19
Текст из файла (страница 19)
Экспрессию PCNA ни в центролобулярных, ни в периферических отделах дольки печени мы не регистрировали. Профилактическое введение ЛБК-527 сопровождалось повышением экспрессии маркера пролиферации в перипоральныхзонах дольки, что свидетельствует о наличие пролиферативного потенциалау данного соединенияОстрое алкогольное поражение печени характеризовалось значительным ростом сывороточной концентрации АСТ и АЛТ с одновременной элевацией ферментативной активности ГГТП, что свидетельствовало о формировании активного алкогольного гепатита с выраженным цитолитическимсиндромом и коррелировало с результатами морфологического исследования.
Рост концентрации общего билирубина в плазме периферической кровина фоне повышения активности щелочной фосфатазы являлось подтверждением наличия холестатического синдрома. Гепатопротекторные свойстваЛБК-527 проявлялись в значительном при сравнении с контролем сниженииуровней аминотрансфераз на фоне заметного ослабления активности ГГТП.В исследуемых дозах соединения, преимущественно ЛБК-527, предотвраща116ли рост ферментативной активности ЩФ, и плазменной концентрации общего билирубина.
Профилактика холестаза и значимое снижение ферментемиивнутриклеточных энзимов доказывало выраженный цитопротекторный эффект исследуемых веществ в отношении паренхимных клеток печени, причем у ЛБК-527 в обеих изученных дозах. Полученные результаты могут являться обоснованием утверждения о большей широте терапевтического действия ЛБК-527Внутрижелудочное курсовое введение магнийсодержащего производного 2-аминоэтансульфоновой кислоты в дозах 100 и 50 мг/кг/сут сдерживаеталкоголь-зависимую активацию тканевого и системного ПОЛ, повышает активность локальных (по уровню активности СОД) и системных (по активности каталазы) антирадикальных механизмов, снижает активность цитолитического и холестатического синдромов и по силе фармакологического эффекта не уступают препарату сравнения L-аденозил-S-метионину.Также в контроле регистрировали снижение сывороточной активностикаталазы и тканевого уровня СОД на фоне значительного увеличения содержания продуктов ПОЛ в крови, что говорило о декомпенсации антиоксидантного потенциала.
Также наблюдалась депрессия общей антирадикальнойактивности печени на фоне роста интенсивности ПОЛ. Фармакологическоевоздействие на печень животных веществом с цитопротекторной активностью и ЛБК-527 позволяет сдерживать повреждающее действие этанола в отношении как свободнорадикальных реакций, так и биохимических проявлений печеночного повреждения.Методом количественного ИФА определили в гомогенате печени уровни ФНО-альфа, ИЛ-10 и ФРГ. Выбор данной панели цитокинов был обусловлен их критической ролью как в развитии алкоголь-индуцированного повреждения печени, так и в активации защитных – противовоспалительных и регенеративных реакций.
У крыс контрольной группы наблюдали повышениетканевой концентрации ФНО-альфа более, чем в два с половиной раза нафоне почти четырехкратного снижения уровня ИЛ-10. При этом происходило117пропорциональное увеличение концентрации фактора роста гепатоцитов, чтобыло расценено нами как компенсаторная реакция по активации процессовгипертрофии паренхимных клеток в ответ на алкоголь-индуцированную гибель гепатоцитов.
Введение препарата сравнения, а также ЛБК-527 в высшихдозах сопровождалось восстановлением уровня иммунного воспалительноготриггера – ФНО-альфа до значений интактных животных. Также до уровняздоровых крыс восстанавливалось и тканевое содержание противовоспалительного цитокина ИЛ-10. Введение ЛБК-527 приводило к еще большей активации гипертрофических процессов в органе, о чем свидетельствовало повышение содержания ФРГ выше уровня контрольных животных, тогда каккомпозиция ЛХТ-8-16 ограничивалась некоторым снижением концентрацииФНО-альфа и восстановлением концентрации ИЛ-10 до уровня интактныхживотных.При изучении протективной активности фармацетвтической композииЛХТ-8-16 в дозах 60 и 120 мг/кг, мы получили следующие результаты.
Композиция ЛХТ-8-16 сдерживала рост абсолютной и относительной массы печени на фоне воздействия этанола при введении в высшей терапевтическойдозе 120 мг/кг. При введении вещества в дозе 60 мг/кг масса печени, хотя ибыла меньшей, чем в контроле, но не достигала уровня интактных животных.Дозозависимый характер гепатопротекторного действия композициипроявлялся и на микроструктурном уровне. Тканевая и клеточная реакцияпечени крыс на фоне введения ЛХТ-8-16 в дозе 120 мг/кг отличалась меньшей интенсивностью дистрофически-деструктивных процессов, большей сохранностью печеночной паренхимы, сохранением дольковой и балочнойструктуры печени, снижением интенсивности лейкоцитарной реакции (минимальная воспалительная реакция по шкале Кноделя). При снижении дозывыраженность патологических изменений значительно нарастала: встречались бесструктурные гепатоциты в виде мелкозернистых слабобазофильныхмасс, между которыми видны явления слабой или умеренной лейко- и лимфоцитарной инфильтрации.118При морфометрическом анализе препаратов, окрашенных суданом-III,также видно, что композиция ЛХТ-8-16 в высшей дозе достоверно снижаетдолю гепатоцитов с жировыми включениями в цитоплазме и площадь цитоплазмы, занятой липидными каплями, тогда как на фоне введения ЛХТ-8-16в дозе 60 мг/кг такого эффекта не наблюдали.При проведении иммуногистохимического исследования было установлено незначительное влияние композиции на процессы апоптоза гепатоцитов и клеточной пролиферации: экспрессия каспазы-3 умеренно снижалась, тогда как площадь и интенсивность окрашивания микропрепаратов, обработанных антителами к Ki-67, Bcl-2 и PCNA не отличались от контроля.Внутрижелудочное курсовое введение фармацевтической композицииЛХТ-8-16 в дозе 120 мг/кг/сут умеренно сдерживает алкоголь-зависимую активацию тканевого и системного ПОЛ, что не компенсируется повышениемактивности локальных (по уровню активности СОД) и системных (по активности каталазы) антирадикальных механизмов.
Снижение активности цитолиза, налюдаемое при введении композиции в высшей терапевтической дозепротекает на фоне сохраняющегося холестаза.Фармацевтическая композиция ЛХТ-8-16 также оказывала умеренноевлияние на тканевые уровни исследуемых цитокинов: так, под действиемкомпозиции происходило снижение концентрации ФНО-альфа при сравнении с контрольными значениями, однако депрессия показателя не достигалауровня интактных животных.
До интактных значений происходило восстановления концентрации в ткани печени ИЛ-10, тогда как содержание факторароста гепатоцитов оставалось в рамках естественных компенсаторных реакций.При анализе полученных результатов мы установили, что з двух исследуемых соединений наибольшей гепатопротекторной активностью, обладаетвещество ЛБК-527, при этом по совокупности полученных результатов ономожет рассматриваться как альтернатива препарату сравнения аденозилметионину.
В частности, ЛБК-527 не уступает препарату сравнения по силе119противовоспалительного эффекта и способности предотвращать стеатоз гепатоцитов, в то время как у композиции ЛХТ-8-16 установлена лишь умеренная активность. Магнийсодержащее производное аминоэтансульфоновойкислоты превосходит препарат сравнения по активации антирадикальной активности в ткани печени и не уступает ему по способности сдерживать развитие цитолитического и холестатического синдромов в обеих вводимых дозах. ЛХТ-8-16 в суточной дозе 120 мг/кг заметно уступает по этим показателям ЛБК-527 и препарату сравнения. Аденозил-метионин и ЛБК-527 однонаправленно подавляют апоптотическую готовность и пролиферативный потенциал печеночной ткани, что нельзя сказать о композиции ЛХТ-8-16.6.1 Итоги выполнения диссертационного исследованияТаким образом, внутрижелудочное курсовое введение магнийсодержащего производного 2-аминоэтансульфоновой кислоты в дозах 100 и 50мг/кг/сут, фармацевтической композиции ЛХТ-8-16 в дозе 120 мг/кг/сутсдерживает алкоголь-зависимую активацию тканевого и системного ПОЛ,предотвращает глубину и распространенность дистрофического и воспалительного процесса в органе, повышает противовоспалительный и регенераторный потенциал печеночной паренхимы, ингибирует программируемуюгибель гепатоцитов и снижает активность цитолитического и холестатического синдромов.6.2 Перспективы дальнейшей разработки темы исследованияОсновные результаты, полученные при проведении настоящего исследования, помимо ответов на вопросы теоретической и практической медицины, открывают и широкие перспективы для продолжения научного поиска вуказанных направлениях.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
