Диссертация (1140465), страница 15
Текст из файла (страница 15)
ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПЕЧЕНИ ИСОСТОЯНИЕ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ ПРИОСТРОМ АЛКОГОЛЬНОМ ПОВРЕЖДЕНИИ И ВОЗДЕЙСТВИИЛБК-527 И ЛХТ-8-16Воздействие токсических доз этилового спирта на печень сопровождается формированием сложного каскада структурно-функциональных изменений, которые, в конечном счете, влекут формирование специфической морфологической и функциональной картины алкогольного стеатогепатоза и /или стеатогепатита. В настоящем разделе работы изучены некоторые биохимические показатели, отражающие функциональное состояние органа, а также проанализирована активность процессов, характеризующих уровень тканевых и системных оксидативных реакций при алкогольном поражении печени, а также на фоне профилактического введения веществ с потенциальнойгепатопротекторной активностью.4.1 Функциональные изменения печени при остром алкогольном поражении и воздействии исследуемых веществВ группе животных с острым алкогольным поражением регистрировали значительный рост сывороточной концентрации АСТ и АЛТ – в среднемдо 281,7 и 69,1 U/л соответственно с одновременной элевацией ферментативной активности ГГТП в среднем до 7,1 U/л, что свидетельствовало о формировании активного алкогольного гепатита с выраженным цитолитическимсиндромом (табл.
4.6). Концентрация общего билирубина в плазме периферической крови повышалась до 25,7 мкмоль/л, что на фоне роста активностищелочной фосфатазы до 293,1U/л в среднем являлось подтверждением наличия холестатического синдрома. Отличия описываемых показателей от группы интактных животных находилось в пределах статистической значимости.В то же время, уровень общего белка в крови не изменялся на фоне острогоалкогольногопораженияпечени88животных.Таблица 4.6Значения некоторых биохимических показателей функции печени (MSD) на фоне острого алкогольного воздействия и введения исследуемых веществГруппа1ИнтактныеЖивотныеАСТU/л2АЛТU/л3Билирубинмкмоль/л4Общий белокг/л5ЩФU/л6ГГТПU/л713,8±2,311,3±1,46,5±1,228,5±2,3219,5±8,51,1±0,3281,7±5,2*69,1±2,2*27,5±2,2*23,25±3,7293,6±6,1*7,1±0,7*117,8±6,5А40,0±4,3А9,2±1,5В28,4±1,0132,3±7,7А1,2±0,2В155,7±4,3А46,7±3,9А11,8±1,5А31,6±1,9207,1±5,6В2,3±0,2АААВКонтроль сОАПОАП, АМ в дозе 60 мг/кгОАП, АМ в дозе 30 мг/кгОАП, ЛХТ-8-16в дозе 120 мг/кг152,3±3,852,2±3,111,5±1,28929,2±1,5287,8±4,7*1,5±0,2В1ОАП, ЛХТ-8-16в дозе 60 мг/кгОАП, ЛБК-527в дозе 100 мг/кгОАП, ЛБК-527в дозе 50 мг/кг234567216,3±8,3А60,7±4,8*13,5±3,2В26,5±2,3276,5±5,1*3,2±0,5А119,6±3,1А47,2±3,6А8,2±1,4В29,8±2,2211,0±3,4В2,2±0,5В128,7±4,6А45,8±2,7А12,4±1,7В25,7±3,1224,9±7,9В2,9±0,3ВПримечание: * - различия при сравнении с группой интактных животных статистически достоверны при р<0,05;А–различия при сравнении с группами интактных и контрольных животных статистически достоверны при р<0,05;В–различия при сравнении с группой контроля статистически достоверны при р<0,05 (одномерный дисперсионный анализ, критерий Даннета)90Препарат сравнения S-аденозил-L-метионин в обеих дозах – 60 и 30мг/кг, вводимых внутрижелудочно одновременно с введением раствора этилового спирта оказывал положительное воздействие на показатели, отражающие функциональную активность печени и целостность гепатоцитов (табл.4.6): на фоне референтного препарата в высшей дозе снижалась плазменнаяконцентрация АЛТ до 117,8±6,5U/л, АСТ – до 40,0±4,3U/л (р<0,05 при сравнении с контрольной и интактной группой животных), а также ГГТП в среднем до 1,2 U/л.
Описываемые изменения свидетельствовали о снижении активности цитолитического синдрома. При введении препарата в дозе 30 мг/кгсохранялась его профилактическая активность в отношении явлений гиперферментемии, однако значения ферментативной активности были нескольковыше. В высшей вводимой дозе S-аденозил-L-метионин нормализовывалуровень общего билирубина, приводил к снижению концентрации ЩФ доуровня меньшего, чем у интактных животных, тем самым предотвращая развитие явлений холестаза. В дозе 30 мг/кг профилактический антихолестатический эффект препарата сохранялся. Белоксинтетическая функция на фоневведения препарата сравнения не страдала.Профилактическое введение фармацевтической композиции деанолаацеглумата и липоевой кислоты (ЛХТ-8-16) также проявляло свойства гепатопротекторов преимущественно в дозе 120 мг/кг (табл. 4.6).
В высшей исследуемой дозе вещество эффективно предотвращало формирование цитолитического синдрома, однако уступало по степени активности препаратусравнения. При этом, при снижении вводимой дозы до 60 мг/кг наблюдалисохраняющиеся высокие концентрации аланиновой аминотрансферазы, неотличающиеся от контрольных значений, а уровень АСТ в крови хотя и былдостоверно ниже, чем в контроле, выходил далеко за рамки референсныхзначений показателя для данного биологического вида. Ни в одной из вводимых доз фармацевтическая композиция ЛХТ-8-16 не предотвращала формирование холестатического синдрома.
Концентрация общего билирубина в91плазме крови была меньшей, чем в контроле, а уровень общего белка не изменялся.Гепатопротекторные свойства магнийсодержащего производного 2аминоэтансульфоновой кислоты ЛБК-527 были изучены в дозах 100 и 50мг/кг при внутрижелудочном введении (табл. 4.6). В группе крыс, получавших высшую дозу вещества, наблюдали значительное при сравнении с контролем снижение уровней аланиновой и аспарагиновой аминотрансфераз нафоне заметного ослабления активности ГГТП.
В этой же дозе соединениепредотвращало рост ферментативной активности ЩФ, и плазменной концентрации общего билирубина. Профилактика холестаза и значимое снижениеферментемии внутриклеточных энзимов доказывало выраженный цитопротекторный эффект ЛБК-527 в указанной дозе в отношении паренхимных клеток печени. При снижении вводимой дозы до 50 мг/кг/сут практически ненаблюдали заметных колебаний измеряемых биохимических показателей исохранение описываемого гепатопротекторного эффекта вещества на том жеуровне, что и при введении дозы 100 мг/кг. Полученные результаты могутявляться обоснованием утверждения о большей широте терапевтическогодействия ЛБК-527 при сравнении с ЛХТ-8-16.4.2 Состояние свободнорадикальных процессов при остром алкогольномповреждении печени и введении ЛБК-527 и ЛХТ-8-16В настоящем исследовании мы использовали два методических приемадля оценки роли перекисного окисления липидов (ПОЛ) в формированииострого алкогольного повреждения печени и оценке эффективности некоторых перспективных веществ с цитопротекторной активностью: первый – позволил нам оценить интенсивность процессов свободно-радикальной липопероксидации в плазме крови на основе определения уровня так называемыхТБК-зависимых продуктов ПОЛ – малонового диальдегида (МДА), его железо-индуцированной формы (Fe-МДА), при этом активность антиоксидантнойсистемы определяли по уровню каталазы (К) в плазме крови и супероксид92дисмутазы (СОД) в печени.
Второй методический прием не зависит от тиобарбитуровой кислоты и позволяет оценить общий прооксидантный потенциал и антирадикальную активность нормальной или патологически измененной ткани с помощью индукции хемилюминисценции.Принимая во внимание роль перекисного окисления липидов в развитии дистрофических и воспалительных заболеваний печени, в том числе иалкогольной этиологии, было интересным исследовать состояние процессовлипопероксидации у крыс с острым алкогольным поражением. Результатыисследования суммированы в таблице 4.7.У нелинейных лабораторных крыс самцов и самок без признаковнарушения печеночной функции уровень продукта ПОЛ малонового диальдегида в крови составлял в среднем 4,12 мкмоль/л, в его железоиндуцированной формы – 4,84 мкмоль/л.
Активность сывороточной каталазыопределялась на уровне 0,433 мккат/л (таблица 4.7).Иными были результаты изучения процессов ПОЛ в группе животныхс формирующейся токсической острой патологией печени алкогольного происхождения: в плазме крови крыс данной группы установили рост концентрации как МДА до 18,56±1,52 мкмоль/л, так и пропорциональное увеличение содержания его железо-индуцированной формы до 22,29±2,62 мкмоль/л.В описываемой группе активность К уменьшалась даже ниже значений вгруппе интактных животных и составляла 0,162±0,033 мккат/л (таблица 4.7).Мы расценили снижение активности каталазы на фоне значительного увеличения содержания продуктов ПОЛ в крови как состояние декомпенсации антиоксидантного потенциала в данной группе животных.У крыс с формирующимся алкогольным процессомна фоне внутрижелудочного введения препарата сравнения S-аденозил-L-метионина в обеихдозах – 60 и 30 мг/кг, отмечали статистически достоверноеснижение активности гидроперекисных процессов по сравнению с животными контрольнойгруппы, о чем судили по снижению концентрации МДА до 6,28±1,34мкмоль/л.93Таблица 4.7Некоторые показатели ПОЛ сыворотки крови крыс с ОАП на фонепрофилактического внутрижелудочного введения ЛХТ-8-16 и ЛБК-527Показатели, M±SDИсследуемая группаИнтактныеживотныеКонтроль с ОАПОАП, АМ в дозе 60мг/кгОАП, АМ в дозе 30мг/кгОАП, ЛХТ-8-16 вдозе 120 мг/кгОАП, ЛХТ-8-16 вдозе 60 мг/кгОАП, ЛБК-527 вдозе 100 мг/кгОАП, ЛБК-527 вдозе 50 мг/кгМДАFе-МДАКаталазамкмоль/лмкмоль/лмккат/л4,12±1,314,84±1,260,433±0,01918,56±1,52*22,29±2,62*0,162±0,033*6,28±1,34В4,89±1,52В0,724±0,038В10,16±1,55А6,67±1,04В0,514±0,056В13,07±1,15А15,47±2,13А0,398±0,042В17,54±2,41*14,98±1,66А0,226±0,063*8,16±2,43В9,24±2,73В0,638±0,045В9,54±3,72В12,51±2,15А0,406±0,054ВПримечание: * - различия при сравнении с интактными крысами статистически достоверны при р<0,05;А– различия при сравнении с группой контролястатистически достоверны при р<0,05 (одномерный дисперсионный анализ,критерий Даннета)При этом уровень Fe-МДА оставался практически без изменений.Нафоне уменьшения концентрации МДА в группе животных, получавших референтный препарат в высшей дозе происходило статистически значимое по94сравнению с контрольнойповышение уровня каталазы до 0,724±0,038 мккат/л(таблица 4.7), что свидетельствует о срабатывании компенсирующих резервов антиоксидантной системы.Снижение дозы препарата до 30 мг/кг сопровождалось сохранением оптимизирующего действия на баланс системныхгидроперекисных процессов.Использование в качестве гепатопротективного средства фармацевтической комбинации ЛХТ-8-16 приводило к предотвращению дисбалансапроцессов оксидативного характера лишь в высшей терапевтической дозе –120 мг/кг, при этом уровень формирующегося воздействия на системные показатели ПОЛ существенно уступал таковому препарата сравнения Sаденозил-L-метионина в обеих изученных дозах (табл.
4.7).Более обнадеживающие результаты были получены в группах животных с ОАП, получающих в качестве средства фармакологического сопровождения вещество ЛБК-527. В обоих изученных дозах – 100 и 50 мг/кг –введение соединения вызывало уменьшение уровня МДА и его индуцированной формы в пределах их изменений группы интактных животных, приэтом рост активности каталазы крови, превышающий уровень интактныхкрыс, также как и в случае с препаратом сравнения указывал на стимулирующее воздействие вещества на антиокислительный компонент системы(табл. 4.7).Ввиду того, что каталаза является ферментом второго звена в антиокислительной системе, кроме того, не совсем корректно лишь на основанииактивности этого фермента в плазме крови судить об антиоксидантном потенциале печени, в описываемых группах изучили также активность ключевого фермента системы естественных антиоксидантов – супероксиддисмутазы.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
