Диссертация (1140465), страница 14
Текст из файла (страница 14)
3.14 а).77абРисунок 3.13 Микропрепарат печени самца крысы, получавшей соединение ЛБК-527 в дозе: а) 100 мг/кг и б) 50 мг/кг, через 7 суток после курсового введения этанола (гематоксилин-эозин, ув. 200)78Печеночные дольки и балки четко выражены. Гепатоциты полигональной правильной формы с четкими ядрами и контурами, слабыми явлениямижировой дистрофии, на периферии дольки – встречаются преимущественномногоядерные паренхиматозные клетки.абРисунок 3.14 Микропрепарат печени самца крысы, получавшей соединение ЛХТ-8-16 в дозе: а) 120 мг/кг и б) 60 мг/кг, через 7 суток после курсового введения этанола (гематоксилин-эозин, ув.
400) центр дольки79При снижении курсовой дозы вводимого соединения до 60 мг/кг/сутмикроскопически на фоне умеренной мелковакуольной дистрофии гепатоцитов наблюдали единичные участки некроза гепатоцитов с явлениями нейтрофильной лейкоцитарной инфильтрации в области центральной вены (рис.3.14 б).В группе крыс самок с алкогольной острой нагрузкой курсовое внутрижелудочное введение исследуемых веществ в максимальной терапевтической дозе сопровождалось смягчением гистологической картины повреждения печеночной ткани. Так, наблюдалось умеренное полнокровие ткани органа с незначительными явлениями внутрисосудистой агрегации эритроцитов, сохранялась дольковое строение и балочная структура организации печеночной паренхимы.
Гепатоциты центра дольки и на периферии сохранялиполигональную правильную форму, были в основном представлены двухъядерными формами с четкими ядрами и эозинофильно окрашенной цитоплазмой. Слабая воспалительная реакция была представлена слабо выраженной лимфоидной инфильтрацией перипортальных зон.При проведении полуколичественного анализа распространенностивоспалительного процесса и дистрофических изменений в паренхиме печениживотных исследуемых групп (табл.
3.3) установлена высокая интенсивностьпатологических изменений ткани у животных контрольной группы.Наибольшим протективным воздействием при полуколичественной оценкеобладают ЛБК-572 в дозе 100 мг/кг и препарат сравнения в высшей вводимойдозе.
У фармацевтической композиции ЛХТ-8-16 противовоспалительный иантидистрофический потенциал был существенно ниже (табл. 3.3).Активность гепатита также изучили при использовании гистологической шкалы Кноделя (табл. 3.4). На препаратах печени интактной группыпризнаков пери- и внутрипортальных некрозов, воспаления и фиброза закономерно не регистрировали. Формирование острого алкогольного гепатитапроявлялось умеренно выраженными являениями перипортального и внут-80ридолькового некроза, небольшой по интенсивности воспалительной реакцией.Таблица 3.3Распределение животных в исследуемых группахповыраженностивоспалительных и дистрофической измененийпечени крыс с острым алкогольным поражением под действием исследуемых соединений по шкалеZhao et al., 2017Исследуемая группаИнтактныеживотныеКонтроль с ОАГОАП, АМ в дозе 60мг/кгОАП, АМ в дозе 30мг/кгОАП, ЛХТ-8-16 вдозе 120 мг/кгОАП, ЛХТ-8-16 вдозе 60 мг/кгОАП, ЛБК-527 вдозе 100 мг/кгОАП, ЛБК-527 вдозе 50 мг/кгИнтенсивность в баллах0++++++100000*037*0*8А*20А0*6А*40А0*6А*31А0*4420*7А*30А0*6А*40АПримечание: * - различия при сравнении с интактными крысами статистически достоверны при р<0,05;А– различия при сравнении с группой контролястатистически достоверны при р<0,05 (точный критерий Фишера)КурсовоевнутрижелудочноевведениепрепаратасравненияS-аденозил-L-метионина в высшей терапевтической дозе 60 мг/кг/сут на мик81роскопическом уровне снижало активность воспалительной реакции до пограничного – между минимально выраженным и небольшим, причем отмечали дозозависимость протекторного эффекта, при снижении вводимой дозыактивность воспалительной реакции снижалась (табл.
3.4)Таблица 3.4Значение индекса гистологической активности гепатита по Кноделювгруппахкрыс с острым алкогольным поражением под действием исследуемых соединенийИсследуемаягруппаИнтактныеживотныеАктивность воспаленияОтсутствует0(1-4)(5-8)(9-12)10------10*8А2--7А3--8А2--4*6А1-10А---9А1--Контроль с ОАПОАП, АМ в дозе60 мг/кгОАП, АМ в дозе30 мг/кгОАП, ЛХТ-8-16 вдозе 120 мг/кгОАП, ЛХТ-8-16 вдозе 60 мг/кгОАП, ЛБК-527 вдозе 100 мг/кгОАП, ЛБК-527 вдозе 50 мг/кгМинимальное Небольшое УмеренноеПримечание: * - различия при сравнении с интактными крысами статистически достоверны при р<0,05;А– различия при сравнении с группой контролястатистически достоверны при р<0,05 (точный критерий Фишера)82Исследумое соединение из группы магнийсодержащих гепатопротекторов ЛБК-527 демонстрировало заметные протекторные свойства такженаиболее ярко выраженные в высшей терапевтической дозе.
При этом значение индекса Кноделя у всех животных группы не превышало 1, что позволяетнам говорить об отсутствии признаков активного воспаления. При снижениидозы в два раза значение индекса повышалось за счет преимущественно преобладания перипортального воспалительного компонента и появления очаговнекроза гепатоцитов (табл. 3.4).Фармацевтическая композиция деанола ацеглумата и липоевой кислоты ЛХТ-8-16, также исследуемая в двух дозах, также проявляла гепатопротекторные свойства по результатам анализа индекса Кноделя, однако несколько уступала веществу ЛБК-527.
В дозе 100 мг/кг/сут активность воспалительного процесса в препаратах печени крыс характеризовалась как минимальная, что также наблюдали и при двукратном снижении вводимой суточной дозы вещества (табл. 3.4).В препаратах органа животных с острым алкогольным поражением печени, окрашенных суданом-III, наблюдали разитие стеатоза, характеризующегося появлением в гепатоцитах преимущественно центролобулярных отделов дольки смешанной (крупно и мелкокапельной) жировой дистрофии(рис. 3.15). Исследуемые вещества оказывали протекторный эффект, проявляющийся в снижении количества гепатоцитов с явлениями жировой дистрофии, а также уменьшении площади жировых капель в цитоплазме в пересчете на 1 гепатоцит (рис.
3.15, рис. 3.16).При этом, наиболее контрастными были изменения количества гепатоцитов с явлениями жировой дистрофии: если на фоне препарата сравнения ихдоля снижалась до 28% от общего числа гепатоцитов в исследуемых поляхзрения, то профилактическое введение ЛХТ-8-16 снижало показатель лишьдо 56%, что, однако обладало статистической значимостью при сравнении сконтролем. Эффект ЛБК-527 был сопоставим с эффектом препарата сравнения.83абвгРисунок 3.15 – Препарат печени (окраска суданом-III, ув. 400): а) крысыс ОАП (контроль); б) крысы с алкогольным процессом на фоне введенияАМ в дозе 60 мг/кг/сут: в) ЛБК-527 в дозе 100 мг/кг/сут; г) ЛХТ-8-16 в дозе 120 мг/кг/сут; стрелками указаны капли жираПри морфометрическом исследовании срезов печенинами были получены следующие результаты, суммированные в таблице 3.5.
У животныхконтрольной группы наблюдали гипертрофию гепатоцитов, снижение площади ядра с пропорциональным уменьшением ядерно-цитоплазматическогокоэффициента, а также снижением доли многоядерных паренхимных клеток(рис. 3.17).Курсовое внутрижелудочное введение фармацевтической композицииЛХТ-8-16 в дозах 120 и 60 мг/кг/сут не снижало формирования гипертрофиигепатоцитов, однако сдерживало явления кариопикноза в группе животных,84получающих вещество в высшей дозе. Соотношение одно- и многоядерныхгепатоцитов не отличалось от такового животных контрольной группы. Воздействие магнийсодержащего соединения ЛБК-527 в высшей вводимой дозе100 мг/кг/сут вызывало сопоставимый с препаратом сравнения S-аденозил-Lметионином профилактический эффект в отношении формирования гипертрофии гепатоцитов, а также уменьшения размеров ядра.
В совокупности сописываемыми феноменами статистически значимое при сравнении с контролем увеличение доли двухъядерных гепатоцитов свидетельствовало обактивации регенераторных механизмов в ткани органа. Снижение вводимойдозы вдвое сопровождалось минимизацией отличий от животных контрольной группы.в%9080787056*60495040303834*28*27*29*20100Доля гепатоцитов с явлениями жировой дистрофииКонтроль с ОАГГептрал 60 мг/кгДоля цитоплазмы, занятая жировыми каплямиЛБК-527 100 мг/кгЛХТ-8-16 120 мг/кгПримечание: * - различия при сравнении с контролем с ОАП статистическизначимы при р<0,05 (критерий Даннета)Рисунок 3.16 Морфометрическая характеристика явлений жировой дистрофии печени крыс при остром алкогольном повреждении и действииЛБК-527 и ЛХТ-8-16 (пояснения в тексте)85Таблица 3.5Значения некоторых морфологических показателейгепатоцитов крыс(MSD) с острым алкогольным поражением печени под действием исследуемых соединенийИсследуемаяПлощадь цито-Площадь ядра,Коэффициентгруппаплазмы, мкм2мкм2Я/Ц205,2±8,448,3±1,60,23±0,02349,6±7,9*34,9±2,1*0,10±0,01*244,4±10,2*А45,8±1,8А0,18±0,02А289,3±9,3*А41,3±2,5А0,14±0,03*317,6±7,1*40,4±1,5*А0,12±0,01*335,8±8,6*37,3±1,4*0,11±0,01*259,3±9,0*А44,8±1,4А0,17±0,02А300,6±9,9*39,6±2,0*0,13±0,02*ИнтактныеЖивотныеКонтроль сОАПОАП, АМ в дозе 60 мг/кгОАП, АМ в дозе 30 мг/кгОАП, ЛХТ-8-16в дозе 120 мг/кгОАП, ЛХТ-8-16в дозе 60 мг/кгОАП, ЛБК-527в дозе 100 мг/кгОАП, ЛБК-527в дозе 50 мг/кгПримечание: ОАП – острое алкогольное повреждение печени; АМ – Sаденозил-L-метионин; * - различия при сравнении с интактными крысамистатистически достоверны при р<0,05; А – различия при сравнении с группойконтроля статистически достоверны при р<0,05 (одномерный дисперсионныйанализ, критерий Даннета)8683,1*А 89,777,581,2Доля многоядерных гепатоцитов, %80А 88,9*76,682,7657075808590ЛБК-527 50 мг/кгЛБК-527 100 мг/кгЛХТ-8-16 60 мг/кгЛХТ-8-16 120 мг/кгАМ 30 мг/кгАМ 60 мг/кгКонтроль ОАПИнтактные крысы95Примечание: * - различия при сравнении с интактными крысами статистически достоверны при р<0,05; А – различия при сравнении с группой контролястатистически достоверны при р<0,05 (одномерный дисперсионный анализ,критерий Ньюмена-Кейлса)Рисунок 3.17 – Доля многоядерных гепатоцитов в структуре паренхимных клеток печени крыс с ОАП874.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
