Диссертация (1140441), страница 6
Текст из файла (страница 6)
В эксперименте доказана активация системыкомплемента за счет активации С3 компонента под влиянием перфторана [8,55, 100]. Наиболее выраженным специфическим действием перфторана является существенное повышение активности фактора IV тромбоцитов иуменьшение уровня фибриногена, обусловленная воздействием эмульгатора[8, 59, 100]. Перфторан существенно угнетает адгезию, хемотаксис и метаболизм нейтрофилов, уменьшает дегрануляцию лизоцима [8, 100, 102, 122, 131,142].Проведенный некоторыми авторами анализ влияния перфторана на параметры транспорта газа крови показал, что дисперсные частицы перфторана, присутствующие в кровотоке будут улучшать условия газообмена в тканях [8, 55, 100]. Механизм защитного действия перфторана связан не толькос газотранспортными свойствами, но и с непосредственным взаимодействиемперфторуглерода и его эмульгаторов с мембранами клеток крови и органов[8, 55, 100].Использование перфторана для коррекции гемомикроциркуляции приэкспериментальной регидратации организма в работах показало, что инфузияперфторана после длительной дегидратации оказывают более выраженныйкорригирующий эффект, чем инфузии физиологического раствора равногообъема [8, 77, 100].
В ранее выполненных работах показано, что в течение10-ти суток после инфузии перфторана обезвоженным животным, практиче28ски полностью восстанавливается архитектоника микроциркуляторного русла и особенно, его капиллярного отдела, что связано с частичным восстановлением ранее не функционировавших сосудов и образованием новых капилляров. При этом среднее значение диаметра микрососудов возвращается кисходным величинам, а развитие сети капилляров осуществляется посредством образования и удлинения почек роста, а также путем формированиякапиллярных петель [138].Таким образом, вышеуказанные свойства перфторана предопределилииспользование его в качестве противошокового, кардиопротекторного средства при лечении инфаркта миокарда [8, 21, 24, 100, 148, 156, 184], при лечении тяжелых анемий [8, 100, 122, 178, 181, 182], при трансплантации сердцаи легких [39, 98, 100], при трансплантации поджелудочной железы [100, 185],при трансплантации почек [37, 100, 142] и др.В литературе отсутствуют сведения о возможности коррекции перфтораном повреждений лимфомикроциркуляторного русла и регионарных лимфатических узлов при краш-синдроме.
Недостаточно изученное действиеперфторана в данном аспекте определило актуальность, цель и задачи нашегоисследования.29Глава 2. Материалы и методы исследования2.1. Объект исследованияОбъектом исследования являлись 140 половозрелых беспородных белых крыс обоего пола, массой 180-200 г. Согласно поставленным задачамэкспериментальные животные были распределены на 4 группы.Распределение материала по экспериментальным группам и методамисследования представлено в таблице 1.Таблица 1Распределение экспериментальных животныхпо группам и методам исследования№Группы экспериментаМорфологические и статистическиеП\Пметоды.ЛимфатическиеЛимфатическиесосудыузлы1Интактная группа20202Модель РПП СДС4040Модель РПП СДС + коррекция 4040(без коррекции)3физ.
р-ром (контроль)4Модель РПП СДС + коррекция 4040перфтораном (опыт)5Общее количество исследован-140ных животных6Итого140Все исследования во время планирования эксперимента были одобреныэтическим комитетом Дагестанского государственного медицинского уни30верситета. Этический комитет счел возможным дать разрешение на проведение данного научного исследования. Воспроизведение модели СДС тяжелойстепени достигалось по ранее использованной методике [8, 76, 100], применяемой в коллективе университета.Путем сдавления двух задних конечностей крыс в специально сконструированных тисках в течение 8 часов (соответствует тяжелой степениСДС).
На наш взгляд, избранная нами модель СДС достаточно объективноотражает временное развертывание адаптивных процессов, позволяет оценить их этапность и степень их коррекции. В то же время она является общеймоделью и отражает закономерности процесса, не претендуя на расшифровкумеханизмов частных проявлений.Эксперименты проводились под наркозом, путем внутримышечноговведения кетамина (из расчета 25 мг/г массы тела). После декомпрессии животные наблюдались в течение 1-3 суток (первые 72 часа соответствуют раннему посткомпрессионному периоду СДС тяжелой степени РПП СДС) [95].Указанные сроки наблюдения позволили нам в РПП СДС тяжелой степенипроследить динамику развития изменений в лимфатическом русле подкожной фасции бедра (ПФБ) сдавленной конечности и отдаленных от областикомпрессии органов: в брыжейке тонкой кишки (БТК), в фиброзной капсулепочки (ФКП), мышечной части диафрагмы (МЧД).
Кроме того, удалось охарактеризовать состояние регионарных лимфатических узлов: подколенной(ПКЛУ), поясничной (ПЛУ) и брыжеечной (БЛУ) группы, а также оценитьстепень их обратимости в ходе контрольной (физиологическим раствором) иопытной (перфтораном) коррекции.В целях коррекции, сразу после декомпрессии проводилась комбинированная (внутривенная и лимфотропная) инфузионная терапия перфтораном(10% эмульсия) или физиологическим раствором (контроль), которые вводились в хвостовую вену крысы (из расчета 2,0 мг/кг массы тела) 1 раз в сутки втечение 3-х дней. Одновременно эти плазмозаменители вводились лимфотропно в количестве 0,2-0,4 мл в межпальцевые промежутки передних и зад31них конечностей с последующим массажем конечности и пассивными движениями в суставах, т.е. моделированием действия фактора лимфотока.2.2.
Методы исследованияВ работе использовались следующие методы:1 Морфологические методы2 Морфометрические методы3 Методы статистической обработки биологического материала1. Морфологические методы:В работе применен комплекс современных морфологических методов,направленных на оценку:а) состояния лимфатического русла;б) состояния регионарных лимфатических узлов.В первой группе экспериментов интактные животные забивались путемдекапитации, выделялись тотальные фрагменты подкожной фасции бедра,брыжейки тонкой кишки, фиброзной капсулы почки и мышечной части диафрагмы фиксировались в 12% нейтральном формалине. Для выявления лимфатических сосудов в работе использовалась безинъекционная окраска пленочных препаратов азотнокислым серебром по В.В.
Куприянову (1965).С целью выяснения состояния различных групп регионарных лимфатических узлов: поясничных (ПЛУ), брыжеечных (БЛУ) и подколенных(ПКЛУ), указанные лимфатические узлы забирались сразу после забоя животных, которые фиксировались в 12% нейтральном формалине, формол спирте, жидкостях Карнуа и Буэна. После парафиновой проводки, на санноммикротоме изготавливались срезы лимфатических узлов толщиной 5–7 мкм.Срезы выполняли на уровне ворот лимфатических узлов (середина узла), которые окрашивали гематоксилин – эозином и пикрофуксином, по Ван – Ги-32зон.
Для выявления аргирофильных волокон срезы окрашивали азотнокислым серебром по Футу.а) оценка состояния лимфатического русла при моделировании раннегопосткомпрессионного периода СДС тяжелой степени и в динамике коррекции инфузией плазмозаменителей.Во 2-й группе экспериментов наркотизированные животные забивалисьпутем декапитации через 1,5 и 3 суток после декомпрессии, а в 3-й и 4-йгруппах также (через 1,5-3,0 суток) после комбинированной инфузионной терапии плазмозаменителями. Выделенные тотальные фрагменты подкожнойфасции бедра, брыжейки тонкой кишки, фиброзной капсулы почки и мышечной части диафрагмы фиксировались в 12% нейтральном формалине.
Длявыявления лимфатических сосудов в работе использовалась безинъекционнаяокраска пленочных препаратов азотнокислым серебром по В.В. Куприянову(1965). Микроскопия и микрофотосъемка проводились с использованиеммикроскопа «Wilomed» (Германия) сопряженного через видеокамеру с компьютером при увеличении: об: 10; 20; ок. 10.б) оценка состояния лимфатических узлов в РПП СДС и в динамикекоррекции его комбинированой инфузионной терапией плазмозаменителей.На вышеуказанных сроках наблюдения, с целью выяснения реакции различных групп регионарных лимфатических узлов на «декомпрессию» и степеньих коррекции в динамике комбинированной инфузионной терапии в посткомпрессионном периоде СДС тяжелой степени, изучались следующие группы соматических и висцеральных лимфатических узлов: поясничные (ПЛУ),брыжеечные (БЛУ) и подколенные (ПКЛУ). Сразу после забоя животных забирались указанные лимфатические узлы, которые фиксировались в 12%нейтральном формалине, формол-спирте, жидкостях Карнуа и Буэна.
Послепарафиновой проводки, на санном микротоме изготавливались срезы лимфатических узлов толщиной 5–7 мкм. Срезы выполняли на уровне ворот лимфатических узлов (середина узла), которые окрашивали гематоксилин –33эозином и пикрофуксином, по Ван – Гизон. Для выявления аргирофильныхволокон срезы окрашивали азотнокислым серебром по Футу.2. Морфометрические методы:а) морфометрический анализ лимфатического русла проведен путем измерения диаметра различных звеньев лимфатического русла изученных объектовисследования с помощью окуляр – микрометра «МОВ- 15» при увеличенииоб. 20, ок.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
